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第十一讲-物证检验PPT
血 痕 检 验
血痕检验需要解决的问题
送检检材是否是血痕
如果是血痕,是人血还是动物血
若是人血,则测定遗传标记进行个人识别
同时进行其他诸如出血量、出血时间及出血部位推断等问题
血痕检验的步骤
肉眼检查
预试验
确证试验
种属鉴定
血痕的个人识别(遗传标记测定以及性别鉴定)
其他检验(出血部位、出血量、血痕陈旧度等推断)
肉眼检查
肉眼检查主要观察血痕的数量、分布、位置、大小、形状、范围、色泽、它们的相互关系以及它们与现场其他物品的相互关系。
目的:推断死亡时间、死亡原因以及案件发生经过等等。
预 试 验
目的:要从大量可疑血痕中筛除不是血痕的检材。
原理:血痕中的血红蛋白或正铁血红素具有过氧化 物酶活性,能使过氧化氢分解成水和新生态氧,后者使加入的化学物质氧化成有色物质。
方法:联苯胺试验、酚酞试验、邻联甲苯胺试验、鲁米诺试验、孔雀绿试验、氨基比林试验、愈创木酯试验。
性质:筛选试验。
优缺点:灵敏度高、特异性差、假阳性率高、直接破坏检材。
酚酞试验
原理:
Hb
H2O2 H2O+[O]
[OH]-
还原酚酞 氧化酚酞 (红色)
(无色) (无色)
确证试验
目的:证明检材是血痕。
原理:检测检材中是否含有血红蛋白或其衍生物。若为阳性结果,则可以认定为血痕。
方法:氯化血红素结晶试验,血色原结晶试验,显微分光镜检查及显微镜下查找血细胞。
优缺点:灵敏度不高;霉菌生长、细菌污染、洗涤、日晒后的血痕,确证试验往往呈阴性反应。
氯化血红素结晶试验
原理:
血红蛋白 正铁血红素
氯化血红素结晶
氯化钠+醋酸 [Cl]+醋酸钠 (褐色菱形结晶)
显微分光镜检查
原理:有色物质能吸收一定波长的光线,在太阳光谱上出现黑色线条,称为吸收线。血红蛋白及其衍生物是有色物质并且具有很强的选择性吸收光线的性质。
种属鉴定
目的:确定血痕是否为人血。
原理:通过检测人的种属特异性指标确证检材为人血。
方法:免疫学方法(沉淀反应、ELISA),生物化学和分子生物学方法(血红蛋白聚丙烯凝胶电泳、人类基因组中种属特异的 DNA序列的PCR检测)。
注意:现场提取的检材中非人类的生物性斑痕的干扰。
抗人血清沉淀素血清试验
原理及操作步骤:
免疫——用人的血清免疫家兔,取兔血清;
纯化——用近缘动物血清吸收兔血清,避
免近缘反应;
检测——用纯化过的兔血清和检材浸液反
应。
注意:建立阳性对照和阴性对照。
抗人血红蛋白沉淀素血清试验
原理:
免疫——用人血红蛋白免疫家兔,制备兔
抗人血红蛋白血清;
检测——用抗血清和检材浸液反应。
血型测定
红细胞血型测定
ABO血型的测定
1、ABO血型抗体测定
2、ABO血型抗原测定(吸收试验、解离试验)
MN、Rh及其它血型的测定
血清型测定
红细胞酶型测定
白细胞血型(HLA血型)测定
精 液 检 验
精液的组成
固体成分(10%):
精子、睾丸细胞、白细胞、脱落柱状上皮细胞、前列腺卵磷脂小体等;
精浆(90%):
1、蛋白质:
人血清共有的蛋白:白蛋白……
精浆中特有的蛋白:前列腺特异性抗原P30,β-微精蛋 白, β-精浆蛋白,α2-精浆糖蛋白;
2、酶类:酸性磷酸酶、乳酸脱氢酶;
3、精胺、胆碱等其他有机物;
4、无机成分:锌等。
新鲜精液检验
新鲜精液为乳白色粘稠液,有特殊腥臭。
正常精子呈蝌蚪状。
精斑检验
肉眼检查
预试验
确证试验
种属鉴定
血型检查
肉眼检查
暗色布上呈硬固、灰白色浆糊斑状;
白色布上呈黄白色地图状;
放大镜观察可见黄白色小鳞片;
紫外线照射可发出特殊的紫白色荧光(可提示有精斑存在) 。
预试验
碘化碘钾试验
酸性磷酸酶试验
锌的检出
乳酸脱氢酶试验
苦味酸结晶试验
碘化碘钾试验
又称Florence试验。
原理:
胆碱+Florence试剂 褐色针状结晶
缺点:
1、灵敏度不高
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