生物化学 核酸及蛋白质的生物合成PPT.ppt

DNA的重组修复 胸腺嘧啶二聚体 核酸酶及重组蛋白 重组 修复复制 DNA聚合酶 DNA连接酶 复制 核酸的生物合成 二、RNA的生物合成 （一）转录（ DNA指导下RNA的合成） （二） RNA的复制 (RNA指导下RNA的合成) （三）RNA和DNA合成比较 核酸的生物合成 转录 RNA DNA 在RNA聚合酶的催化下，以DNA链为模板，按照碱基配对的原则，以四种核苷酸为原料成RNA，从而将DNA所携带的遗传信息传递给RNA的过程称为转录(transcription) 。 （一）转录（ DNA指导下RNA的合成） 核酸的生物合成 1、转录的特点 转录是以单链DNA为模板合成RNA的过程； 转录具有不对称性； RNA的转录从DNA模板的特定位点开始，并在一定的位点终止； 转录产物有三类：mRNA、rRNA、tRNA。 启动子 （promoter) 终止子(terminator) 模板链 反义链 有义链 编码链 非信息区 DNA 5′ 5′ 3′ 3′ 核酸的生物合成 2、原核细胞的转录 RNA聚合酶催化的反应 A C G A C G U U 模板DNA 5′ 3′ 5′ 3′ 新合成RNA 核酸的生物合成 大肠杆菌RNA聚合酶的结构示意图 ? ? ? ? ?? 核心酶(α2ββ?) 起始因子 β?——和模板DNA结合 β——起始和催化聚合反应 α——？ 全酶(α2ββ? ?) 核酸的生物合成 起始 双链DNA局部解开 磷酸二酯键形成 终止阶段 解链区到达基因终点 延长阶段 5? 3? ? ? RNA 启动子（promoter) 终止子(terminator) 5? ? RNA聚合酶 ? 5? ? 3? 5? ? 3? 5? 5? 3? ? 离开 RNA合成过程 核酸的生物合成 3、转录产物的加工 （1）rRNA前体的加工 （2）tRNA前体的加工 （3）真核生物mRNA前体的加工 核酸的生物合成 原核生物中rRNA前体的加工 甲基化作用 专一核酸内切酶 30S前体 17S tRNA 25S 专一核酸外切酶 16S rRNA tRNA 23S rRNA 5S rRNA 专一核酸外切酶 16S tRNA [4S] 23S 5S 真核生物中rRNA前体的加工 甲基化作用 45S 前体 18S rRNA 5.8S tRNA 28S rRNA 18S 5.8S 28S 核酸内切酶 核酸的生物合成 tRNA前体 RNA pol Ⅲ TGGCNNAGTGC GGTTCGANNCC DNA 原核 tRNA 前体分子的加工 切除 加CCA 碱基修饰 核酸的生物合成 真核细胞mRNA的加工 5′ “帽子” PolyA 3′ 顺反子 m7G-5′ppp-N-3 ′ p AAAAAAA-OH ? 剪接：剪去内含子(intron)，拼接外显子(extron) ? 5′端接上一个“帽子”(CAP)结构 ? 3′端添加PolyA“尾巴”,由RNA末端核苷酸转移酶催化 核酸的生物合成 DNA 核 核糖体 新生蛋白质 真核生物 原核生物 mRNA前体 转运 加工 mRNA mRNA ? 启动子不同 ? RNA聚合酶不相同 ? 多顺反子与单顺反子 ? 真核生物中转录与复制在不同的区域 ? 转录后RNA加工修饰不同 真核生物和原核生物转录的差别 核酸的生物合成 ? 核苷酸合成抑制剂 氨基酸、叶酸、碱基和核苷酸的类似物 嵌合剂：放线菌素D、溴乙锭 烷化剂：使核苷酸被烷基化 ? 与DNA模板结合的抑制剂 ? 作用于RNA聚合酶的抑制剂 抗菌素:如利福平、吖啶等，α-鹅膏蕈碱 4、转录过程的选择性抑制 DNA和RNA合成的比较 核酸的生物合成 三、基因工程简介 1、细菌的限制－修饰系统 2、基因重组与DNA克隆 3、聚合酶链式反应(PCR)技术 基因工程亦称遗传工程，即利用DNA重组技术的方法，把DNA作为组件，在细胞外将一种外源DNA（目的基因）和载体DNA重新组合连接(重组)，最后将重组体转入宿主细胞，使外源基因DNA在宿主细胞中，随细胞的繁殖而增殖（cloning，克隆），或最后得到表达，最终获得基因表达产物或改变生物原有的遗传性状。 常用的DNA限制性内切酶的专一性 酶 辨认的序列和切口 说明 ‥ ‥A G C T ‥‥ ‥ ‥T C G A ‥ ‥ ‥ ‥G G A T C C ‥‥ ‥ ‥C C T A G G ‥‥ ‥ ‥A G A T C T ‥‥ ‥ ‥T C T A G A ‥‥ ‥ ‥G A A T T C ‥‥ ‥ ‥C T T A A G ‥‥ ‥ ‥A