干细胞因子受体在骨质疏松症小鼠骨组织中表达的分析-expression of stem cell factor receptor in bone tissue of osteoporosis mice.docxVIP

干细胞因子受体在骨质疏松症小鼠骨组织中表达的研究中文摘要目的：通过检测干细胞因子受体（c-Kit）在骨质疏松症小鼠骨组织中的表达，初步探寻 c-Kit在骨质疏松症发病中的作用，为进一步探寻骨质疏松症的防治方法提供实验依 据。方法：1.实验动物及分组：选取 30 只 3 月龄雄性 SPF 级 C57BL/6J 小鼠，体重 30±5g。 随机分为 3 组：A 组：正常组（10 只），给予生理盐水 90ml/kg 灌胃，每日 1 次，连 续 14 日；B 组：骨质疏松组（10 只），给予维甲酸 90mg/kg 灌胃，每日 1 次，连续 14 日；C 组：骨质疏松基础治疗干预组（10 只），给予维甲酸 90mg/kg、葡萄糖酸 钙 1g/kg 灌胃，维生素 D3 注射液 0.025ug/Kg 皮下注射，每日 1 次，连续 14 日。造 模结束后取材。2.研究方法：通过 Micro-CT 扫描检测骨体积分数、骨小梁数目、骨小梁厚度、骨 小梁分离度等骨质量和骨形态相关参数。通过组织病理学切片观察骨形态学变化。采 用免疫组织化学技术，利用激光扫描共聚焦显微镜观察 c-Kit 受体在小鼠骨组织中的 表达。实验数据的统计分析采用 SPSS19.0 统计软件进行，计数资料描述使用均数± 标准差（ x ??s ）表示，组间比较采用卡方检验或单因素方差的方法进行分析，P＜0.05 表示差异具有统计学意义。结果：1. MicroCT 扫描小鼠股骨结果显示：C 组骨体积分数（BV/TV）、骨小梁数目（TB.N）低于 A 组，高于 B 组，差异 均具有统计学意义（P＜0.05）。C 组骨小梁厚度（TB.Th）明显低于 A 组，高于 B 组，差异均无统计学意义（P＞0.05）。骨小梁分离度（TB.SP）B 组较 A 组明显增加， 且高于 C 组，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。2. 组织病理切片 HE 染色结果：A 组小鼠股骨上端骨密质较厚且均匀，骨小梁均匀，骨结构紧密，连续性较好。 B 组小鼠骨密质变薄，骨细胞变少且排列紊乱，骨小梁变薄、稀疏、纤细、断裂，骨 髓腔扩大。骨质疏松基础药物治疗后 C 组小鼠股骨骨密质较 B 组明显增厚，骨小梁 连续、变粗、变密。3. 组织病理切片 Masson 染色结果显示：B 组与 A 组相比较，软骨及骨质胶原着色状况无明显改变，可见骨小梁连接性 差、分离度大。C 组的新生骨基质较 B 组明显增多，骨形成活跃，软骨及胶原纤维呈 蓝色，骨质呈蓝色间杂以红色条块，新生骨质内红染少，成熟骨内红染较多。4. c-Kit 在小鼠骨组织中的表达： 免疫组化结果采用半定量积分法判定，阳性细胞比例×阳性细胞染色评分=免疫组化评分，阳性表达得分≥2，阴性表达得分2。A 组骨细胞可见多处密布存在的 c-Kit 表达阳性细胞，颜色呈棕黄色至棕褐色。B 组骨细胞可见极少量的浅黄色的 c-Kit 表 达阳性细胞，而 C 组可见散在分布的 c-Kit 表达阳性细胞，颜色多为棕黄色颗粒。B 组 c-Kit 在骨细胞中的表达与 A 组相比较明显降低（P＜0.05）、与 C 组相比较明显 降低（P＜0.05），C 组 c-Kit 在骨细胞中的表达与 A 组相比较明显降低（P＜0.05）。结论：1. c-Kit 在正常小鼠骨组织中有表达，骨质疏松症小鼠骨组织 C-kit 表达减低，应 用骨质疏松基础治疗后表达可上调。2.c-Kit 可能在骨质疏松症的发病中起重要的调节作用，进一步对骨质疏松症病因 学研究提供依据，为临床治疗骨质疏松症提供思路。关键词：干细胞生长因子受体；骨质疏松症；骨组织；HE 染色；Masson 染色；Micro-CTExpression of Stem cell growth factor receptor in bone tissue of the osteoporosis mice AbstractObjective:To investigate the expression of stem cell growth factor receptor(c-Kit) in the bone tissue of osteoporosis mice, detect the role of the c-Kit in the pathogenesis of osteoporosis, making further efforts to provide experiment basis of prophylaxis and treatment for osteoporosis.Methods:1.30 male C57BL/6J mice were randomly divided into group three groups: group