生物化学实验课件PPT.ppt

生 物 化 学 实 验;实验一 糖类的性质实验（实验一和二） 实验二 氨基酸的分离鉴定--纸层析法（7） 实验三 蛋白质及氨基酸的呈色反应（8） 实验四 酶的特性（18） 实验五 脂肪碘值的测定(5) 实验六 蛋白质的等电点测定和沉淀反应(9) 实验七 米氏常数的测定(20) 实验八 维生素C的定量测定(23) ;实验课是提高教学质量的重要环节。通过实验巩固理论知识，训练基本操作，培养独立工作的能力，为了保证实验顺利进行，实验前应注意以下几点：;1、每次实验前必须详细预习实验讲义，明确实验原理及操作步骤，并在记录本上拟出操作时的注意事项。 2、实验时自觉遵守课堂纪律，严格按操作规程操作，既要独立操作又要与其他同学配合。 3、实验时应严格按照实验步骤及试剂用量进行操作，不能任意变更。不熟悉的仪器和设备，应先请老师讲解后使用，切勿随意乱动。 ;4、实验进行时，必须随时把观察得到的现象和实验数据，如实地记录在记录本上，不得记录在其他纸上，要养成作原始记录的良好习惯。 5、实验时如有问题发生，应首先用自己学过的知识，独立思考加以解决，培养独立分析问题和解决问题的能力，如自己不能解决，可与指导老师共同讨论研究，提出解决问题的办法。 6、精心爱护各种仪器。实验所需的一般仪器按规定借领，归还。完成实验后应将仪器洗净倒置于实验柜中并排列整齐。如有损坏或遗失，需要说明原因，经指导教师签名后方可补领，并按规定赔偿。;9、必须遵守实验室规则： （1）室内不得高声谈笑，保持安静的实验环境。 （2）爱护仪器，不得浪费药品，节省水电，遵守学生守则及实验室安全、卫生等制度。 （3）公用仪器及试剂瓶用完后应及不要移动原有的位置。注意瓶塞切勿盖错，以免污染试剂，用毕后立即放回原处。对于有害药品，应按实验室规定取用。 （4）滤纸、火柴棒、碎玻璃等应投入废品袋，切勿丢入水池，以保证下水道畅通。;（5）如用仪器有损坏，立即向指导老师报告，再行登记。 （6）保持实验室的整齐清洁，个人所带与实验无关的东西，如书包等要放在实验室指定地方，不得乱放在实验桌上。 （7）由学生轮流值日，值日生要负责当天实验室的卫生、安全和服务性的工作，特别注意打扫水槽中废弃物。 （8）最后一组实验人员，离开实验室时，检查水、电、门、窗是否关闭，以保证实验室安全。 （9）如有突发事件（起火、试剂腐蚀伤人）发生，不要惊慌失措，应妥善处置（使用灭火机、关闭电源等）。;实验一 糖类的性质实验;糖类的重要鉴别方法是 Ｍｏｌｉｓｈ反应和Ｓｅｌｉｗａｎｏｆｆ反应。糖类、苷类及其他含糖物质与α 萘酚和浓硫酸呈紫红色的环的反应称为 Ｍｏｌｉｓｈ反应，该反应可用于糖类和非糖物质的鉴别。酮糖糖加入间苯二酚和６ｍｏｌ／Ｌ盐酸能产生红色的反应称为Ｓｅｌｉｗａｎｏｆｆ反应，该反应可用于酮糖和醛糖的鉴别。如己酮糖加入间苯二酚和浓盐酸，加热后迅速产生红色，而同样条件下己醛糖的反应速度要慢得多。;非还原性糖在酸存在下，加热水解后产生还原性的单糖。淀粉的水解是逐步发生的，先水解成紫糊精，再水解成红糊精、无色糊精、麦芽糖，最终水解成葡萄糖。用碘液可以检查这种水解过程。完全水解后，可用Ｂｅｎｅｄｉｃｔ试剂加以证实。 多糖类遇浓硫酸被水解成单糖，单糖被浓硫酸脱水闭环，形成糠醛类化合物，在浓硫酸存在下与α萘酚发生酚醛缩合反应，生成紫红色缩合物。 ;一、实验目的： 1、了解糖类某些颜色反应的原理； 2、学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法； 3、学习几种常用的鉴定糖类还原性的方法及 其原理。;二、实验原理 (一)颜色反应 1. α-萘酚反应 糖在浓无机酸（硫酸或盐酸）作用下，脱水生成糠醛及糠醛衍生物，后者能与α-萘酚生成紫红色物质。 注意：因糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性，不是糖类的特异反应。;O;2. 间苯二酚反应 在酸作用下，酮糖脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。 此反应是酮糖的特异反应。因为醛糖在同样条件下呈色反应缓慢，只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反应。 ;(二) 还原作用 许多糖类由于其分子中含有自由的或潜在的醛基或酮基，因此在碱性溶液中能将铜、铁、银等金属离子还原，同时糖类本身被氧化成糖酸及其他产物。糖类这种性质常被利用于检测糖的还原性及还原糖的定量测定。 本实验所用的试剂为斐林试剂和本尼迪克特试剂。它们都是Cu2＋的碱性溶液，能使还原糖氧化而本身被还原成红色（颗粒大）或黄色（颗粒小）的Cu2O沉淀。 本尼迪克特试剂是改良的斐林试剂。（见P100,101脚注） ;三、器材及试剂 1、器材：试管、试管架、滴管、水浴锅（或电炉） 2、试剂： 1%葡萄糖溶液， 1%果糖溶液， 1%蔗糖溶液，