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芒果皮提取物体外清除自由基作用研究 　　 　　摘要：目的：对芒果皮提取物的体外清除自由基作用进行研究，为芒果皮的开发利用提供理论依据。方法：分别以水、95%乙醇和石油醚为溶剂提取芒果皮有效成分，再采用紫外-可见分光光度法研究芒果皮3种溶剂提取物对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的清除作用。结果：芒果皮的水提取物、95%乙醇提取物和石油醚提取物对上述3种自由基均有很好的清除作用，并且清除率与样品浓度呈现一定的线性关系，浓度越高，清除作用越强；3种提取物对自由基的清除能力为95%乙醇提取物水提取物石油醚提取物。结论：芒果皮提取物对自由基有良好清除作用，在药品和保健品方面具有广阔的开发利用前景。 　　关键词：芒果皮；提取物；自由基；芒果 　　中图分类号：R284文献标识码：A 　　文章编号：1007-2349（2012）02-0050-03 　　 　　芒果系漆树科芒果属植物芒果（Mangifera indical L.）的成熟果实，主产于热带、亚热带，是世界第二大热带水果，被誉为“热带水果之王”。在我国，芒果主要分布在云南（东南部）、贵州（南部）和广西（南部）三省，多为家养栽培，为当地的重要经济作物。研究表明，芒果果皮含有大量的黄酮［1］、山酮［1］、多糖［2］以及种类众多的小分子多酚类物质［3］，具有止咳化痰［4］、抗炎［4］、抑菌［5］、抗氧化［6］等作用。目前，芒果除鲜食外，主要被加工成饮料、罐头、果冻等，加工过程中产生的约占鲜果重量5%~10％的芒果皮则被抛弃，不仅浪费资源，而且污染环境。因此，如何利用废弃的芒果皮资源，进行开发利用，变废为宝，具有十分重要的意义。本文对芒果皮的水提取物、乙醇提取物和石油醚提取物的清除自由基活性进行研究，为芒果皮的科学开发利用提供理论依据。 　　1实验材料 　　1.1试剂与仪器AB204-N型电子天平（瑞士Mettler公司）；Shimadzu UV2401PC紫外可见分光光度仪（日本岛津公司）；HH-4数显恒温水浴锅（天津市恒温水浴锅厂）；LD-500刀片式粉碎机（长沙市岳麓区常宏制药机械设备厂）；PGX-330A-12H光照箱（宁波莱福科技有限公司）。核黄素（VB2）、氯化硝基四氮唑兰（NBT），番红花红（Safranine T），蛋氨酸，2，2-二苯基-1-苦肼基（DPPH）购自Sigma-Aldrich公司。乙醇、石油醚、二甲基亚砜（DMSO）为化学纯，购自昆明汕滇精细化学品有限公司；其它试剂均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水。 　　1.2药材芒果，购自昆明水果市场。 　　2实验方法 　　2.1芒果皮提取物的制备取新鲜成熟芒果，自来水洗净，晾干，用水果刀均匀削取果皮，果皮厚度约1~5 mm。果皮置阳光下晒干，用刀片式粉碎机粉碎至20 mm以下。称取粉碎后的芒果皮3份，50 g/份，分别加入水、95%乙醇和石油醚500 mL，加热回流提取2 h，重复提取3次，提取液趁热过滤，过滤液合并，减压浓缩为浸膏，冷冻干燥，分别得到水提取物（EW）9.5 g，95%乙醇提取物（EEt）7.3 g和石油醚提取物（EP）3.8 g。取上述芒果皮的水提取物、95%乙醇提取物和石油醚提取物适量，以二甲基亚砜（DMSO）为溶剂，配制不同浓度的待测溶液，备用。 　　2.2DPPH自由基清除能力测定［7］DPPH用70％的乙醇配制成5×10~5 mol/L的溶液。取上述5×10~5 mol/L的DPPH溶液3.0 mL，加入2.1中不同浓度的待测试样溶液1.0 mL，于25 ℃反应15 min，用紫外-可见分光光度计于517 nm处测定吸光度值As；取5×10~5 mol/L的DPPH 3.0 mL，加入DMSO 1.0 mL，同法测定吸光度值A0。用70％乙醇3.0 mL+DMSO 1.0mL作参比溶液。取3次测试平均值，按下式计算清除率： 　　S（%）=［（A0-As）/ A0］× 100 　　2.3超氧阴离子自由基清除能力测定采用光照核黄素方法［8］。用pH 7.4的PSB缓冲液为溶剂，配制1.67×10~5 mol#8226; L-1核黄素，0.01 mol#8226;L-1蛋氨酸，4.6×10~5 mol#8226;L-1氯化硝基四氮唑兰（NBT）。分别取上述3种溶液各2.0 mL，加入1.2.1中不同浓度的待测试样溶液1.0 mL，置光照箱中于4 500 lx下光照30 min，用紫外-可见分光光度计于560 nm处测定吸光度值As；同法，以1.0 mL DMSO代替样品溶液，测定吸光度值A0。用pH 7.4的PSB缓冲溶液6.0 mL +DMSO 1.0 mL作参比溶液。取3次测试平均值，按下式计算清除率： 　　S（%）=［（A0-As）/ A0］× 100