舒肝颗粒对非酒精性脂肪性肝病FFAADITNF-α影响.docVIP

舒肝颗粒对非酒精性脂肪性肝病FFAADITNF-α影响 　　摘 要 目的：探讨舒肝颗粒对非酒精性脂肪性肝病大鼠游离脂肪酸(FFA)、脂联素(ADI)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法：60只雄性SD大鼠随机分为两组，正常对照组(10只)用普通饲料喂养，实验组(50只)用高脂饲料喂养。12周末，将造模成功的实验组大鼠随机分为5个亚组，即模型组、罗格列酮组、舒肝颗粒高、中、低剂量组。正常对照组和模型组大鼠用蒸馏水灌胃，各药物干预组用不同浓度的药物灌胃。第16周末，处死所有大鼠，采集血清。观察各组大鼠血清中转氨酶、血脂、FFA、ADI、TNF-α的变化。结果：模型组转氨酶、血脂、FFA、TNF-α明显升高，ADI明显降低，与正常组比较差异有显著性(P＜0.05)。治疗后，转氨酶、血脂、FFA和TNF-α降低，ADI升高，与模型组比较差异有显著性(P＜0.05)。结论：舒肝颗粒可以降低血脂，减轻肝脏脂肪变性和炎症程度。 　　关键词 非酒精性脂肪性肝病 游离脂肪酸 脂联素 舒肝颗粒 　　材料与方法 　　实验动物：清洁级雄性SD大鼠60只，体重80～120g，由泸州医学院实验动物中心提供，清洁级屏障实验室饲养。 　　试剂及药物：①主要试剂：胆固醇购自郑州利伟生物实业有限公司，食用猪油购自泸州市汇通超市，透明质酸试剂盒购自上海海研医学生物技术有限公司，游离脂肪酸ELISA试剂盒和脂联素ELISA试剂盒购自上海卓康生物科技有限公司，肿瘤坏死因子-α ELISA试剂盒购自深圳鹏一生物科技有限公司。②主要药物：罗格列酮购自太极集团重庆涪陵制药厂有限公司，舒肝颗粒由泸州医学院附属医院药研所赠送。 　　实验方法：将大鼠适应性喂养1周后，随机分为正常对照组(10只)和实验组(50只)。正常对照组给予普通饲料喂养，实验组给予高脂饲料(88%普通饲料+2%胆固醇+10%猪油)喂养，所有大鼠均自由饮水进食。12周末，处死5只实验组大鼠，根据2002年中华医学会脂肪肝和酒精性肝病学组提出的非酒精性脂肪性肝病诊断标准［1］判断造模是否成功。将造模成功的大鼠随机分为5个亚组，即模型组、罗格列酮组、舒肝颗粒高、中、低剂量组。第13周开始，正常对照组和模型组给予蒸馏水1ml/100g灌胃，罗格列酮组给予罗格列酮0.4mg/kg/日灌胃??舒肝颗粒高剂量组给予舒肝颗粒3g/kg/日灌胃，中剂量组给予舒肝颗粒2.5g/kg/日灌胃，低剂量组给予舒肝颗粒2g/kg/日灌胃。药物干预时间为4周，所有实验组大鼠均继续给予高脂饲料喂养。 　　标本采集：所有大鼠16周后均隔夜禁食，次日以0.2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，心脏取血后处死。 　　统计学处理：采用SPSS13.0统计软件进行统计学处理，计量资料以Ｘ±S表示，连续变量方差齐性者采用单因素方差分析，方差不齐者采用秩和检验。等级资料采用X2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。 　　结 果 　　模型建立：通过高脂饮食建立大鼠非酒精性脂肪肝病模型，实验过程中未发生大鼠死亡，4组大鼠体质量均呈进行性增长，55只实验大鼠均进入结果分析。见表1～3。 　　 　　讨 论 　　目前NAFLD的发病机制尚不清楚，但研究表明胰岛素抵抗、糖脂代谢异常和氧应激及脂质过氧化等与之密切相关。游离脂肪酸(FFA)升高是引起胰岛素抵抗的重要原因。肿瘤坏死因子α(TNF-α)和脂联素(ADI)可以影响糖脂代谢、胰岛素敏感性及炎症反应等多个生理过程，故在NAFLD的研究中备受关注。 　　TNF-α主要由单核巨噬细胞产生，近年研究发现，脂肪组织也可分泌TNF-α，而脂肪细胞分泌的TNF-α是导致胰岛素抵抗的主要因素之一［２］。TNF-α能刺激系膜产生氧自由基，使氧化脂质产物增多，造成细胞内膜损伤［３］。肝细胞的TNF-α受体具有高亲和力、低容量等特点，即使对低浓度的TNF-α也可发生强烈反应。当肝细胞与TNF-α受体结合后通过调节信号转录从而导致肝细胞坏死和凋亡［４］。 　　FFA是脂肪代谢的中间产物，研究表明FFA与胰岛素抵抗(IR)呈正相关，胰岛素抵抗患者的血清FFA明显高于正常人群［５］。FFA有细胞毒性，可引起生物膜损失，导致肝细胞变性、坏死和炎细胞浸润，并可增强脂质过氧化反应损伤肝细胞。同时FFA可以增强TNF-α的毒性进一步加重胰岛素抵抗和肝细胞损伤。 　　脂联素是由脂肪细胞分泌的一种细胞因子，有抗炎、抗氧化、抑制细胞凋亡和增加胰岛素敏感性的作用［４］。脂联素可以抑制TNF-α在肝脏和血清中的表达，并可增加肝脏脂肪酸氧化，从而保护肝脏。本实验结果显示，模型组与正常组比较，转氨酶、血脂、FFA、TNF-α明显升高，ADI明显降低，差异有显著性(P＜0.05)；经罗格列酮和舒肝颗粒治疗后，转氨酶、血脂、FFA、T