一氧化氮对采后病原真菌botrytis cinerea的生长发育影响及机制研究-effects of nitric oxide on growth and development of postharvest pathogenic fungus bottis cinerea and its mechanism.docxVIP

ADissertationfortheDegreeofMasterEffectsofnitricoxideonthegrowth,developmentandpathogenicityofpostharvestpathogenBotrytiscinereaByWangQianSupervisedbyAssociateProf.LiMiaoAnhuiAgriculturalUniversityHefei230036,P.R.ChinaJune,2013独创性声明本人声明所呈的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:马传签字日期:材;年L月7日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文件，允许论文被查阅和借阅。本人授权安徽农业大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，收录到《中国学位论文全文数据库))，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，向社会公众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)。学位论文作者签名:斗11签字日期:切向年b月1日指导教师签名:支存签字日期:dOI年6月f日学位论文作者毕业后去向:工作单位:电话:通信地址:邮编:摘要灰霉菌（Botrytiscinerea）作为主要的采后致病菌之一，能引起多种果蔬腐烂病害，从而造成严重的经济损失。一氧化氮（nitricoxide,NO）是生物体内一种多功能信号分子，具有独特的理化性质和生物学活性，近年来成为生命科学领域研究的热点，NO对细胞同时具有毒性和保护作用，这两种功能主要依赖于其浓度大小的变化，即高浓度的NO对细胞正常生长活动具有抑制作用，使得细胞加速衰老死亡。已有研究显示，外源NO对一些植物病原菌的生长具有一定抑制作用。为探讨NO的抑菌机理及其在果蔬采后病害防治中的应用，本文以硝普钠（sodiumnitroprusside,SNP）为NO供体，系统研究了不同浓度NO处理对采后灰霉菌生长发育和致病性的影响，并从细胞生理学、生物化学与分子生物学水平探讨了NO抑制灰霉菌生长发育和降低致病性的可能机制，所获主要结果具体报道如下：1.通过NO的抑菌试验结果表明，浓度为4mmol/L的NO供体SNP对灰霉菌生长具有明显的抑制作用，其抑制效果与处理浓度、处理时间呈现正相关性。2.通过PropidiumIodide对孢子细胞染色分析，证实了3mmol/L的NO供体SNP处理破坏孢子细胞质膜，引起胞外可溶性糖、可溶性蛋白和丙二醛含量增加，导致B.cinerea孢子细胞质膜受到损伤，从而抑制了B.cinerea的生长。3.通过荧光探针二氯荧光素（DCHF-DA）检测胞内活性氧发现，NO处理后的B.cinerea孢子胞内活性氧水平上升；此外，通过细胞内抗氧化酶类活性和抗氧化物质含量的测定，发现孢子细胞内抗氧化系统被破坏，B.cinerea细胞的抗氧化能力和细胞功能被削弱，从而抑制了B.cinerea的孢子的萌发。4.用NO处理采后番茄果实，发现NO能有效延缓果实成熟衰老，推迟呼吸跃变时间，降低呼吸跃变的强度，另外，NO处理还能维持番茄果实内较高的抗氧化酶活性，增强了果实的抗病性，有利于保持番茄果实品质。关键词：一氧化氮Botrytiscinerea活性氧氧化损伤AbstractBotrytiscinereaisoneofthemajorpostharvestpathogensinplants,itcancausegreatheavyeconomiclosses.Nitricoxide(NO)isakindofuniqueandsignalingmolecule,playinganimportantroleincells.Ithasbothtoxicityandprotectivefunctions,dependentingonthechangesofconcentration,whichmeanshigherconcentrationsinhibitcellgrowthandacceleratecellapoptosis.NowadayssomestudieshaveshowedthatexogenousNOcaninhibitthegrowthofpathogens.Inthisstudy,weinvestigatedthedifferentconcentrationsofNOi