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脂肪酶应用与研究现状
脂肪酶应用与研究现状
0 引言
脂肪酶(Ec.3.1.1.3)即三酰基甘油酰基水解酶,可催化甘油三酯分解成甘油二酯、甘油单酯、甘油和脂肪酸,是一类特殊的酯键水解酶,脂肪酶以氨基酸为基本组成单位,一般只有一条多肽链,催化活性仅决定于蛋白质结构。目前,以生物催化为核心内容的工业生物技术在支撑新世纪社会进步与经济发展的技术体系中的地位已经被提到空前的战略高度[1],作为一种生物催化剂,脂肪酶具有一般催化剂高效性、高选择性、反应条件温和等共同优点,是绿色环保的催化剂,对于生化、食品等生活和生产的各个领域的科学发展,有着非常重要意义。
1 脂肪酶概述
脂肪酶于1834年被发现,是生物体内极其重要的代谢酶,在油、水界面和有机相中起作用,具有良好的立体选择性,以长链脂肪酸酯为天然底物,能在聚合过程中能保持单体上的活性基团,1986年以来,Klibanov等人突破传统酶学思想限制,对界面酶学和非水酶学方面取得了突破性研究成果,使脂肪酶在医药、食品、洗涤剂、材料合成、污水处理等方面均得到了应用,在有机相中,脂肪酶还能催化酯合成、酯交换反应、酯聚合反应、肽合成和酰胺合成等,能在常温常压下,得到其他方法难以得到的产品。此外,脂肪酶来源广泛、催化功能多,催化底物广泛、环保高效,降低了生产成本,提高了经济效益。
2 脂肪酶的应用
2.1 脂肪酶可催化合成可生物降解高分子
目前,人们所依赖的、在生产生活中使用的高分子材料,依然是难以进行生物降解的材料,它们已经给人们的日常生活和社会带来了诸多的不便和危害,更严重的是对自然环境造成了极大的污染,在目前研究可降解材料的方法如天然高分子改造法,原料在受热熔化前就开始分解,难以加工成型,只能通过溶液法加工,产量小,应用范围小;化学合成法一般在高温高压条件进行反应,工艺复杂,副产品多,大部分催化剂带有一定的毒性,成本高,生物相容性较差,相对于上述两种方法,生物合成法则是利用酶来合成目标产品,酶的反应条件温和,具有相对专一性,快速高效,成本较低,产品生物相容性好,能克服了上述两种方法的缺点和微??物法代谢产物复杂,产物分离困难的劣势,脂肪酶可以催化聚酯类可生物降解高分子的合成.在已知的研究中,脂肪酶已经成功催化非手性羧酸衍生物、手性羧酸衍生物等方面有了成功的实例。Wang等[2]利用南极假丝酵母脂肪酶(CALB)高效区域选择性酰化合成6-氮尿苷的5-O-单酯,结果表明,不同类型的酰基供体对CALB的活性具有很重要的影响,以色列(Gutman)[4]研究小组以线性羟基酸甲酯做单体,用猪胰脂肪酶作为催化剂,在有机溶剂中合成了聚羟基酸甲酯,分子量提高到12KD左右,并制成了这种聚酯的薄膜制品。
2.2 脂肪酶在手性药物拆分中的应用
手性是与人们生活关系密切的自然界本质属性之一,对映体在自然界中普遍存在,在构成生物体的基本物质中,包括核酸、蛋白质、糖类等分子都是手性分子,因此相关的许多药物,包括农药和除草剂等也都是光学活性化合物,因为手性药物进入生物体内后,其药理和生理作用多与其和体内靶分子之间的手性匹配和分子识别能力有关[3],手性新药的开发,即选择合成路线中某一个手性中间体进行不对称合成或拆分,再合成单一的手性药物,此法副产物少,容易对目标产物进行分离,常温常压下即可反应,减少了能源消耗和环境污染;脂肪酶的高度立体选择性使制备的单一手性化合物光学纯度较高,脂肪酶在手性药物中的应用愈加广泛.脂肪酶可对环氧丙醇类手性药物中间体、2-取代丙酸类手性中间体的拆分等药物进行拆分.日本田边制药成功地用脂肪酶拆分了外消旋的甲基-3-(4-甲氧基苯基)环氧丙酯,制备了(-)-(2R,3S)-3-(4-甲氧基苯基)环氧丙酰胺,它是生产硫氮卓酮(一种心血管药物)的手性前体,非甾体抗炎药物,如酮基布洛芬(keto-profen)、萘普生(naproxen)、布洛芬(ibuprofen)等的另一种非常重要的手性中间体2-芳基丙酸(CH3CHArCOOH)已经实现工业化,英国的Chiroscience手性技术公司、西班牙Laboratories Menarini公司以实现大规模生产。
2.3 在三甘酯结构测定中的应用
脂肪酶可根据其底物专一性来分类,例如:青霉(Penici
llium sp.)、米黑毛霉(Mucor miehei)所产脂肪酶作用于甘油1位和3位羟基,定义为1,3专一性脂肪酶;而柱状假丝酵母(Candida cylindracea)、假单胞菌(Pseudomona sp.)及染色粘性菌(Chromobacterium viscosum)所产脂肪酶为随机水解酶[4],并且白地霉(Geatrichum candium)产脂肪酶对顺式不饱和脂肪酸,如油酸具有选择性,而米黑毛霉(M.mi
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