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临床分离肺炎克雷伯菌耐药性研究 　　【中图分类号】R563.1 【文献标识码】A 【文章编号】1672－3783(2012)03－0018－01 　　【摘要】目的 了解云南省第一人民医院肺炎克雷伯菌（klebsiella pneumoniae KPN）临床分离株产酶及其耐药情况，指导临床正确、合理使用抗菌药物。方法 收集2011年5月云南省第一人民医院肺炎克雷伯菌共25株, 细菌鉴定及药敏试验采用纸片扩散法（K-B法）及VITEK II compact细菌鉴定/药敏分析系统鉴定，并采用美国临床和实验室标准化学会（Clinical and Laboratory Standards Institute ,CLSI）推荐的ESBL确诊试验，以及Hodge表型试验，判断菌株的产酶情况，获得我院临床标本肺炎克雷伯菌目前的耐药性情况。统计分析产酶株与非产酶株的耐药性是否存在差异，为临床提供合理治疗方案。结果 25株肺炎克雷伯菌中，21 株(84 .00%)产ESBLs ，4株（16.00%）为非产ESBLs 菌;比较产ESBLs 菌与非产ESBLs 菌对16 种抗生素的耐药率,经统计学处理, 产ESBLs 菌对7 种抗生素的耐药率均显著高于非产ESBLs 菌,差异有统计学意义( P 5mm,为产ESBLs的菌株，并以大肠埃希菌ATCC2922为质控菌株。 　　 1.2.4 Hodge试验 　　 将标准菌株ATCC25922配成0.5麦氏单位，均匀涂布在M-H平板上，平板正中贴亚胺培南（贴亚胺培南是改良Hodge试验，贴厄他培南是Hodge试验），将试验菌株以纸片中心为起点，沿着离心方向划线，ATCC 25922作为阴性对照，35摄氏度培养过夜。抑菌圈内出现向内生长矢状为阳性。 　　1．2.5 药物敏感性试验 　　 采用法国梅里埃公司的ATB鉴定系统进行鉴定及药敏检测。判定标准依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)2002年版的规定??［27］?。 　　1.2.6 统计学处理 　　 25株肺炎克雷伯菌耐药性分析采用世界卫生组织细菌耐药性监测中心推荐的Whonet5.4软件进行分析,用SPSS13.0 统计软件进行χ2 检验。判定标准依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)2002年版的规定??［27］?。 　　2 结果 　　2.1 分离肺炎克雷伯菌的临床标本 　　 25株肺炎克雷伯菌按分离菌株量的多少对临床标本排序:痰液尿液血液、脓液、生殖道分泌物,其中痰液分离菌株最多,占72% (表1) 。? 　　 　　2.2 25株肺炎克雷伯菌对16种常用抗生素的耐药性见表2。? 　　2.3 ESBLs 检出情况 　　 25株肺炎克雷伯菌检出产ESBLs菌21株,占84.00%;非产ESBLs 菌4 株,占16 .00%。21株产ESBLS肺炎克雷伯菌除对厄他培南、亚胺培南、美洛培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦耐药率较低分别为9.52%、9.52%、4.78%、19.05%、28.57% ,其余呈不同程度耐药。氨苄西林、头孢唑林、头孢吡肟、头孢噻肟、氨曲南、氨苄西林/舒巴坦均为80%以上。详见表3。? 　　2.4 产ESBLs菌与非产菌对16 种抗生素的耐药率比较 　　 以a=0.05的检验水准，对产ESBLs和非产ESBLs的肺炎克雷伯菌对16种常用抗生素的耐药率进行X2检验，见表2 。从表中可以看出，产ESBLs和非产ESBLs的肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类抗生素头孢唑林、头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南和喹诺酮类抗生素左氧氟沙星的耐药率有显著差异，产ESBLs的肺炎克雷伯菌对以上7种抗生素的耐药率比非产ESBLs的肺炎克雷伯菌的耐药率高。而β-内酰胺类抗生素氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、厄他培南、亚胺培南、美洛培南、氨基糖苷类抗生素妥布霉素和阿米卡星、磺胺类抗生素复方新诺明的耐药率，产ESBLs和非产ESBLs的肺炎克雷伯菌无显著差异。 　　2.5 Hodge实验情况 　　 25株肺炎克雷伯菌中，Hodge实验阳性菌株1株，占4.00%，Hodge实验阴性菌株24株，占96.00%。 　　2.6 Hodge实验阳性菌株与Hodge实验阴性菌株对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率比较，见表4.? 　　3 讨论 　　 ESBLS是由质粒介导的能使细菌对头孢菌素类、青霉素类及单酰胺类抗生素耐药的一类酶。ESBLs 多由医院获得性感染菌株产生, 25株肺炎克雷伯菌按分离菌株量的多少对临床标本排序:痰液尿液血液、脓液、生殖道分泌物,其中痰液分离菌株最多,占总分离数的72% 。kpn可以定植在上呼吸道，免疫力降低时，引起感染，肺炎克雷伯菌ESBLs