第十一章细胞工程PPT.ppt

第十一章 细胞工程; 番茄与马铃薯同属茄科植物，但不是同属的植物。番茄的果实和马铃薯的块茎是我们经常食用的蔬菜。马铃薯的块茎生长在土壤中。 人们曾经有这样一个幻想：让一株植株地上部分结番茄，地下部分长土豆。这个幻想可能实现吗？;植物体细胞杂交应用研究 ;多莉及其代母;动物细胞培养技术应用 这只老鼠身上的“人耳”是由我国科学家曹谊林教授利用细胞工程技术复制出来的。;细胞工程 ;细胞工程应用技术：细胞生物学和分子生物学方法。;细胞工程分类：植物细胞工程和动物细胞工程。;植物细胞工程技术：植物体细胞杂交；植物组织培养。;异种植物细胞;所采用技术的理论基础 ; Schwann在1839 年明确的指出：“如果具有与有机体内一样的条件时，每个细胞应该可以独立生活和发展”。;1 定义 ;细胞表现出全能性的条件;蜜蜂（2N=32） 减数分裂 卵细胞(N=16) 发育 雄蜂(N=16);植物组织培养的发展简史;③ 迅速发展阶段（60年代后） 原生质体，花药，快繁技术迅速发展;植物组织培养的必要条件：;植物组织培养取样;植物组织培养的培养基;有机营养成分 ① 含N物质：包括维生素和氨基酸。 ② 碳源：2%—5%的蔗糖。 ③ 琼脂：起支持作用。 ④ 生长激素：生长素，细胞分裂素和赤霉素。 PH值：5.0－6.0;试管苗大规模培养;试管植物：花;过程; 1972年卡尔森等通过两个烟草品种之间原生质体的融合，获得了第一个体细胞杂种。; 目前，已得到栽培烟草与野生烟草、栽培大豆与野生大豆、籼稻与野生稻、籼稻与粳稻、小麦与鹅冠草等细胞杂种及其后代，获得了有价值的新品系或育种上有用的新材料。 ;（三） 植物体细胞杂交;去壁;几个概念：;植物细胞的脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。 植物细胞的再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。;一、植物繁殖的新途径;;2.作物脱毒 (1)材料:无病毒的茎尖 (2)脱毒苗:切取茎尖进行组织培养获得;3.神奇的人工种子 (1)特点：后代无形状分离； 不受气候、季节和地域限制。 (2)技术：植物组织培养。 (3)结构：人工薄膜胚状体或不定芽或顶芽或腋芽。;;二、作物新品种的培育;2.突变体的利用 (1)产生：植物组织培养。 (2)利用：筛选对人们有利突变体，进而培育新品种。;1 种类：蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。 2 技术：植物的组织培养。;;;动物细胞工程; 动物细胞工程是建立在动物细胞培养、细胞融合和细胞拆合技术基础上发展起来的。随着基因工程技术、基因转移技术和干细胞工程技术的发展，动物细胞工程在理论和应用两方面获得快速发展。;一 动物细胞培养;1 选材：;2 分散成单个细胞;3 过程;;细胞系(cell line) 原代培养物经首次传代成功后即为细胞系,由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限,可称为有限细胞系(finite cell line),如可以连续培养,则称为连续细胞系(continious cell line),培养50代以上并无限培养下去。; 细胞株(cell strain) 通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养细胞称为细胞株。从培养代数来讲,可培养到40-50代以上。; 20世纪60年代，科学家发现细胞融合现象； 细胞融合可以在不同细胞间或不同种、不同类型细胞间发生，产生异核体。 细胞融合技术的最大发展和应用就是杂交瘤技术。; 细胞融合是指两个或两个以上的相同或不同的细胞合并形成一个细胞的过程。 细胞融合过程可以发生在体内或离体条件下，可以在自然情况下，如受精过程。 更多的是人工方法使两个不同的细胞融合，发生体细胞杂交，形成新的杂种细胞。故有人称融合细胞为杂种细胞。;细胞融合示意图;细胞融合过程可分成两个阶段： ①异核体阶段(heterokaryon)：异核体是指在融合细胞内含有来自两个亲本的细胞核。异核体中细胞核尚未融合， ②杂种细胞形成：当异核体同步进入有丝分裂后，核膜崩溃，来自两个细胞核的染色体结合在一起。融合细胞内只含有一个细胞核，是由来自两个亲本细胞的基因组组合在一起所形成的。;植物、动物细胞融合的比较;三 动物体细胞核移植技术;核移植;细胞重组技术：现代生物工程中瞩目的热点课题，细胞重组结合基因转移可以人为地使细胞表达新的性状和产生新的产物。; 细胞拆合把完整细胞的细胞核和细