联合阻断egfr和mtor信号通路对egfrtki耐药鼻咽癌细胞的作用及其机制的研究-study on the effect and mechanism of blocking egfr and mtor signaling pathway in combination on egfr tki - resistant nasopharyngeal carcinoma cells.docxVIP

独创性声明本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或 集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文 中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。学位论文作者签名:日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本 人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索， 可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本论文属于保密□ ，在年解密后适用本授权书。不保密□。（请在以上方框内打“√” ）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日目 录英文缩略词表 ................................................. 1摘 要 ........................................................ 2ABSTRACT 3前 言 ........................................................ 5材料与方法 ................................................... 7实验结果 .................................................... 15讨论 ..................................................... 19结论 ..................................................... 21参考文献 .........................................................................22综 述 ....................................................... 27致 谢 ....................................................... 42英文缩略词表EGFREpidermal growth factor receptor表皮生长因子受体mTORMammalian target of rapamycin雷帕霉素靶蛋白p-AKTPhospho-AKT磷酸化 AKTp-S6KPhospho-S6K磷酸化 S6KNPCNasopharyngeal carcinoma鼻咽癌TKITyrosine kinase inhibitor酪氨酸激酶抑制剂mTORC1mTOR complex 1mTOR 复合体 1mTORC2mTOR complex 2mTOR 复合体 1FRBFKBP12–rapamycin bindingFKBP12-雷帕霉素结合区域 SPSSStatistical Program for Social Sciences社会科学统计程序联合阻断 EGFR 和 mTOR 信号通路对 EGFR-TKI 耐药鼻咽癌细胞的作用及其机制的研究华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心 硕士研究生：刘 媛导师：胡国清 教授中文摘要 目的：体外研究表皮生长因子受体（Epidermal growth factor receptor，EGFR）抑制剂 吉非替尼（Gefitinib）和雷帕霉素靶蛋白（Mammalian target of rapamycin，mTOR） 抑制剂依维莫司（Everolimus）在 gefitinib 耐药鼻咽癌细胞中联合作用的效果及机制。 方法：MTT 法测定单药及联合用药对人鼻咽癌细胞株 HONE1 的增殖抑制；流式细胞 术检测药物单独或联合作用于 HONE1 细胞株 48h、72h 后，各组细胞凋亡及周期分 布的改变；Western Blot 检测单药及联合用药 48h 后，HONE1 细胞中磷酸化 AKT（Phospho-AKT，p-AKT）和磷酸化 S6K（Phospho-S6K，p-S6K）表达水平的变化。 结果：MTT 法结果显示 gefitinib 和 everolimus 对 HONE1 细胞的生长抑制均呈剂量依 赖性，并由此计算出，gefitinib 的 IC50 为 17.92μmol/L，everolimus 的 IC50 为 2.46nmol/L，但二者的联合作用并没有表现出明显的协同效应（P0.05）；流式细胞