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动物细胞工程(知识梳理)
* * * * * 第三节 动物细胞工程 选修3 第二章 细胞工程 主要内容 动物细胞与组织培养 动物细胞核移植技术 动物细胞融合 单克隆抗体制备 4 1 2 3 动物细胞工程常用技术手段包括 一、动物细胞与组织培养 学习目标: 1、简述动物细胞培养的过程、条件及应用 2、对比说出动物细胞培养与植物组织培养原理、条件、结果、培养目的 请自主完成导学案课前预习部分 一、动物细胞与组织培养 1.概念: (1)材料:取自动物 或 动物的器官或组织。 (2)场所:在 模拟动物 。 (3)目的:使动物细胞或组织继续 、 并维持原有的 和 。 一、动物细胞与组织培养 2.过程: (1)动物细胞培养: 取动物组织块剪碎,用 处理,形成分散的 ,此称细胞悬液,然后接种到 中培养,待细胞分裂形成一层细胞,转移到新培养液中继续培养。 (2)动物组织培养: 剪取动物组织块,用 冲洗,将组织块移入 ,使组织块 在培养瓶的瓶壁上,称贴壁培养。 一、动物细胞与组织培养 3.培养的条件: (1)环境条件:包括 、 、 和 等。 ①温度:哺乳动物多以 ℃为宜; ②PH值:多数细胞生存的最适pH为 ; ③气体:细胞培养所需气体主要有 和 , 是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的 ; ④营养成分:有 等。 一、动物细胞与组织培养 5.技术的应用:用于 、 和 等领域。 补充概念: 细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到40~50代,这种传代细胞为细胞株。 细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别:细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,容易传代培养。 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官(取材) 细胞悬液 10代细胞 50代细胞 传代培养 无限传代 单个细胞 加培养液 (分解细胞间的蛋白) 原代培养 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 剪碎 细胞株 细胞系 动物组织细胞间隙中含有一定量蛋白质 遗传物质未改变 遗传物质已改变 一、动物细胞与组织培养 补充概念: 细胞贴壁:在培养瓶中,悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。 接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象叫做接触抑制。 细胞贴壁过程 那么什么是接触抑制? 接触抑制:细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止,数量不再增加。 50代以后 失去接触抑制 接触抑制 部分细胞突变,获得不死性,向癌细胞方向发展,糖蛋白减少。 一、动物细胞与组织培养 探究》》 1、在动物细胞培养过程中,为什么选择胚胎期或幼龄动物的器官和组织? 2、为什么要用胰蛋白酶对取出的动物组织进行处理?胃蛋白酶不行吗? 3、动物细胞培养与植物细胞培养相同吗?动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体? 植物组织培养和动物细胞培养的比较 二、细胞核移植与动物体细胞克隆 1.克隆: 指遗传上完全相同的 、 或来自同一祖先的生物个体的 。 2.动物体细胞克隆: 将供体体细胞的 与受体去核卵细胞的 进行人工组合,借助于卵细胞的发育能力,经过培养发育成 进而形成新个体的技术,其关键是 技术,利用的是动物细胞核的 性。 3.细胞核移植: 利用 技术等将某种动物细胞的 移入同种或者异种动物的 的技术。 二、细胞核移植与动物体细胞克隆 4.大致过程如下:(动物克隆) 二、细胞核移植与动物体细胞克隆 卵细胞 A母绵羊 B母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 融合后的卵细胞 二、细胞核移植与动物体细胞克隆 5.克隆技术应用: 在克服动物
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