二苯乙烯苷对氧化损伤人脐静脉内皮细胞nfκbiκb表达的影响-effects of stilbene glycoside on nf κ bi κ b expression in human umbilical vein endothelial cells after oxidative damage.docxVIP

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2018-05-29 发布于上海
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二苯乙烯苷对氧化损伤人脐静脉内皮细胞nfκbiκb表达的影响-effects of stilbene glycoside on nf κ bi κ b expression in human umbilical vein endothelial cells after oxidative damage

本研究受到下列科研项目资助国家自然科学基金资助项目湖南省教育厅（08B065，09C832）湖南省卫生厅中医药局（6103-22）湖南省科技厅（湘科条字[2009]130）目录英文缩写词索引1中文摘要2前言41实验材料61.1材料61.2主要试剂61.3仪器设备72实验方法85结论32参考文献33综述37在读期间科研成果简介46致谢47英文缩写词索引缩略语英文全称中文译名Asatherosclerosis动脉粥样硬化bpbasepair碱基对cDNAcomplementaryDNA互补脱氧核糖核酸ELISAenzyme-linkedimmunosorbentassay酶联免疫吸附试验HUVEChumanumbilicalveinendothelialcell人脐静脉内皮细胞IL-6interleukin-6白(细胞)介素-6IκBInhibitor-kappaBkappaB抑制蛋白MTT3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide噻唑蓝NF-κBNucleartranscriptionfactor-kappaB核转录因子kappaBPBSphosphatebuffersolution磷酸盐缓冲液RNAribonucleicacid核糖核酸ROSreactiveoxygenspecies活性氧簇rpmrotationperminute每分钟转速RT-PCRreversetranscriptionPCR逆转录聚合酶链反应TNF-αtumornecrosisfactor-α肿瘤坏死因子-αTSG2,3,5,4′-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside二苯乙烯苷二苯乙烯苷对氧化损伤人脐静脉内皮细胞NF-κB/IκB表达的影响硕士生：崔慧辉导师：田英教授中文摘要目的：研究二苯乙烯苷对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用，探讨TSG保护内皮细胞的作用机制。方法：对体外培养人脐静脉内皮细胞给予不同浓度H2O2刺激，MTT法筛选造成HUVEC氧化损伤的H2O2浓度，检测TSG对氧化损伤的HUVEC细胞活性的影响。用不同浓度的TSG预处理HUVEC4h后，加200μmol/LH2O2作用24h，运用RT-PCR检测NF-κB、IκB、TNF-α、IL-6mRNA表达，免疫印迹检测NF-κB、IκB蛋白表达，酶联免疫吸附试验检测上清中TNF-α、IL-6蛋白表达。结果：MTT法筛选200μmol/L为H2O2损伤作用浓度，细胞增殖率结果显示，与H2O2（200μmol/L）损伤组比较，0.1、1、10μmol/LTSG加H2O2处理组细胞的增殖率都显著增加（P＜0.01）。对炎症应答相关基因的初步研究显示，与H2O2损伤组比较，0.1、1、10μmol/LTSG加H2O2处理组NF-κBmRNA表达水平显著降低（P＜0.01），1μmol/LTSG加H2O2处理组蛋白表达有统计学意义；TNF-αmRNA及蛋白水平有不同程度降低，其中1μmol/LTSG加H2O2处理组mRNA表达显著降低（P＜0.01）；各组IκB、IL-6mRNA及蛋白表达差异无显著性。结论：TSG可能通过抑制NF-κB的活化而降低炎性因子的表达，保护HUVEC。关键词：人脐静脉内皮细胞；二苯乙烯苷；氧化损伤；NF-κB；IκB；TNF-α；IL-6Effectof2,3,5,4′-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucosideontheexpressionofNF-κB/IκBofHUVECinjuredbyH2O2ABSTRACTAim:Inthisreport,weobservedthecytoprotectioneffectandmolecularmechanismof2,3,5,4′-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucosideonisolatedhumanumbilicalveinendothelialcellinjuredbyH2O2.Methods:Inthestudies,humanumbilicalveinendothelialcellsweretreatedwithH2O2andTSGinvitro.CellgrowthandcellviabilityweredeterminedbyMTTassay.TheHUVECwastreatedwith200μmol/LH2O2for24hafterpretreatedwithdifferentconcentrationsofTSGfor4h.Whereafter,themRNAlevelsofNF-κB,IκB,TN