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* * 第二节 PH 的检测与控制 实际发酵生产和研究中主要检测的变量 (1)PH (2)DO (3)温度 (4)转速 (5)残糖 (6)其他 (1)流量 (2)温度 (1)流量 (2)温度 进罐 罐中 出罐 实际发酵生产和研究中主要的检查项目 (1)微生物形态的检查(2)无菌检查(3)泡沫检查 一、PH 检测控制的必要性 1、PH 与微生物 2、PH 对发酵的影响的机制 1、影响一些信号分子的透膜能力,间接影响微生物 2、影响营养物或有害物质的存在状态,间接影响微生物 通过环境间接影响微生物 1、直接影响胞外分泌酶的活性 2、直接影响细胞膜上透性酶的活性,影响微生物对营养的吸收 3、影响膜电荷 直接影响微生物本身 2.1、对微生物的影响 2.2、对产物的影响 主要有两个方面的影响: 一是影响产物的稳定性, 二是影响产物的溶解度、旋光性、构象等物理化学性质。 3、PH 对发酵的影响的特点 特点:一是影响力很大,二是影响途径多样。 更重要的是,PH 在发酵过程中是在不断变化的。 因此随时随地对发酵液的PH 进行全程的检测和控制就显的非常重要了。 二、PH 的检测方法 (一)PH 电极的构造和测量原理 PH 检测在发酵的生产和科研上主要有两种方法, 一是使用PH 试纸, 二是使用PH 电极。 其中使用PH 电极是生产上广泛采用的方法。 1、PH 电极的构造 2、PH 电极的测量原理——各电势分析 2.1、参比电极电势 甘汞电极(a)232型(b)217型 1-导线;2-加液口;3-KCl溶液;4-素烧瓷芯;5-铂丝;6-Hg;7-Hg2Cl2 由此可见,甘汞电极是由金属汞及其难溶盐——氯化亚汞以及含氯离子的电解质溶液组成。这种半电池可表示为Hg(L) Hg2Cl2(S) Cl-(L) 电极电位产生于汞和甘汞的界面,其电极反应为: Hg2Cl2+2e- 2Cl-+2Hg由能斯特方程式,其电极电位为: 由此可见甘汞电极的电极电位只与氯化钾的浓度有关而不受被测溶液的酸碱度影响 其中敏感性膜部分随组成材料的不同而各有特色。测定pH值的玻璃电极的敏感膜是厚度为10-1~10-3mm的玻璃薄膜,其电阻为50~500兆Ω。 2.2、测量电极电势 (1)内参比电极电势 只与内参比溶液参与电极反应的离子浓度有关,是常数。 (2)跨膜浓差电势 H+ H+ H+ H+ H+ H+ HCl溶液 待测溶液 玻璃敏感膜 其电势与膜两侧离子浓度有关,可由电化学势平衡推倒出来: 水合硅胶层的形成: SiO-Na++H+ SiO-H++Na+ 使膜表面形成以 SiO-H+为主要成分的水合硅胶层,厚度约为10-4~10-5mm 试 液 水合硅胶层 干 玻 璃 层 水合硅胶层 内参比溶液 α1 α1’ α2 ’ α2 ε1—--ε--—ε2 经水浸泡后的玻璃膜截面成为三层结构,如图。 外侧: ε1= 内侧:ε2= ε膜=ε2+ε1= 由于a’1≈a’2,所以: 但实际上玻璃膜内外侧表面性状总有微小差别,即使α1=α2时,ε膜≠0,这差别所产生的电位叫不对称电位(ε不对称),这样整个玻璃电极(指示电极)的电位应是内参比电位、膜电位与不对称电位之和。 所以测量电极的电势为: 3、液体接界电势 由于不同离子迁移速率不同造成的电势。 所以PH电极的总的电势为: 其中常数5由参比电极电势、液体接界电势、内参比电极电势、玻璃膜不对称电势以及内参比溶液氢离子浓度共同决定,是PH 电极的一个固有参数。温度对其有一定影响。 (二) PH电极的使用 温度对PH 测量的影响 PH 测量的标定 PH 测量的误差 PH 计的信号转换部分 PH 测量在实际中遇到的问题及解决的办法 专题讲解
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