药食两用猕猴桃果实中脂肪和蛋白质含量分析.docVIP

药食两用猕猴桃果实中脂肪和蛋白质含量分析 　　摘要：本论文测定猕猴桃果实中脂肪和蛋白质含量 ，并对其结果进行研究。分别利用双缩尿分光光度法、索氏提取法来对猕猴桃果实中蛋白质、脂肪含量进行测定。实验结果表明：猕猴桃果实中蛋白质2.27?，脂肪是20.09?。所以研究和开发猕猴桃中蛋白质、粗脂肪等成分很有经济和实践的意义。 　　关键词：猕猴桃蛋白质脂肪； 　　引言 　　猕猴桃(Actinidiachinensis)是一种藤本植物，是我国特产水果之一。猕猴桃具有很高营养、医疗、保健和观赏价值，被誉为“水果之王”，是目前世界各国竞相发展的果品之一[1]。 　　目前，世界上消费量最大的前26种水果中，猕猴桃营养最为丰富全面，它含有17种氨基酸，极丰富的维生素C，蛋白质、脂肪、糖等，还含有胡萝卜素等。其维生素C的含量比苹果、梨等水果超出几十倍，是一种“超级水果”[2] 。 　　猕猴桃有相当满意??抗癌作用，能阻断致癌物质亚硝胺的合成，其阻断率高达98％。用猕猴桃汁、已破坏维生素C 的猕猴桃汁、柠檬汁和已破坏维生素C的柠檬汁，做观察阻断致癌物质亚硝胺的合成效力的实验，结果发现，猕猴桃所含抗癌活性物质多于柠檬4倍左右［3］。 　　蛋白质是生命的物质基础，脂肪供给人体热量、构成身体组织和生物活性物质。本文为更好的开发和利用猕猴桃提供初步科学依据，将分别利用双缩尿分光光法，索氏提取法来对猕猴桃中粗蛋白质、粗脂肪含量进行测定[5]。 　　1．实验部分 　　1．1仪器与试剂 　　1．1．1 仪器 　　UV-4802-型紫外可见分光光度计（尤尼克（上海）仪器有限公司），BS224S系列电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）,索氏提取器。 　　1．1．2试剂 　　牛血清蛋白（上海蓝季科枝发展公司），硫酸铜（AR），石油醚（AR），酒石酸钾钠，氢氧化钠，浓硝酸，茚三酮(AR)，硝酸银(AR)。 　　双缩脲试剂：称取硫酸铜和酒石酸钾钠溶于蒸馏水中，边搅拌边加入氢氧化钠溶液，用水稀释至1000mL。 　　1．1．3样品来源 　　猕猴桃：（喀什市亿家超市买的）。 　　1．2实验方法 　　 1．2．1 蛋白质的定性分析 　　称取样品适量，用蒸馏水浸泡12h,间隔时间摇动完全容去蛋白质，然后过滤，把滤液保存备用。 　　取三支试管各盛2mL样品溶液，分别加入茚三酮溶液，浓硝酸，硝酸银溶液进行定性分析[4]。 　　1．2．2蛋白质的定量分析―双缩脲法 　　1.双缩脲法的原理：蛋白质的肽键与碱性铜盐络和生成紫红色复合物，蛋白质含量不同，产生颜色的深浅也不一样，故可用比色法进行测定其灵敏度较低。用标准蛋白质溶液（牛血清蛋白）作为对照品[6]。 　　2．对照品溶液的制备：精称取结晶牛血清蛋白1g ，置100mL 容量瓶中加蒸馏水振荡溶解，并稀释到刻度，制备10 mg.mL-1的标准蛋白溶液。 　　3．标准曲线的绘制 　　取12支试管分两组，分别加入（10mg.mL-1）0,0.2,0.4,0.6,0.8, 1.0mL标准牛血清蛋白溶液，用水补足到1mL,各分别加入双缩脲试剂4mL，混合均匀，振荡15min，室温放置30min，然后用分光光度计测得波长λ540nm的吸光度A。用未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照液，取两组测定的平均值，以蛋白质的含量为横坐标，以吸光度Ａ为纵坐标，绘制标准曲线。 　　4．测定猕猴桃中蛋白质含量：取猕猴桃处理液，加入双缩尿试剂4.0mL，按绘制标准曲线条件下进行操作，然后用分光光度计测得λ540nm的吸光度（A）。 　　按下计算公式来计算样品中的蛋白质含量： 　　蛋白质含量（?）=C×V／W×100? 　　式中：C―用回归方程求得的待测样品的浓度（mg.mL-1）； 　　V―样品溶液的总体积（mL）； 　　W―样品的质量（g）； 　　1．2．3加样回收率的测定 　　精密吸取1mL样品液分别置于5个10mL的容量瓶中,分别加入精密吸取0.3mL，0.45mL，0.55mL，0.6mL，0.65mL葡萄糖标准溶液，加水补足2mL， 　　按标准曲线项下方法测定。 　　1．2．4粗脂肪含量的测定―索氏提取法 　　1.索氏提取法的原理：本法利用石油醚在索氏提取器中提取样品中的脂肪，然后蒸发除去石油醚，干燥，称重，即可得到样品中粗脂肪的百分含量[7]。 　　2．样品处理：将猕猴桃样品，放在80-100℃烘箱中烘4个小时。泠却后，准确地称取30g，置于研钵中研磨细，研钵的样品及擦净研钵的脱脂棉一并用脱脂滤纸包住用丝线扎让样出。用特制的滤纸样品后，接口用脱脂棉塞好。放入索氏提取器的提取管内，最后再用石油醚洗净研钵后倒入提取管内。 　　3．测定猕猴桃中粗脂肪的含量：洗净索氏提取瓶，在1