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三肾丸薄层色谱法鉴别研究 　　[摘要]目的：探讨三肾丸中白术、肉桂、当归、川芎、牡丹皮、补骨脂、淫羊藿的鉴别方法。方法：采用薄层色谱法。结果：薄层色谱斑点清晰，相互间分离良好，空白试验表明阴性样品对药材的鉴别没有干扰。结论：该法简便快速，可用于本制剂的质量控制。 　　[关键词]三肾丸；白术；肉桂；当归；川芎；牡丹皮；补骨脂；淫羊藿；薄层色谱法 　　[中图分类号]R286.0[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2007）10（b）-092-03 　　 　　三肾丸由鹿肾、狗肾、驴肾、肉桂、淫羊霍、牡丹皮、山药、白术等多味中药组成，具有补肾益精，温壮元阳作用，用于肾精亏损、元阳不足所致的阳萎滑精、腰膝酸冷、气短神疲。为了有效控制三肾丸的质量，我们对处方中白术、肉桂、当归、川芎、牡丹皮、补骨脂、淫羊藿进行了薄层色谱法鉴别研究，本文所建方法简便、实用，获得满意的结果，可用于三肾丸的定性控制。 　　 　　1 材料与试剂 　　 　　对照品：桂皮醛、丹皮酚、补骨脂素、异补骨脂素、淫羊藿苷，对照药材：白术、当归、川芎，均由中国药品生物制品检定所提供；硅胶G由青岛海洋化工厂生产；三肾丸自制；所用试剂均为分析纯。 　　 　　2 实验部分 　　 　　2.1 白术的鉴别 　　2.1.1 供试品溶液的制备取本品适量，研细，取10 g置圆底烧瓶中，加水400 ml，照挥发油测定法测定。自测定器上部加水使溢入烧瓶中，再加乙酸乙酯2 ml，加热回流1 h，分取乙酸乙酯层，用少量乙酸乙酯分次冲洗刻度部分，冲洗液并入乙酸乙酯液中，低温挥散至1 ml，作为供试品溶液。 　　2.1.2 阴性对照溶液的制备按处方比例制成缺白术的阴性对照品，按2.1.1项制成阴性对照溶液。 　　2.1.3 对照药材溶液的制备取白术对照药材1 g，按2.1.1项制成对照药材溶液。 　　2.1.4 展开剂石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯(50∶1)。 　　2.1.5 薄层层析吸取供试品溶液、阴性对照溶液各10 μl，对照药材溶液5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照液无干扰。见图1。 　　 　　2.2 肉桂的鉴别 　　2.2.1 供试品溶液的制备取2.1.1项下的溶液作为供试品溶液。 　　2.2.2 阴性对照溶液的制备按处方比例制成缺肉桂的阴性对照品，按2.1.1项制成阴性对照溶液。 　　2.2.3 对照品溶液的制备取桂皮醛对照品加乙酸乙酯制成每1 ml含1 μl的对照品溶液。 　　2.2.4 展开剂苯-乙酸乙酯-冰醋酸（92∶5∶5）。 　　2.2.5 薄层层析吸取供试品溶液、阴性对照溶液各10 μl，对照品溶液5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照溶液无此斑点。见图2。 　　 　　2.3 当归、川芎的鉴别 　　2.3.1 供试品溶液的制备取2.1.1项下的溶液作为供试品溶液。 　　2.3.2 阴性对照溶液的制备按处方比例制成缺当归、川芎的阴性对照品，按2.1.1项制成阴性对照溶液。 　　2.3.3 对照药材溶液的制备取当归、川芎对照药材各1 g，按2.1.1项分别制成对照药材溶液。 　　2.3.4 展开剂石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯（17∶3）。 　　2.3.5 薄层层析吸取供试品溶液、阴性对照溶液各10 μl，对照药材溶液各5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的亮蓝色荧光斑点，阴性对照溶液无此斑点。见图3。 　　2.4 牡丹皮的鉴别 　　2.4.1 供试品溶液的制备取2.1.1项下的溶液作为供试品溶液。 　　 　　2.4.2 阴性对照溶液的制备按处方比例制成缺牡丹皮的阴性对照品，按2.1.1项制成阴性对照溶液。 　　2.4.3 对照品溶液的制备取丹皮酚对照品加乙酸乙酯制成每1 ml含2 mg的对照品溶液。 　　2.4.4 展开剂环己烷-乙酸乙酯（3∶1）。 　　2.4.5 薄层层析吸取供试品溶液、阴性对照溶液各10 μl，对照药材溶液5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5%三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照溶液无此斑点。见图4。 　　2.5 补骨脂的鉴别 　　2.5.1 供试品溶液的制备取本品适量，研细，取20 g，加甲醇100 ml，超声处理30