血管生成素-1在56肾切除大鼠微血管病变中的表达变化及羟苯磺酸钙的干预作用-expression changes of angiopoietin - 1 in microvascular lesions of 56 nephrectomized rats and intervention effect of calcium dobesilate.docxVIP

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2018-06-03 发布于上海
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血管生成素-1在56肾切除大鼠微血管病变中的表达变化及羟苯磺酸钙的干预作用-expression changes of angiopoietin - 1 in microvascular lesions of 56 nephrectomized rats and intervention effect of calcium dobesilate.docx

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血管生成素-1在56肾切除大鼠微血管病变中的表达变化及羟苯磺酸钙的干预作用-expression changes of angiopoietin - 1 in microvascular lesions of 56 nephrectomized rats and intervention effect of calcium dobesilate

血管生成素-1在5/6肾切除大鼠微血管病变中的表达变化及羟苯磺酸钙的干预作用华中科技大学同济医学院附属协和医院肾病科硕士研究生：刘兰香指导老师：杨晓中文摘要目的：探讨促血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)在5/6肾切除大鼠肾脏微血管病变中的表达变化与意义及羟苯磺酸钙的干预作用。方法：将105只220～250g雄性SD大鼠(由华中科技大学同济医学院动物实验中心提供)分笼适应性饲养一周后，随机分为假手术组(CTL组)、5/6肾切除模型组(STN组)和5/6肾切除+羟苯磺酸钙干预组各35只。采用二步手术法制备5/6肾切除模型，干预组大鼠于二次手术后第一天起给予多贝斯(即羟苯磺酸钙)120mg/kg/d加入饮用水中灌胃，假手术组及模型组以饮用水灌胃(用量与羟苯磺酸钙组同体重大鼠相同)。以二次手术完成后第1、2、4、8、12周为实验的不同观察时间点。在各不同时间点测定血生化、24小时尿蛋白定量并行Masson染色观察肾脏病理改变。免疫组化观察Ang-1和CD31的表达变化，RT-PCR(逆转录-聚合酶联反应)方法检测不同时间点各组大鼠肾脏组织Ang-1mRNA的表达水平。结果：5/6肾切除模型组大鼠术后1周开始，24小时尿蛋白定量和反映肾病进展的血生化指标进行性加重。常规Masson染色显示从术后1周开始随着实验时间的延长模型组肾脏病理改变逐渐加重。肾小球和小管周围毛细血管计数逐渐减少。干预组大鼠各时点尿蛋白、血生化指标及肾脏病理均比模型组明显改善，微血管病变较模型组减轻。免疫组化显示肾小球Ang-1阳性着染显著高于假手术组,峰值在2～4周,8周后表达逐渐下调.与假手术组比较，模型组2～8周时肾脏Ang-1mRNA表达显著上调，第12周时低于假手术组（P0.05）。自第2周开始干预组Ang-1mRNA及蛋白表达水平均升高，其后期的下调趋势变缓，CD31的表达增强（P0.05），肾脏微血管病变显著改善。结论：5/6肾切除大鼠肾脏Ang-1和CD31表达的改变参与了残肾微血管结构的变化。羟苯磺酸钙可能通过增强内源性Ang-1的上调并延缓其后期的下调改善5/6肾切除大鼠肾脏的微血管病变，发挥肾脏保护作用。关键词：5/6肾切除;促血管生成素-1;羟苯磺酸钙;微血管病变TheExpressionandSignificanceofAngiopoietin-1andtheEffectofCalciumDobesilateintheKidneyofRatswith5/6NephrectomyDepartmentofNephrology,UnionHospital,TongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnologyPostgraduate:LiuLanxiangTutor:Prof.YangXiaoAbstractObjective：Toinvestigatetheexpressionandsignificanceofangiopoietin-1(Ang-1)intheKidneyofratswith5/6subtotalnephrectomy,andthenunderstandthemechanismoftheeffectofcalciumdobesilate.Methods：RemnantkidneyswereestablishedinadultmaleSDratsby5/6nephrectomy.TheratswererandomlyallocatedintoCTLgroup(n=35)、STNgroup(n=35)andcalciumdobesilateinterventiongroup(n=35).Therenalfunctionandhistopathologicalchangeswereevaluatedat1,2,4,8and12weeksafteroperationfinished.UsetheimmunohistochemistrytodeterminetheintensityofAng-1andCD31stainingandexaminethecorrespondingAng-1-mRNAbyRT-PCR.Results：Theresultsshowedthecharacteristicofrenalpathologydynamicchangein5/6nephrectomyremnantkidney:tubule-interstitialinflammationandfibrosis,aswellasglomerulosclerosis.Ang-1mRNAandproteinweresignificantlyup-regulatedinS