选修3 22动物细胞工程.pptVIP

专题2 细胞工程 4、动物细胞生长特性 细胞贴壁： 悬浮液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 5、动物细胞培养条件 1、无菌、无毒的环境： 添加一定量的抗生素；定期更换培养液，以便清除代谢产物。 2、营养物质： 葡萄糖、氨基酸、核苷酸、无机盐、维生素、动物血清等。 3、温度和pH： 温度为36℃±0.5 ℃, PH为7.2-7.4 4、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 6、动物细胞培养应用 生产有价值的蛋白质制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）； 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性； 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据。 B淋巴细胞与抗体 单克隆抗体 四、动物体细胞核移植技术: 动物体细胞克隆：是指将供体细胞的细胞核与受体去核卵细胞的细胞质进行人工组合，借助于卵细胞的发育能力，经过培养发育成胚胎进而形成个体的技术。 * * 动物细胞工程 一、动物细胞培养 定义：是指在体外模拟动物体内环境，将动物细胞或组织在无菌、温度适宜和营养充足的条件下培养，使其继续生长、增殖并维持原有结构和功能的技术。 1、取材： 动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织。它们细胞增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容易培养。 用胰蛋白酶等处理动物组织，形成分散的悬浮细胞。 动物细胞培养适宜的pH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 2.分散成单个细胞 3.过程： 　　细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40--50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。 原代培养： 是指从供体获取组织或细胞后的初次培养。 传代培养： 将原代培养的细胞分离稀释后转入新的培养瓶中继续培养，称为传代培养。 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体 培养结果 大量获得细胞或细胞产物 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物组织培养和动物细胞培养的比较 细胞A 细胞B 杂种细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 仙台病毒 二、动物细胞融合 2、过程： 1、概念： “2个或多个动物细胞”→“1”、“杂交单核细胞” 　１．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。 　２．动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 　３．每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。 三、单克隆抗体 　由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 整个制备过程要经过几次筛选?每次筛选的目的是什么？ 第一次筛选得到杂交瘤细胞（多种），第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所以产生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单克隆抗体。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义，只不过克隆的不是B淋巴细胞，而是杂交瘤细胞。 单克隆抗体的应用 与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异性强，灵敏度高，优越性十分明显。 应用主要有： 1、临床诊断 2、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤 生物导弹：单克隆抗体作为载体分子，同抗癌药物相结合，将他们运载到肿瘤部位，杀死癌细胞，这种抗体——药物结合物称之为生物导弹。它能定向杀灭癌细胞，避免或减少对正常细胞的伤害，大大减轻了抗癌药物的副作用。 核移植 胚胎细胞核移植 体细胞核移植（难度高） 克隆羊“多利”的产生过程: 克隆动物的受体细胞为什么采用动物的卵细胞？ 高等动物高度分化的细胞，只有细胞核保持了全能性，所以进行克隆时，必须采用未受精的卵细胞，然后进行核移