第03章酶(改)PPT.ppt

Enzyme;酶的概念;第一节酶的分子结构与功能The Molecular Structure and Function of Enzyme;酶的不同形式:;一、 E的分子组成;二、酶的活性中心是酶分子中执行其催化功能的部位;指必需基团在空间结构上彼此靠近，组成具有特定空间结构的区域，能与底物特异结合并催化底物转化为产物。;活性中心内的必需基团;;三、同工酶;H;丙酮酸 ;*生理及临床意义 在代谢调节上起着重要的作用； 用于解释发育过程中阶段特有的代谢特征； 同工酶谱的改变有助于对疾病的诊断； 同工酶可以作为遗传标志，用于遗传分析研究。;举例 2;第二节 酶的工作原理The Mechanism of Enzyme Action;在反应前后没有质和量的变化； 只能催化热力学允许的化学反应； 只能加速可逆反应的进程，而不改变反应的平衡点。 通过降低反应所需的活化能来加快化学反应的速度 ;酶与一般催化剂催化效率的比较;一种酶仅作用于一种或一类化合物，或一定的化学键，酶的这种特性称为酶的特异性或专一性。;根据酶对其底物结构选择的严格程度不同，酶的特异性可大致分为以下3种类型：; 1.绝对特异性：一种酶只作用于一种底物,发生特定反应，生成一种产物。如：;;;（三）酶促反应的可调节性;二、酶通过促进底物形成过渡态而提高反应速率;;（二）酶-底物复合物的形成有利于底物转变成过渡态 ;诱导契合作用使酶与底物密切结合;酶的诱导契合动画;2.邻近效应与定向排列使诸底物正确定位于酶的活性中心 ;酶的活性中心多是酶分子内部的疏水“口袋”，酶反应在此疏水环境中进行，使底物分子去溶剂化 ，防止水化膜的形成，利于底物与酶分子的密切接触和结合。这种现象称为表面效应。 ;（三）酶的催化机制呈多元催化作用;第三节 酶促反应动力学 Kinetics of Enzyme-Catalyzed Reaction ;酶促反应动力学：研究各种因素对酶促反应速率的影响，并加以定量的阐述。 影响因素包括：酶浓度、底物浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂等。;一、底物浓度对反应速率影响的作图呈矩形双曲线;单底物、单产物反应； 酶促反应速率一般在规定的反应条件下，用单位时间内底物的消耗量和产物的生成量来表示； 反应速率取其初速率，即底物的消耗量很小（一般在5﹪以内）时的反应速率 底物浓度远远大于酶浓度。;产 物;;中间产物;;E与S形成ES复合物的反应是快速平衡反应，而ES分解为E及P的反应为慢反应，反应速率取决于慢反应即 V = k3[ES]。 测定的速度为初速度 S的总浓度远远大于E的总浓度，因此在反应的初始阶段，S的浓度可认为不变即[S] =[St]。;米－曼氏方程式推导过程：;当底物浓度很高，将酶的活性中心全部饱和时，即[Et] =[ES]，反应达最大速率 Vmax = k3[ES] = k3[Et] (5);;当反应速率为最大反应速率一半时：; Km与Vmax的意义; Vmax;定义: 当酶被底物充分饱和时，单位时间内每个酶分子催化底物转变为产物的分子数。 意义: 可用来比较每单位酶的催化能力。 ;1. 双倒数作图法，又称为 林-贝氏作图法;2. Hanes作图法;二、底物足够时酶浓度对反应速率的影响呈直线关系;当[S]＞＞[E]，酶可被底物饱和的情况下，反应速率与酶浓度成正比。 关系式为：V = k3 [E];三、温度对反应速率的影响具有双重性;酶的最适温度不是酶的特征性常数，它与反应进行的时间有关。 酶的活性虽然随温度的下降而降低，但低温一般不使酶破坏。温度回升后，酶又恢复其活性。 ;四、pH通过改变酶和底物分子解离状态影响反应速率;五、抑制剂可逆地或不可逆地降低酶促反应速率;抑制作用的类型;有机磷化合物 ?? 羟基酶 解毒 -- -- -- 解磷定(PAM) 重金属离子及砷化合物 ?? 巯基酶 解毒 -- -- -- 二巯基丙醇(BAL) ;有机磷化合物;（二） 可逆性抑制作用;竞争性抑制作用的抑制剂与底物竞争结合酶的活性中心 ;反应模式;特点;举例;磺胺类药物的抑菌机制 ——与对氨基苯甲酸竞争二氢叶酸合成酶;有些抑制剂与酶活性中心外的必需基团相结合，底物和抑制剂之间无竞争关系。但酶-底物-抑制剂复合物(ESI)不能进一步释放出产物。这种抑制作用称作非竞争性抑制作用。;反应模式;特点;抑制剂仅与酶和底物形成的中间产物(ES)结合，使中间产物ES的量下降。这样，既减少从中间产物转化为产物的量，也同时减少从中间产物解离出游离酶和底物的量。这种抑制作用称为反竞争性抑制作用。;反应模式;特点：;各种可逆性抑制作用的比较 ;六、激活剂可加快酶促反应速率; ;酶构象的调节（快调节）;（一）变构酶