CD44v3基因蛋白在鼻咽癌中表达以及与肿瘤转移关系.docVIP

CD44v3基因蛋白在鼻咽癌中表达以及与肿瘤转移关系 　　 【摘要】 目的研究粘附分子CD44变异型-3（CD44v3）在鼻咽癌中的表达和肿瘤浸润、转移的关系。 方法采用免疫组化两步法检测鼻咽癌组中CD44v3蛋白在鼻咽癌和正常组中的表达差异，以及和鼻咽癌临床特征的关系。 结果鼻咽癌组中CD44v3蛋白阳性表达率高于对照组（ P 　　【关键词】黏附分子CD44变异型-3；鼻咽癌；肿瘤侵袭和转移 　　 　　The relationship of CD44v3 in nasopharyneal carcinoma and in cancer metastasis. 　　 　　XU Wei-hua,FU Ya-feng,CUI De-wei，et al.Department of ear-nose-throat(ENT)surgery,the Affiliated hospital of Guang dong Medicine College,Zhan jiang 524000,China 　　 　　 【Abstract】 ObjectiveTo investigate the high expression of Cellular adhesion molecule CD44 variant isoforms3 (CD44v3）innasopharyngeal carcinomaandwhether theyhave relation with the cancer invasion and metastasis. MethodsControl trial was adopted in the experiment design.Immunochemistry (two steps) was used to detect the expression of CD44v3 in nasopharyngeal carcinoma and normal nasopharyn membrane. ResultsThepositiveexpression rate of CD44v3 protein in nasopharyngeal carcinoma was85．71%,which was obviously higher than that of normal nasopharyn membrane (4．65%),the difference between thetwo group havestatistical significance ( P [1]。CD44v3在鼻咽癌中的研究国内外尚未见报道。本研究采用免疫组化法探索该因子在鼻咽癌中的情况。 　　 　　1 材料与方法 　　 　　1．1 病例标本 本研究112例标本均来自广东医学院2006年1月至2007年1月门诊就诊患者，男62例，女50例，最小年龄18岁，最大年龄88岁。取正常鼻咽黏膜组织90例作为对照组。鼻咽癌的临床分期标准为1992年福州鼻咽癌会议达成的标准 [2]。 　　1．2 试剂 鼠抗人CD44v3单克隆抗体，DAB显色试剂盒PV-6002小鼠两步法试剂盒均购于北京中杉金桥生物技术有限公司。 　　1．3 方法 标本以10%福尔马林固定，石蜡包埋，切片5 μm厚。采用免疫组化两步法，按照试剂盒说明书的步骤进行操作，切片经过柠檬酸缓冲液（pH=6．0）高压热修复抗原处理。PBS 替代一抗作为阴性对照，已知CD44v3 阳性的乳腺鳞癌组织作为阳性对照。 　　1．4 结果判定 CD44v3阳性判定 细胞膜出现棕褐色颗粒为阳性。每张切片在400倍光镜下??察10个镜野，每个视野计数100个肿瘤细胞，共计1 000个细胞，且每张切片阳性细胞百分数10%为阳性，≤１０%为阴性．以文献[3]标准评定强度。 　　1．5 统计学方法 计数资料组间差异比较采用四格表 χ2检验、行乘列表Spearman 相关性分析。统计分析采用SAS8．0软件。 　　 　　2 结果 　　 　　2．1 CD44v3阳性率在鼻咽癌组中为85．71%（96/112）；正常人鼻咽黏膜组中阳性率为4．65%（4/90）。CD44v3在鼻咽癌组高于正常人鼻咽黏膜组（ P [4]。 由于V区外显子在m RNA 水平的选择性拼接，产生多种CD44变异体。主要包括CD44v3、CD44v5、CD44v6、CD44v9等[5]。黏附分子CD44v3，是细胞粘附分子CD44变异型中的一个，介导细胞和细胞外基质之间的相互作用，在肿瘤的发展、转移中有密不可分的作用。研究发现CD44v3与细胞外基质中透明质酸的酶解产物结合来参与肿瘤细胞的增殖、分化、粘附、迁移及肿瘤血管形成等重要过程，在