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生物技术 细胞工程基础PPT
继代培养:更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料(愈伤组织、芽)。 生根培养:将芽苗转接到生根培养基上培养成为完整植株的过程。 初代培养 继代培养 生根培养 驯化移栽 植物组织培养一般过程 思考:各种组织培养类型有何主要的异同处? ★相同点:无菌操作 人工培养基上培养 ★不同点:外植体不同 成苗途径与培养方法不同 三、植物组织培养的特点 1、培养材料经济 2、培养条件人为控制,周年生产 3、生长周期短,繁殖率高 4、管理方便,有利于实现工厂化生产和自动化控制 (二)植物组织培养的基本理论 1.细胞全能性理论 2.植物的再生性 3.根芽激素理论 4.组培苗的遗传稳定性 1 细胞全能性理论 植物每一个具有完整细胞核的体细胞,都含有植物体的全部遗传信息,在适当条件下,具有发育成完整植株的潜在能力。 ②创造理想的适于细胞生长和分化的环境 植物细胞全能性表达的条件 ①体细胞与完整植株分离,脱离完整植株的控制 细胞全能性的实现与利用 ①直接分生芽 ②形成愈伤组织,再分化形成芽 ③形成胚状体,由胚状体直接重建完整植株,或制成人工种子后再重建植株。 实现细胞全能性的途径:34 2 植物的再生性 ◇现象:伤口愈合 扦插生根 ◇植株再生的过程即为植物细胞全能性表达的过程,经过脱分化和再分化两个阶段。 组织 分裂 分化 细胞 分裂 已分化组织细胞 脱分化 分裂 再分化 器官 植株 录像 二 细胞培养的基本技术——无菌操作 细胞工程的所有试验都要求在无菌条件下进行,要求十分严格的无菌操作。 1、准备室、接种室、培养室(紫外线、熏蒸等); 2、超净工作台、高压灭菌设备、过滤器; 3、生物材料的消毒(酒精、升汞、次氯酸钠等); 4、试验器械、器皿的灭菌(干热、湿热); 5、药品、培养基的灭菌(湿热、过滤); ——细胞培养技术 细胞培养是指动物、植物或微生物细胞在体外无菌条件下的保存和生长。(微生物培养、植物细胞培养、动物细胞培养) 基本步骤包括: 获取原材料及除菌; 配制培养基,对培养基进行灭菌; 接种、培养和传代。 ——细胞融合技术 离体条件下将不同生物或同种生物不同类型的单细胞通过无性方式融合成一个杂合细胞的技术。 ——单克隆抗体 细胞融合技术的主要过程: 制备原生质体(植物); 诱导细胞融合(化学融合剂介导、电融合、病毒融合剂介导等); 筛选杂合细胞。 植物细胞工程 植物组织培养 细胞培养 体细胞胚发生 单倍体培养 合子胚培养 原生质体培养与细胞融合 快速繁殖技术 植物脱毒技术 次生物质与植物细胞的大量培养 人工种子 思考: 植物有哪些繁殖方法? 分株繁殖 压条繁殖 播种繁殖 嫁接繁殖 扦插繁殖 组织培养繁殖 第一节 植物组织培养(tissue culture)技术 一、植物组织培养的含义(重点) 二、植物组织培养的类型(难点)三、植物组织培养的特点(重点) (一)植物组培的含义、类型与特点 什么是植物组织培养? ? 指在无菌条件下,将离体的植物器官、组织、细胞或原生质体,培养在人工配制的培养基上,人为控制培养条件,使其生长、分化、增殖,发育成完整植株或生产次生代谢物质的过程和技术。 组织培养----离体培养 组织培养----无菌培养 组织培养----植物克隆 广义和狭义概念有何区别? ★组培范围不同,即外植体范围不同。 广义组培 狭义组培 外植体〔explant〕:从植物体分离并用于离体培养的材料。 胚轴 花粉 胚乳 胚 种子 果实 花器 叶 芽 茎 根 组织 原生质体 子叶 子房 苞片 胚珠 花药 花梗 分生组织 成熟组织 花托 叶柄 幼苗 植物组织培养有哪些类型? 1.根据培养基状态分类 培养基 固体培养 液体培养 静止培养 旋转培养 纸桥培养 振荡培养 半固体体培养 固体培养 液体静止培养 纸桥培养 振荡培养 2.根据外植体分类 植物组织培养 植 株 培 养 器 官 培 养 组 织 培 养 胚 培 养 细 胞 培 养 原 生 质 体 培 养 植物组培有哪些类型? 植株培养 扦 插 苗 培 养 种 子 苗 培 养 器官培养 根系培养 茎尖、茎段培养 花器培养 果实培养 种子培养 叶片培养 人参根消毒、接种操作程序图 菊花茎尖消毒、接种操作程序图 茎段培养成苗示意图 玫瑰茎段培养 竹竽茎尖培养 组织培养 分生组织培养 薄壁组织培养 输导组织培养 胡萝卜形成层(分生组织)培养示意图 胚胎培养 胚乳培养 原胚培养 胚珠培养 种胚培养
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