生物化学 第34章 DNA复制和修复.ppt

一、中心法则 二、DNA的复制 三、DNA的损伤与修复 四、DNA的突变 （二）DNA的半保留复制 （DNA semiconservative replication ） The hypothesis proposed by Watson and Crick in 1953. Each strand acts as the template of the other; DNA分子的每一条链都含有合成它的互补链的全部信息 How does DNA replication proceed? Are the two parental strands completely unwound before replication begins? Does replication begin at random sites or at unique sites? Does DNA replication proceed in one direction or both directions? The overall chain growth occurs in 5’ 3’, 3’ 5’, or both directions? What enzymes take part in DNA synthesis? (1)原核生物中的DNA聚合酶 DNA聚合酶Ⅰ:单体酶，多功能酶。 5??3?聚合酶功能 3??5?外切酶活性（对双链无作用，校对功能。但在正常聚合条件下，此活性不能作用于生长链） 5??3?外切酶活性（双链有效，主要是对DNA损伤的修复，以及在DNA复制时RNA引物切除及其空隙的填补） 在DNA链的3?形成焦磷酸解（生理意义不大） 无机焦磷酸盐与dNTP之间的焦磷酸基交换 (1)原核生物中的DNA聚合酶 DNA聚合酶Ⅱ：多亚基酶，聚合作用；具有3’? 5’外切酶活性。其它生理功能尚不清楚，可能在修复紫外光引起的DNA损伤中起作用。 (1) 原核生物的DNA 聚合酶 （3）DNA连接酶 ——若双链DNA中一条链有切口，一端是3’-OH，另一端是5‘-磷酸基，连接酶可催化这两端形成磷酸二酯键，而使切口连接。 ***不能将两条游离的DNA单链连接起来。 DNA连接酶要求提供能量。 拓扑学或拓扑结构（topology)： 是近代数学的一个分支，它研究曲线和曲面的空间关系和内在数学性质，而不考虑它们的度量（大小、性状）。 核酸的拓扑结构： 是指核酸分子的空间结构。 两条互相缠绕的双螺旋核酸分子表现出许多拓扑学的关系 DNA超螺旋结构的形成 3、单链结合蛋白（SSB） 填空练习题 DNA复制时，连续合成的链称为 ，不连续合成的链称为 。 DNA合成的原料是 ，复制中需要的引物是 。 DNA复制时，子链DNA合成的方向是 ，催化DNA合成的酶是 。 碱基互补配对原则中，A与 配对，G与 配对。 填空练习题 所有冈崎片段的延伸都是按照 方向进行的。 前导链合成的方向与复制叉移动的方向 ，滞后链合成的方向与复制叉移动的方向 。 （相同、相反） 在DNA复制时， 可以防止单链模板重新缔合和核酸酶的进攻。 1、复制的起始 复制是从DNA分子上的特定部位开始的，这一部位叫做复制起始点（origin of replication，ori） 原核生物每个DNA分子只有一个复制起始点，真核生物DNA分子有多个复制起始点。 ? 细胞能否分裂，决定于进入S期及M期这两个关键点。G1→S及G2→M的调节，与蛋白激酶活性有关。 ? 蛋白激酶通过磷酸化激活或抑制各种复制因子而实施调控作用。 真核生物中DNA的复制特点 1、真核生物染色体有多个复制起点，多复制眼，呈双向复制，多复制子。 2、真核生物DNA复制速度比原核慢。 3、真核生物染色体在全部复制完之前起点不再重新开始复制；而在快速生长的原核中，起点可以连续发动复制。真核生物快速生长时，往往采用更多的复制起点。 4、真核生物有多种DNA聚合酶。 5、真核生物线性染色体两端有端粒结构，防止染色体间的末端连接。由端粒酶负责新合成链5?RNA引物切除后的填补，亦保持端粒的一定长度。 端粒结构 练习题 1、DNA复制时，下列哪一种酶是不需要的？A．DNA聚合酶 B．DNA连接酶 C．拓朴异构酶D．解链酶 E．限制性内切酶 2、下列关于DNA复制的叙述，哪一项