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蒲公英中绿原酸纤维素酶法提取工艺优化 　　摘要：为了研究纤维素酶法提取蒲公英（Ｔａｒａｘａｃｕｍ ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍ Ｈａｎｄ．－Ｍａｚｚ）中绿原酸的工艺，通过单因素试验探讨加酶量、料液比、提取温度、提取时间、ｐＨ对绿原酸提取率的影响，并通过正交试验对影响绿原酸提取率的参数进行优化。结果表明，蒲公英中绿原酸提取的最佳工艺条件为ｐＨ ６．０、加酶量３．０ ｍＬ、提取温度５０ ℃、提取时间１．０ ｈ，此条件下绿原酸提取率为１０．０３１ ｍｇ／ｇ。 　　关键词：蒲公英（Ｔａｒａｘａｃｕｍ ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍ Ｈａｎｄ．－Ｍａｚｚ）；绿原酸；提取工艺 　　中图分类号：Ｑ９４６．８；Ｒ２８４．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）18－4097-04 　　Optimixation of Cellulase Extraction Technology of Chlorogenic Acid from 　　Taraxacum mongolicum 　　ＬＩＮ Ｃｈｕｎ－ｍｅｉ 　　（Ｏｃｅａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｈｕａｉｈａｉ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｌｉａｎｙｕｎｇａｎｇ ２２２００５，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ） 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ｄａｎｄｅｌｉｏｎ （Ｔａｒａｘａｃｕｍ ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍ Ｈａｎｄ．－Ｍａｚｚ．） ｗａｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｂｙ ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ． Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｎｚｙｍｅ ｄｏｓａｇｅ， ｒａｗ ｍａｔｅｒｉａｌ ｔｏ ｓｏｌｖｅｎｔ ｒａｔｉｏ， ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ， ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｔｉｍｅ ａｎｄ ｐＨ ｏｎ ｔｈｅ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ ｗｅｒｅ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｂｙ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ｔｅｓｔｓ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｐＨ ６．０； ｅｎｚｙｍｅ ｄｏｓａｇｅ， ３．０ ｍＬ； ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ， ５０ ℃； ｅｘｔｒａｃｔｉｏ??? ｔｉｍｅ １．０ ｈ； ｔｈｅ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅｓｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗａｓ １０．０３１ ｍｇ／ｇ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｔａｒａｘａｃｕｍ ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍ Ｈａｎｄ．－Ｍａｚｚ； ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ； ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ 　　蒲公英（Ｔａｒａｘａｃｕｍ ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍ Ｈａｎｄ．－Ｍａｚｚ）别名蒲公草、黄花地丁、黄花三七、婆婆丁等，原产于欧洲，在中国大部分地区均有分布，其味甘苦，性寒，既是营养保健野菜，也是常用的中药材，为药食同源植物之一，是开发绿色天然植物型营养保健品理想的宝贵资源。 　　蒲公英含碳水化合物、脂肪、蛋白质、多种矿物质、微量元素以及维生素等营养成分，此外还含有蒲公英甾醇、蒲公英苦素、皂苷、胆碱、肌醇、咖啡酸、绿原酸、黄酮类等功能性化学成分，对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血性链球菌、卡他球菌均有显著的抑制作用，即具有广谱抑菌作用，此外还具有利胆保肝、抗胃损伤、抗肿瘤、抗氧化、增强免疫等功能［１，２］。其中的绿原酸是一种多酚类物质，具有重要的生理活性，有抗氧化、抗艾滋病毒、抗致畸、抗过敏、抗肿瘤细胞毒活性、对透明质酸酶和葡萄糖－６－磷酸酶有抑制作用等功能［3］。因此蒲公英及其绿原酸成为功能性食品研究开发的热点，中国国内外已开发出蒲公英饮料、蒲公英酒、咖啡、糕点、糖果以及蒲公英花粉和蒲公英根粉等保健食品。目前，绿原酸提取的原料主要是金银花、杜仲叶，另外有葵粕、稻壳、甘薯、杭白菊、牛蒡叶等［4－１５］，其中蒲公英来源丰富，部分学者用水提或醇提方法进行了蒲公英中绿原酸提取的研究［１６］，而纤维素酶法具有条件温和、没有溶剂残留等优点。 　　研究采用纤维素酶法提取蒲公英中的绿原酸，用分光光度法测定提取液中绿原酸含量，计算绿原酸提取率，并对影响绿原酸提取率的因素进行了初步探讨，优化了绿原酸提取的工艺，为提高蒲公英的综合利用价值提供参考。 　　１ 材料与方法 　　１．１ 材料 　　１．１．１ 原料与试剂 蒲公英为２０１１年５月２７日采自山东省烟台市郊区的农田，将其于低温烘干粉碎过４０目筛；３５ ｋＵ／ｇ纤维素酶购自北京梦怡美生物科技有限公司，使用前配成5 g/L纤维素酶；绿原酸标准品（纯度＞９８％）购自北京中科三捷生物有限公司；无水甲醇、无水乙醇、盐酸均为分析纯。 　　１．１．２ 仪器与设备