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医学课件弥散性血管内凝血(DIC)_1
DIC概念 DIC不是一种独立的疾病。它是一种发生在 多种疾病基础上,凝血系统被异常激活而发 生的以凝血功能失常为主要特征的系列性病 理过程. * 弥散性血管内凝血(DIC) 家兔模型及机制 凝血 抗凝血 1.内源性凝血系统 (Ⅻ因子激活开始) 2.外源性凝血系统 (Ⅲ因子激活开始) 1.完整的血管内皮; 2.血流速度相对较快; 3.单核吞噬系统作用; 4.生理性抗凝物质; 5.纤溶系统。 总之, 体内凝血与抗凝血系统的动态平衡 各种病因 激活凝血系统 凝血酶增多 大量微血栓形成 凝血因子、血小板消耗 纤溶系统激活 产生纤溶酶 FDP形成 纤溶、抗凝作用增强 出血、休克、器官功能障碍和 溶血性贫血等 1 3 2 DIC的系列病理过程 发病机理 1. 内皮细胞损伤, 凝血、抗凝调控失调 2. 组织因子入血,激活外源性凝血系统 3.血细胞大量破坏, 血小板被激活 4.促凝物质入血 5.纤溶活性的改变(继发于凝血系统激活或致病因子直接引起) 造模原理 兔脑粉含有组织因子(或称凝血致活酶),能启动外源性凝血过程. 正常体内血液中没有组织因子,静脉注射兔脑粉后通过外源性凝血途径引起DIC. 实验目的 学习用兔脑粉浸液复制急性实验性DIC动物模型,通过本 实验所测的几项血液学实验结果,讨论急性DIC的发病机 制,初步了解急性DIC的几项血液学常规检查方法 材料 家兔、兔台、常规手术器械、25%乌拉坦溶液、双孔电热恒温水浴箱、台式离心机、721分光光度计、秒表、显微镜、号码计数器、刻度离心管(10ml)、试管、刻度吸管(2ml、5ml)、微量定量移液器、血色素吸管、毛细滴管、血球计数板配盖片、橡皮吸球、乳胶滴管、棉球和纱布,3.8%枸橼酸钠溶液、 4%兔脑粉生理盐水浸出液(临用时配制)、饱和氯化钠液、肝素、 1%硫酸鱼精蛋白液、血小板稀释液、 0.025mol/L氯化钙溶液、P试液、K试液、5ml玻璃试管、动脉夹、动脉插管 兔脑粉浸液的制备:称取兔脑粉[实验前检测其活力,以凝血酶原时间(PT)不超过12s为宜]400mg,加人生理盐水10m1,充分搅匀后放入37℃(摄氏度)恒温水浴箱内孵育60min,每隔15min搅拌一次,然后离心(1000转/min)5min,取上清液过滤后供静脉注射用。 P试液配制:实验前称取兔脑粉200mg,加入5m1生理盐水,充分混匀后放人37°C恒温水浴箱内孵育1h,在此过程中,用玻璃棒搅拌3~4次,并颠倒混匀,然后离心(1000转/min)5min,吸取上清液,再加入等量的0.025mol/L氯化钙溶液,用前摇匀,作PT实验用 K试液配制:实验前将2%白陶白生理盐水悬液1份与兔脑磷脂悬液等量混合。 实验步骤与观察指标 用25%乌拉坦溶液麻醉动物后,暴露一侧颈总动脉,结扎其远心端,用动脉夹夹闭近心端,剪口后插入动脉插管,结扎,固定之,备用取血。 复制DIC模型:取4%兔脑粉生理盐水溶液,按2.0ml/kg体重计算,将总量用生理盐水稀释至30m1,由耳缘静脉缓慢注入。 在注入兔脑粉浸液前15min、注入开始后15mln及45min,分别由颈总动脉取血样10ml一次,抗凝剂(3.8%枸橼酸钠溶液)与血液之比为1:9(V/V),离心(3000转/min)15min,获得含微量血小板血浆作为大部分实验测定用。每次取血样时,采血1~2滴供血小板计数用。另用1.5—2.0m1置于不含抗凝剂的干净试管内,作为测定FDP用 检查急性DIC的几种血液学常规方法: (1)白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)测定 . ①?取被检血浆0.2m1,加入小试管内,置37℃水浴中,然后加 入0.2ml K试液,混匀后孵育3min; ②加入0.025mol/L氯化钙0.2mI,开动秒表,10s后从水浴中取出轻轻侧动,至液体流动停止或出现粗颗粒时为凝固终点。 ③重复2~3次,取平均值,家兔正常值约为30sec。 ⑵凝血酶原时间(PT)测定 ①取被检血浆0.1ml,置于小试管内放于
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