外源雌激素处理对唐鱼卵黄蛋白原和雌激素受体基因表达....pptVIP

外源雌激素处理对唐鱼卵黄蛋白原和雌激素受体基因表达的影响 张为民 中山大学生命科学学院 唐鱼(Tanichthys albonubes) 唐鱼 唐鱼为鲤科(Cyprinidae)鱼丹亚科(Danioninae)唐鱼属(Tanichthys Lin, 1932) 仅分布于我国广州白云山一带山区小溪流中，濒危物种，属国家II级保护动物 研究表明唐鱼对重金属Cu 2 + 等敏感,是一种较理想的环境重金属污染指示生物 Question 唐鱼对环境雌激素污染是否也敏感？ 卵黄蛋白原 卵黄蛋白原(VTG)是卵生动物中卵黄蛋白(yolk protein)的前体 ，由1100多个氨基酸组成 VTG经蛋白酶水解产生：卵黄脂磷蛋白I (lipovitellin I),卵黄高磷蛋白(phosvitin),和卵黄脂磷蛋白II ( lipovitellin II) 在鱼类、两栖类和鸟类中, VTG是在E2刺激下由雌性动物肝脏中合成的 雄鱼肝脏在E2刺激下也能合成VTG 雌激素受体 广义的雌激素受体（estrogen receptor，ER）包括雌激素膜受体、胞质受体和核受体 雌激素核受体介导雌激素的基因组效应 E2刺激VTG生物合成是由雌激素核受体介导的 环境雌激素也可作用在雌激素核受体上影响动物内分泌平衡 目的意义 克隆唐鱼VTG和雌激素受体基因 分析E2对雄性唐鱼这些基因表达的影响 方法 基因克隆采用3’ 和5’RACE方法 基因表达分析采用半定量RT-PCR方法 VTG phylogenetic tree ER α phylogenetic tree ER β phylogenetic tree VTG mRNA tissue distribution ER mRNA tissue distribution VTG mRNA induction in male liver by E2 ERαmRNA induction in male liver by E2 ERβmRNA induction in male liver by E2 小结 除肝脏外，唐鱼卵巢组织也表达高水平的VTG E2能明显诱导雄性肝脏VTG基因表达 唐鱼不同ER受体具有不同的组织分布，表明E2不同功能可能由不同受体来介导的 雄性唐鱼肝脏不同ER受体对E2刺激反应存在差异 愿望 以唐鱼为模型，研究鱼类性别决定、性腺分化发育机制，以及环境内分泌干扰物的生殖毒理学效应。 致谢 1、本项目得到广东省自然科学基金和中山大学食品安全研究平台资助 。 2、感谢: 马广智 王瑞龙 何建国 高芸 方展强 管欣 张利红 * * 雄鱼 雌鱼 VTG: Nucleotide and deduced amino acid sequences 1 ACAAACCATCAGCAATGAGAGCTGTTGTGCTTGCCCCGACTGTAGCCCTTGTGGCGAGTC 1 M R A V V L A P T V A L V A S Q 61 AACAGATCAGCCTTGTTCCCGAGTTTGCCTCTGATAAGACCTATGTGTACAAGTATGAGG 17 Q I S L V P E F A S D K T Y V Y K Y E A 121 CTCTGCACTTGGGAGGACTTCCTCAAGAAGGTCTGGCTAGAGTCGGAGCAAAAGTCAACG 37 L H L G G L P Q E G L A R V G A K V N G 181 GCAAGGTTTACATCCGTGCCGAGACAGAGAGCACCTTTCTGATGAAGTTCTCAGATGTTC 57 K V Y I R A E T E S T F L M K F S D V Q 241 AACTCCATGAGTATACTGGCATTTGGCCCAGGGATCCTTTCGTTCCTGAAACTAAGCTCA 77 L H E Y