病原生物学精品教学(复旦大学)02 细菌的形态与结构.pptVIP

病原生物学精品教学(复旦大学)02 细菌的形态与结构.ppt

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菌毛:比鞭毛更细、更短而直硬的丝状物,与细菌的运动无关。 菌毛蛋白具有抗原性。 根据功能不同,菌毛可分为普通菌毛和性菌毛两类,普通菌毛具有黏附功能,与细菌致病性有关;性菌毛与细菌致育力有关。 菌毛在普通光学显微镜下看不到,必须用电子显微镜观察。 (三)菌毛 (Pilus/fimbriae) 凝集红细胞 接合(conjugation) 是细菌通过性菌毛相互连接沟通,将遗传物质(主要是质粒DNA)从供体菌转移给受体菌。 能通过接合方式转移的质粒称为接合性质粒,不能通过性菌毛在细菌间转移的质粒为非接合性质粒。 芽胞:不利条件下胞质脱水浓缩,在菌体内形成的一个圆形或椭圆性,折光性很强的结构。是细菌的休眠形式。 芽胞抵抗力很强,对热、干燥化学消毒剂均不敏感,消毒灭菌的指标 在适宜条件下可长成繁殖体,但芽胞不是繁殖形式。 产生芽胞的都是革兰阳性菌。 (三)芽胞 (endospore) 高压蒸汽灭菌法: 121℃,20-30min 杀灭芽胞 芽胞的大小、形状、位置等随菌种而异,有重要的鉴别意义。 炭疽芽胞杆菌 肉毒梭菌 破伤风梭菌 芽胞抵抗力强的原因: (1)芽胞含水量少,蛋白质受热后不易变性。 (2)芽胞具有多层致密的厚膜,理化因素不易透入。 (3)含有的DAP (吡啶二羧酸)与钙结合的盐能提高芽胞中各种酶的稳定性。 皮质 芽孢外衣 芽孢壳 芽孢壁 芽胞特点 保存有细菌全部生命活性。 是细菌的休眠状态,具有很强的抗高温、抗干燥、抗化学消毒剂和抗射线能力。 芽胞可发芽,形成新的菌体:一个细菌只形成一个芽胞,一个芽胞发芽也只生成一个菌体,芽胞不是细菌的繁殖方式。 芽胞是灭菌指标。 思 考 题 G+菌与G?菌细胞壁结构差异 简述细菌的四种特殊结构(英文) 革兰染色的原理、方法和实际意义 G+菌与G?菌在染色性、抗原性、致病性及对药物敏感性等方面的差异 细菌有哪些基本形态? 青霉素和溶菌酶为什么很难杀灭革兰阴性菌? 名词解释(注意中英文写法): 芽胞,LPS,革兰染色; 中介体,拟核,核糖体; 肽聚糖,异染颗粒; O抗原,K抗原,H抗原 插入VEDIO。 * 头发丝约75um. * * Chlamydomanas 单胞藻类 Euglena 眼虫 Vorticella 涡虫 Paramecium 草履虫 Volvox 团藻 Stentor 喇叭虫 * * * * 实验四 细菌的荚膜染色 (一)实验目的:学习细菌的荚膜染色法: (二)实验原理:由于荚膜与染料间的亲和力弱,不易着色,通常采用负染色法染荚膜,即设法使菌体和背景着色而荚膜不着色,从而使荚膜在菌体周围呈一透明圈。由于荚膜的含水量在90%以上,故染色时一般不加热固定,以免荚膜皱缩变形。 (三)实验器材 1.活材料:培养3-5天的胶质芽胞杆菌(Bacillus mucilaginosus,俗称“钾细菌”)。该菌在甘露醇作碳源的培养基上生长时,荚膜丰厚。 2.染色液和试剂 :Tyler法染色液:(见附二、(一)、14)、用滤纸过滤后的绘图墨水、复红染色液(见附二、(一)、2)、黑素(见附二、(一)、7)、6%葡萄糖水溶液、1%甲基紫水溶液、甲醇、20%CuSO4水溶液、香柏油、二甲苯。 3.器材: 载玻片、玻片搁架, 擦镜纸、显微镜等。 (四)实验方法 推荐以下四种染色法,其中以湿墨水方法较简便,并且适用于各种有荚膜的细菌。如用相差显微镜检查则效果更佳。 1.负染色法: (1)制片:取洁净的载玻片一块,加蒸馏水一滴,取少量菌体放入水滴中混匀并涂布。 (2)干燥:将涂片放在空气中晾干或用电吹风冷风吹干。 (3)染色:在涂面上加复红染色液染色2—3min。 (4)水洗:用水洗去复红染液。 (5)干燥:将染色片放空气中晾干或用电吹风冷风吹干。 (6)涂黑素:在染色涂面左边加一小滴黑素,用一边缘光滑的载玻片轻轻接触黑素,使黑素沿玻片边缘散开,然后向右一拖,使黑素在染色涂面上成为一薄层,并迅速风干。 (7)镜检:先低倍镜,再高倍镜观察。 结果:背影灰色,菌体红色,荚膜无色透明。 2.湿墨水法 (1)制菌液:加1滴墨水于洁净的载玻片上,挑少量菌体与其充分混合均匀。 (2)加盖玻片 放一清洁盖玻片于混合液上,然后在盖玻片上放一张滤纸,向下轻压,吸去多余的菌液。 (3)镜检:先用低倍镜、再用高倍镜观察。 结果:背景灰色,菌体较暗,在其周围呈现一明亮的透明圈即为荚膜。 3.干墨水法 (1)制菌液:加1滴6%葡萄糖液于洁净载玻片一端,挑少量胶质芽胞杆菌与其充分混合,再加1环墨水,充分混匀。 (2)制片:左手执玻片,右手另拿一边缘光滑的载玻片,将载玻片的一边与菌液接触,使菌液沿玻片接触处散开,然后以30度角,迅速而均匀地将菌液拉向玻片的一端,使菌液铺成一薄膜。 (3)干燥:空气中

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