第四章 灭活剂和佐剂 wangPPT.pptVIP

4、我国的佐剂的研究 佐剂的研究和佐剂苗的生产，始于1950年代。 1958年曾用羊毛脂和液体石蜡油制造猪丹毒油乳剂苗，但效果不理想。 1980年代以来，对白油佐剂的研究和应用发展极快，尤以禽病白油佐剂疫苗的种类更多，使用效果也比较满意。 WHO认为佐剂除具有免疫增强效应外，尚必须具备下列标准，否则不得用作佐剂。 三、佐剂标准 1、无致癌或辅助致癌性 不能诱导或促进肿瘤形成。 2、安全无毒性 通过肌肉、皮下、静脉、腹腔、滴鼻、口服等各种途径进入动物体后无任何副作用。 3、纯度高、杂质少 杂质往往是副作用的诱发物。因此，佐剂必需符合质量标准。 4、应有一定的吸附力 最好吸附力强 5、在动物体内易降解 不宜长时期留存而诱发组织损伤 6、不含与动物有交叉的抗原 以避免诱发自身免疫反应，防止发生自身免疫性疾病。 7、不应诱发自身超敏性 也不应与抗体结合形成有害的免疫复合物。 8、应性质稳定 佐剂抗原混合物储存1年以上，必须不分解、不变质和不产生不良物质。 四、免疫佐剂作用机理 ① 改变正常免疫机能，吸引大量巨噬细胞以吞噬抗原； ② 改变抗原的构型，使抗原物质降解，并加强其免疫原性； ③ 延长抗原在组织内的贮存时间，使抗原缓慢降解和缓释，并发挥免疫系统的细胞间协同作用（巨噬细胞与T细胞，T细胞与B细胞）。 作用方式 ① 抗原递呈（antigen presentation） ② 抗原寻的（antigen targeting） ③ 免疫调节（immune modulation） 作用机理 ①抗原递呈： 指抗原分子递呈给T细胞的方法。佐剂与疫苗联合使用，有助于抗原性物质在胞内被加工，被MHC分子特异性的结合、保护、运输并递呈给效应细胞。 ② 抗原寻的（antigen targeting） 指抗原传递给免疫系统中适当效应细胞的效率。包括吸引巨噬细胞到达组织部位、活化吞噬细胞、促进抗原与细胞受体的结合等。 ③ 免疫调节（immune modulation） 是指任何可以修饰的免疫效应细胞对抗原或表位进行加工的机制。通过这种机制，可以改变特异性免疫应答的本质或强度。T细胞有Th1和Th2两个亚类。同一抗原和不同佐剂一起使用能够引起不同的免疫反应。因此，通过筛选特定的佐剂，可以达到诱导正确的免疫应答的目的。 1. 按佐剂物理性质 颗粒型佐剂 非颗粒型佐剂 2. 按佐剂的生物学性质（即Ballanti分类法） 微生物及其组分佐剂 非微生物物质佐剂 3. 按佐剂在体内存留的时间 贮存型佐剂（depot type adjuvant） 非贮存型佐剂（non-depot type adjuvant） 五、佐剂的分类 六、常见的兽用免疫佐剂 1、矿物质类佐剂 矿物质佐剂是传统佐剂中的一类。 在兽用疫苗的制备中广泛使用。 氢氧化铝胶 磷酸铝胶 特点 ?主要诱导体液免疫应答，可刺激机体迅速产生持久的高抗体水平。 ?比较安全。 缺点 ?皮下注射时常有肿胀或结块； ?不能有效刺激保护性T细胞免疫。 2、油类佐剂 主要有 弗氏佐剂 弗氏不完全佐剂 弗氏完全佐剂 白油佐剂 是指一类由油类物质、水溶液和乳化剂按一定比例混合形成的佐剂。 该类佐剂主要在抗原寻的过程中起作用，使抗原在注射部位保持稳定，为抗原在淋巴系统中转运提供载体，增加单核细胞的形成和积聚。 油乳剂疫苗的免疫效力高低，直接与乳化作用的好坏及油、乳化剂质量有关。 油乳佐剂 分为 单相乳化佐剂 双相乳化佐剂 单相乳化佐剂 （1）油包水（ W/O） 较粘稠，在机体内不易分散；但佐剂活性优良，为生物制品所采用的主要剂型 （2）水包油 （O/W） 较稀薄，在机体内易于分散；但佐剂活性很低，生物制品中不采用。 双相乳化佐剂 又分为水包油包水和油包水包油 型 粘度小，注射局部反应轻微， 易吸收和佐剂效应高 一种液体或粉末微粒（分散相或内相）借助乳化剂、机械力的作用，分散悬浮于另一种不相溶的液体（连续相或外相）中从而形成稳定的分散体系。 油乳佐剂原理 乳化剂 指油乳剂中内相与外相间的界面活性物质，具有促进和稳定两种互不相溶物形成乳剂。 如羊毛脂、Span-80、Arlacel-80、Tween-80、AtlsG-1471等。 乳化原理 降低分散物的表面张力，在微滴表面上形成薄膜或双片层，以阻止微滴(粒)的相互凝结。 佛氏不完全佐剂