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力竭运动后大鼠海马nf-nf in hippocampus of rats after exhaustive exercise
学位论文独创性声明本人声明,所呈交的学位论文系在导师指导下本文独立完成的研究成果。文中任何 引用他人的成果,均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人 的任何形式的研究成果,也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。与我一同工作 的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本文如违反上述声明,愿意承担以下责任和后果:1、交回学校授予的学位证书;2、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报;3、本文按照学校规定的方式,对因不当取得学位给学校造成的名誉损害,进行公开道 歉。4、本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。论文作者签名:日期:年月日学位论文版权使用授权书 本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权山西医 科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩 印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时,署名单位 仍然为山西医科大学。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名:日期:年月日 指导教师签名:日期:年月日(本声明的版权归山西医科大学所有,未经许可,任何单位和个人不得擅自使用)前 言力竭性运动是指动物或人进行运动直到完全不能运动为止的现象,是由于运动负荷过 大,超过机体的承受能力,从而导致多器官功能紊乱的病理状态。随着现代体育竞技的飞 速发展,体育竞争日趋激烈,运动训练的负荷也接近甚至超出人体生理负荷的极限。近年 来,力竭性运动引起脏器损伤的现象受到重视,细胞凋亡及其对机体运动相关器官、系统 功能的可能影响倍受关注,如何防治运动性损伤已成为目前运动医学、军事医学和临床医 学领域的重大课题。依据运动性疲劳首先发生的是运动性中枢疲劳的顺序来看,运动对神经 系统的影响主要表现在脑组织,中枢机能下降是运动性损伤的主要方面。袁琼嘉等[1]的研 究表明,力竭运动后即刻,大鼠大脑组织毛细血管周围的神经细胞和神经胶质细胞肿胀, 且毛细血管周围出现明显的空泡区,毛细血管壁有突起并伸入管腔,基膜增厚,内皮细胞、 周细胞及毛细血管周围的神经胶质细胞和神经细胞内均出现线粒体肿胀、嵴断裂;力竭后 24h,各种微细结构的异常变化均有明显好转,但仍未完全恢复。因此寻找缓解中枢运动 性损伤的方法,减少伤病的发生是亟待解决的问题。NF-κB 是一类分布广泛的,控制多种基因转录、增强许多基因表达的重要调节因子。 NF-κB 是 NF-κB/Rel 蛋白家族中重要的一员,由多肽 P50 和 P65 亚基形成 P50-P65 同 源二聚体及异源二聚体,其调控基因转录的功能主要由p65蛋白介导。中枢神经系统尤其 是大脑皮层和海马神经元内 NF-κB 的表达具有广泛的生物学意义,研究表明NF-κB在脑 损伤和脑退行性病变(如阿尔茨海默病)过程中有重要作用[2]。NF-κB 又被称为“应激感 受器”,运动、缺血缺氧、细菌、病毒和紫外线照射等多种刺激都可促使它激活[3],其参与 调控基因转录的功能是机体多种生理功能、病理生理活动的分子基础。激活的NF-κB,可 调节抗氧化酶、氧化应激反应酶及细胞因子或化学增强剂的表达,参与细胞的增殖、分化、 适应和凋亡[4]。脑源性神经营养因子(BDNF)是神经生长因子(NGF)家族的成员之一,是1982年 Bard[5]等从猪脑中成功纯化出来的一种碱性蛋白。BDNF 主要表达于哺乳动物的中枢神经 系统,在脑发育的初期阶段 BDNF 仅为低水平表达,然而成年期却逐渐增加成为脑内不 同部位分布最广泛的神经营养因子。采用免疫组织化学方法对大鼠进行研究发现,BDNF 免疫阳性神经元广泛分布在脑内包括大脑皮层、海马、基底前脑、纹状体、下丘脑和小脑, 其中以海马和皮层中含量最高[6]。BDNF的表达对周围和中枢神经元有广泛而重要的作用, 对多种神经元有促进生存、有助分化和再生、增进代谢、增强功能表达及营养、支持、保 护的作用[7]。本课题通过大鼠游泳运动而建立力竭运动模型,利用 Western-Blot 技术和免疫组织化 学技术检测运动结束后不同时间点大鼠海马内 NF-κB、BDNF 分别发生何种程度的适应性 变化,初步探讨力竭运动后中枢神经系统中转录因子 NF-κB 活化后的病理生理作用及 BDNF 介导的神经保护作用之间的相互关系。材料与方法1.实验材料1.1 实验试剂(1)兔抗大鼠 NF-κBP65 多克隆抗体,兔抗大鼠 BDNF 多克隆抗体(北京中杉金桥生物 技术公司提供)(2)即用型 SABC 免疫组化试剂盒 (武汉博士德生物工程有限公司)(3)DAB 显色剂 (武汉博士德生物工程有限公司)(4
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