蓝玉簪颗粒对肝纤维化的治疗作用分析-therapeutic effect of blue hosta granules on hepatic fibrosis.docxVIP

缩略词表（Abbreviation）缩略词英文全称中文全称HFhepatic fibrosis肝纤维化MDAMalcndialdehydel丙二醛GSHGlutathione谷胱甘肽DMNdimethyl nitrosamine二甲基亚硝胺SODsuperoxide dismutase超氧化物歧化酶HEhematoxylin and eosin staining苏木精伊红染色LYZGentiana veitchiorum Hemsl蓝玉簪TNF-αtumor necrosis factor-α肿瘤坏死因子-αTGF-βtransforming growth factor-β转化生长因子-βROSreactive oxygen species活性氧IFN-γinterferon-γ干扰素-γILinterleukin白细胞介素MMPsmatrix metalloproteinase基质金属蛋白酶TIMPstissue inhibitor of metalloproteinase组织金属蛋白酶抑制剂ECMextracelluar matrix细胞外基质PDGFplatelet-derived growth factor血小板源生长因子蓝玉簪颗粒对肝纤维化的治疗作用研究硕士研究生：李鹏导师：田琼 教 授 第四军医大学药理教研室，西安 710032 中 文 摘 要目的 纤维化（fibrosis）可发生于多种器官，引起器官内纤维结缔组织增生， 实质细胞减少，持续进展可导致器官结构破坏和功能减退，直至器官衰竭， 严重影响人类健康。器官纤维化（organ fibrosis）一直是世界医学的研究热点 问题之一。糖皮质激素是目前治疗肝纤维化的常规用药物，但它可以引起严 重的免疫系统紊乱和骨代谢疾病。目前开展的中药治疗纤维化的研究已初步 显示了中药在防治各种器官（肺脏、肝脏、心脏等）纤维化方面的良好前景。 蓝玉簪龙胆是一种藏族常用的治疗肺部感染的草药。我们的研究证实其在博 莱霉素诱导的动物肺纤维化治疗中，具有对抗和治疗肺纤维化的作用，并且 不具有糖皮质激素副作用（国家发明专利申请号：200510042636.3）。本实验 的目的是用蓝玉簪颗粒对二甲基亚硝胺(DMN)诱导的实验性肝纤维化进行干 预，并观察其对肝纤维化的治疗作用，初步探讨其作用机理，试图为临床肝 纤维化的寻找新的药物。方法（1）30 只大鼠随机分为 5 组，每组 6 只：正常对照组、二甲基亚硝胺模 型组（DMN 组）；蓝玉簪龙胆治疗组（LYZ 组）；强的松治疗组（强的松组）； 蓝玉簪龙胆+强的松治疗组（LYZ+强组）。参照 JENKINS 等介绍的制备 DMN 诱导大鼠肝纤维化模型的方法。同时正常对照组按 2 ml/kg 体重剂量腹腔注射 生理盐水，DMN 组、LYZ 组、强的松组、LYZ+强组按 2 ml/kg 体重剂量腹 腔注射(5 mg/L)DMN 溶液，每周连续注射 3 d，共 4 wk。其中正常对照组按 2 ml/kg 体重剂量腹腔注射生理盐水，其余各组按 2 ml/kg 体重剂量腹腔注射(5 mg/L)DMN 溶液，每周连续注射 3 d，共 4 wk，造模同时按分组给与药物干预。 于建模后 28d 腹主动脉放血处死各组动物，迅速摘取肝脏，右叶肝制成组织匀浆进行生化检测，左叶肝投入 10%甲醛中固定，常规包埋，切片，进行 HE、MASSON 染色，光学显微镜下观察观察纤维化的程度。肝组织匀浆后进行超 氧化物歧化酶（SOD）、单胺氧化酶（MAO）活力、丙二醛（MDA）、谷胱甘 肽（GSH）含量检测。血清用于谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）及 透明质酸（HA）的测定。（2）42 只大鼠随机分为 6 组：正常对照组 6 只；二甲基亚硝胺模型组 6只（DMN 组）；强的松治疗组 6 只（强的松组）；蓝玉簪颗粒高剂量组 8 只（KL 高剂量组）；蓝玉簪颗粒中剂量组 8 只（KL 中剂量组）；蓝玉簪颗粒低 剂量组 8 只（KL 低剂量组）。建立 DMN 诱导的肝纤维化动物模型，建模当 日对各组动物进行治疗：正常对照组：每日按体重 0.5ml/100g 生理盐水灌胃； 二甲基亚硝胺对照组（DMN 组）：每日按体重 0.5ml/100g 生理盐水灌胃；强 的松治疗组：将强的松片研成粉末，加蒸馏水配制成 0.06％的溶液，参照文 献按 6mg/kg 进行灌胃；蓝玉簪颗粒高剂量组（KL 高剂量组）：蓝玉簪颗粒 由第四军医大学第三附属医院药剂科制作，主要成分为蓝玉簪龙胆，辅以三 七总苷。每日按 4 g 生药?kg 体重灌胃；蓝玉簪颗粒中剂量组（KL 中剂量组）： 每日按 2 g 生药?kg 体重灌胃；蓝玉簪颗粒低剂量组（KL 低剂量组）：每日按1 g 生药?kg 体重灌胃。于建模后 2