红树莓海尔特兹初代培养中防止外植体褐化研究.docVIP

红树莓海尔特兹初代培养中防止外植体褐化研究 　　摘要以红树莓海尔特兹（Heritage）的健壮新梢为材料，研究了不同外植体类型、0.1% HgCl2溶液消毒时间、6-BA浓度、防褐化剂、暗培养时间对组织培养中外植体褐化的影响，探讨防止初代培养中外植体褐化的最佳方法。结果表明：以带芽茎段为外植体，用0.1% HgCl2灭菌处理300 s，在MS+6-BA 0.50～0.75 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA 0.2 mg/L培养基中，添加1.5 g/L VC，暗处理5 d，对防止外植体褐化效果最佳。 　　关键词红树莓；海尔特兹 ；初代培养；外植体；褐化 　　中图分类号S663.2文献标识码A文章编号 1007-5739（2011）22-0123-02 　　 　　ResearchonPreventingExplantofRedRaspberryHeritagefromBrowninginPrimaryCulture 　　CUI Xue-yanDONG Jing-chao 　　（Liaoning Institute of Sandyland Improvement and Utilization，Fuxin Liaoning 123000） 　　AbstractTaking healthy young sprout of red raspberry Heritage as material，the effect of different explants，disinfection time of 0.1% HgCl2 solution，densities of 6-BA，browning control agents and dark culture times on browing of explant were studied，the best method about preventing expant from browning in primary culture was explored.The results showed that taking stem section with bud as expant，sterilizing 300 seconds，adding 1.5 g/L VC in MS+6-BA 0.50～0.75 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA 0.2 mg/L medium，5 days in darkness，the effect of preventing expant from browning was the best. 　　Key wordsred raspberry；Heritage；primary culture；explant；browning 　　 树莓（Rubus）属蔷薇科（Rosaceae）悬钩子属（Rubus L.）小灌木，其果实甜而芳香，营养丰富，除鲜食外还可加工成果酱、果汁、果酒和蜜饯等，具有重要的经济价值，是我国北方的主要浆果之一。红树莓品种近年来在国际市场热销，正在成为果树行业增长热点之一，其中海尔特兹属于双季树莓品种，每年既可采用防寒栽培夏秋双季采果，又可采用免防寒栽培在秋季单季采果，在辽宁地区已经大面积推广。为了加快红树莓规模化生产的需要，除了传统的扦插、根、压条等做法外，组织培养是加快繁育最有效的方法之一。 　　初代培养是组织培养的关键步骤，但红树莓初代培养中存在严重的褐化现象，如处理不当常导致组培苗死亡，组培失败。因此，如何克服褐化成为初培???功与否的关键[1]。为此，该文研究影响外植体褐化的5种因素与褐化率的关系，以便为解决树莓初培中褐化死亡问题提供依据。 　　1材料与方法 　　1.1试验材料与培养条件 　　试验材料为红树莓海尔特兹健壮新梢，取自熊岳果树研究所基地大棚。培养室温度为25～28 ℃，每天光照8～12 h，光照强度2 500 lx[2]。 　　1.2试验方法 　　1.2.1不同取材部位对外植体褐化的影响。设2个处理，即以带芽茎段为外植体（A1）、以茎尖为外植体（A2）。每个处理各取1 000个，采用相同预处理、相同灭菌方法接种在MS+6-BA 0.50～0.75 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA 0.2 mg/L（pH值5.8）培养基中。培养30 d后，调查不同取材部位对外植体褐化程度的影响。 　　1.2.2升汞（HgCl2）消毒时间对外植体褐化的影响。将带芽茎段外植体装入已灭菌的摇杯中，边倒进0.1% HgCl2溶液边开始记时，不断摇动摇杯，至第1次倒出调整时间。根据消毒时间不同设4个处理，分别为消毒270 s（B1）、300 s（B2）、330 s（B3）、360 s（B4），