针灸对荷瘤小鼠瘤细胞和红细胞膜脂流动性影响.docVIP

针灸对荷瘤小鼠瘤细胞和红细胞膜脂流动性影响 　　［摘　要］　目的：探讨针灸抗肿瘤的机理。方法：针刺、艾灸荷瘤小鼠的“气海”“足三里”穴，检测处理后各组瘤细胞和红细胞膜脂流动性。结果：处理后各治疗组腹水瘤细胞膜脂流动性明显低于模型组(P 　　［主题词］　肿瘤细胞，培养的/针灸效应；膜流动性/针灸效应 　　Effects of Acupuncture and Moxibustion on Membrane Lipid Fluidity of Tumor Cells and Erythrocytes in the Tumor-Bearing Mice 　　Wang Xuexin?1, Wen Jingbo?2, Ye Xiangrong?3 (1.Chinese PLA 107 Central Hospital, Yantai 264002, China; 2. Zhaoyuan Municipal Hospital of TCM, Shandong Province; 3. Shandong University of TCM) 　　［Abstract］　Purpose　To approach to the mechanism of acupuncture and moxibustion for anti-tumor. Methods　Acupuncture and moxibustion was given at “ Qihai” (CV 6) and “Zusanli” (ST 36), and then membrane lipid fluidity of tumor cells and erythrocytes was detected. Results　After treatment, membrane lipid fluidity of ascites carcinoma cells in the treatment groups was significantly lower, and the membrane lipid fluidity of erythrocytes was higher than that in the model group (P-3mol/L的母液，避光冷藏，实验前用等渗PBS缓冲液稀释成2×10-6mol/L应用液)、PBS缓冲液。 　　 　　1.3　造模瘤株及模型建立 　　小白鼠H22肝癌腹水瘤细胞株由山东省医学科学院免疫室提供。从荷H?22肝癌腹水瘤种5～7天的小白鼠腹腔内抽取乳白色瘤性腹水，配成瘤活细胞悬液1×10?7个/ml，于小鼠左下腹腔注射0.2 ml，制成腹水瘤模型。 　　 　　1.4　分组及处理方法 　　荷瘤小鼠104只，随机分为模型对照组26只、针刺组22只、艾灸组24只、针灸组23只，并设正常对照组9只。 　　治疗组小鼠仿人类比取穴“气海”“足三里”。针刺组左手抓握小鼠，右手针刺，每穴行捻转补配合九六补手法(左捻九次为1度，捻转幅度180度)［1，2］1 min,留针3 min;艾灸组左手抓握小鼠，右手持线艾卷(直径 0.7 cm)温和灸，每穴灸3 min；针灸组针刺方法同针刺组，留针期间即灸，起针后续灸，灸疗方法、时间同艾灸组；正常组和模型对照组抓握5 min。以上方法均为每天1次，于接种后第2天开始，治疗9次，于次日检测。 　　 　　1.5　观察指标及检测方法 　　将小鼠快速断头，取瘤性腹水和部分样本的全血，抗凝，1500 r/min离心5 min，用生理盐水洗出红细胞和瘤细胞，以PBS 缓冲液配成4×107个红细胞/ml和6×106个瘤细胞/ml的混悬液各2份，分为加DPH标记液的标记管和加PBS缓冲液的空白管，25 ℃温育30 min，去上清液，用PBS缓冲液悬起，用荧光分光光度计以荧光偏振法测膜流动性，流动性以偏振度衡量［2，3］，激发光波长364 nm，发射光波长457 nm。 　　 　　2　实验结果 　　 　　2.1　腹水瘤细胞膜脂流动性 　　模型组膜脂流动性荧光偏振度明显低于各治疗组(P0.05)，见表1。 　　 　　2.2　红细胞膜脂流动性 　　模型组小鼠红细胞膜脂流动性荧光偏振度明显高于正常组、针刺组、针灸组、艾灸组，其差异均有非常显著性意义(P0.05)，见表2。 　　 　　3　讨论 　　 　　细胞膜脂质流动是细胞膜的主要动力学特性，细胞膜的一切正常功能都有赖于膜结构的完整性和膜脂的相对恒定流动，许多资料表明细胞膜的这一特性与细胞发育、分化、增殖、免疫反应和信息传递等基本功能密切相关。用荧光偏振技术测定细胞膜的流动性，就是把脂质体(生物膜或完整细胞膜)和一些荧光物质温育，这