第四章 1细胞质膜PPT.pptVIP

第四章 细胞质膜;第一节、细胞质膜的结构模型;;?膜蛋白的流动方式-侧向扩散和旋转运动 如下面的实验 光脱色恢复技术 荧光抗体免疫标记实验 成斑现象(patching)或成帽现象(capping) ?膜蛋白的流动性受多种因素影响 (1)细胞骨架不但影响膜蛋白的运动，也影响其周围的膜脂的流动。膜蛋白与膜脂分子的相互作用也是影响膜流动性的重要因素。 (2)细胞之间的连接作用。 (3)膜整合蛋白与胞外配体，抗体及药物等的作用 ◇膜流动的生物学意义 ;?膜流动的生物学意义 ◇膜上的酶活性与膜的流动性有关 在一定范围内膜的流动性大有利于膜中酶分子侧向 扩散和旋转运动，使酶活性增加。 ◇膜的流动性与物质运输有关 ◇细胞的信息传递，激素药物的作用等与膜的流动性 有关 ◇在发育中与膜的流动性有关 ◇在细胞周期与膜的流动性有关 在细胞分裂期细胞膜的流动性最高，在G1 和S期膜的流动性最低。;二、膜脂——生物膜的基本组成成分;;;运动方式;脂质体（liposome）P88;脂质体的类型;脂质体的应用;三、膜蛋白; ◆内在（整合）膜蛋白  ?水不溶性蛋白，形成跨膜螺旋，与膜 结合紧密，需用去垢剂使膜崩解后才可分离。 ◆外在(外周)膜蛋白 ?水溶性蛋白，靠离子键或其它弱键与 膜内表面的蛋白质分子或脂分子极性头部非 共价结合，易分离。 ◆脂锚定膜蛋白 ? 通过磷脂或脂肪酸锚定，共价结合。; 内在膜蛋白与膜脂结合的方式 ?膜蛋白的跨膜结构域与脂双层分子的疏水核心的相互作用。 ?跨膜结构域两端携带正电荷的氨基酸残基与磷脂分子带负电的极性头形成离子键，或带负电的氨基酸残基通过Ca2+、Mg2+等阳离子与带负电的磷脂极性头相互作用。 ?某些膜蛋白在细胞质基质一侧的半胱氨酸残基上共价结合脂肪酸分子，插入脂双层之间，进一步加强膜蛋白与脂双层的结合力，还有少数蛋白与糖脂共价结合。 ;;?去垢剂是一端亲水、另一端疏水的两性小分子，是分离与研究膜蛋白的常用试剂。 ?离子型去垢剂(SDS)和非离子型去垢剂（Triton X-100） SDS: CH3-(CH2)11-OSO3-  CH3 CH3 CH3 – C – CH2 – C – (O-CH2-CH2)n- OH CH3 CH3; 膜蛋白的功能 ?运输作用 如钠钾泵 ?催化作用 如腺苷酸环化酶 ?连接作用 如整连蛋白 ?信号接受和转导作用 如血小板生长因子受体 ;四、确定膜蛋白在膜中位置的实验;光脱色恢复技术(fluorescence recovery after photobleaching， FRAP);;细胞质膜的基本功能P95;第三节 膜骨架; ; ;红细胞膜蛋白及膜骨架;1895一层脂类;;;膜内在蛋白;小鼠-人细胞融合，膜表面抗原的运动;淋巴细胞膜抗原蛋白与 二价抗体结合的成斑成帽;ES细胞外表面;;;;;P90（1）-（3）;去垢剂;胰蛋白酶;乳过氧化物酶;;;SDS处理膜:血影蛋白 (收缩蛋白):是红细胞膜骨架的主要成分 血型糖蛋白A (MN血型抗原):富含唾液酸，可防止红细胞在循环过程中经过狭小血管时相互积聚沉积在血管中。 带3蛋白 :因其在PAGE电泳分离时位于第3条带而得名，是转运阴离子Cl-/HCO-3的载体蛋白。 肌动蛋白 :是细胞骨架的主要成分，其上有多个与血影蛋白结合的位点，通过与血影蛋白的游离端相连，参与膜骨架结构的形成 锚定蛋白 ankyrin:是细胞内连接蛋白，每个红细胞约有10万个。锚定蛋白一方面与血影蛋白相连，另一方面与跨膜的带3蛋白的细胞质结构域相连，即锚定蛋白借助带3蛋白将血影蛋白连到细胞质膜上。 带4.1蛋白 :通过同血影蛋白的结合，促使血影蛋白同肌动蛋白的结合。通过和血型糖蛋白A 的结合促使膜骨架与质膜蛋白的结合 TX-100处理膜:血影蛋白、肌动蛋白、原肌球蛋白、锚定蛋白、带4.1蛋白等.;血影蛋白 肌动蛋白 原肌球蛋白 锚定蛋白 红细胞膜骨架蛋白组成(TX-100处理血影形状保持): 血影蛋白 肌动蛋白 原肌球蛋白 锚定蛋白 带4.1蛋白 ;