莲属植物叶片及花瓣比较解剖学研究.docVIP

莲属植物叶片及花瓣比较解剖学研究 　　摘要：对莲属（Nelumbo）植物的叶片及花瓣进行了比较解剖学研究。结果表明，莲属植物的叶片均有明显的栅栏组织和海绵组织之分，但二者的厚度及它们在叶肉中所占的比例有一定的差别；叶肉细胞内经常可以观察到草酸钙晶体；莲花瓣上下表皮均有乳状突起，无栅栏组织，仅有极为疏松的海绵组织，气室发达。同时，从研究结果来看，美国莲与中国莲在叶片和花瓣的解剖结构上没有明显差异；热带来源的莲与温带来源的莲之间并没有明显分化。莲叶片与花瓣解剖特征均表现出莲对水生生活的适应性，而其种间及种内的分化均不明显。 　　关键词：莲（Nelumbo）；叶片；花瓣；解剖结构 　　中图分类号：Q944 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）13-3059-03 　　莲（Nelumbo）是一种重要的水生经济植物和庭院观赏植物，在我国和东亚各国广泛栽培和利用。在河南省郑州市北部大河村的“仰韶文化”房基遗址的台面上，发现了两粒莲子和一些碳化的粮食，距今已经有5 000年的历史了。由此可见，莲作为人类食品的历史远远早于现在的大部分蔬菜类作物。经过长时间的人工驯化和筛选，目前莲主要分为三大类，即花莲、藕莲和子莲，其品种多达几百个。莲不仅与人们的生活密切相关，同时也是一种分类学地位重要的植物。据化石考证，历史上存在过10～12种莲属植物。由于冰期低温的影响，北半球大部分植物均遭灭绝，莲属植物与中国水杉（Metasequoia glyptostroboides）、美国鹅掌楸（Liriodendron tulivifera）、北美红杉（Sequoia sempervirens）一样幸存下来，成为植物的活化石[1]。因此，在进化和分类学研究领域莲都具有重要地位。现存的莲属有两个种，其中中国莲（Nelumbo nucifera）主要分布在亚洲、大洋州北部，美国莲（Nelumbo lutea）主要分布在北美洲。 　　目前，对于莲形态解剖学的研究比较零散，而对于花瓣的解剖学研究还未见报道。莲属植物间也未进行过系统的比较研究。由于莲是分类位置较为特殊的种类，而且其种内外形变化较大，同时，由于叶和花是其露在水面的重要器官，因此，了解不同种类的莲叶片和花瓣内部解剖结构特征对于品种鉴别、植物分类学和进化研???都十分重要。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　供试莲叶片材料10个，其中鄂杂3号、建莲、普者黑白莲、普者黑红莲为选育的中国莲品种，梁子湖莲、龙感湖莲为产自中国的野生中国莲，冬荷和泰国莲为产自热带地区的中国莲，美国莲为产自美国的野生美国莲，中美杂交莲为中国莲与美国莲的杂交后代；莲花瓣材料6个，分别为鄂杂3号、建莲、普者黑白莲、泰国莲、美国莲、中美杂交莲。所有材料均采自武汉大学湖北省莲藕工程研究中心种植基地。 　　1.2 叶片和花瓣的比较解剖学研究 　　1.2.1 取材部位 选取刚全部展开的叶片，在距叶片中心10 cm处剪取5 mm×5 mm的小块（避开大的叶脉）；选取开花前一天的花蕾，从内向外第二轮的花瓣中心剪取5 mm×5 mm的小块。 　　1.2.2 样品制备 样品制备参照刘鲜林等[2]的方法并略做改进。将在戊二醛中固定的材料用磷酸缓冲液冲洗4次，再用1%的锇酸室温固定2 h，磷酸缓冲液冲洗；分别用30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%（均为体积分数）的酒精逐级脱水，每级15 min；然后依次用丙酮乙醇溶液（丙酮∶乙醇=1∶1和4∶1）（体积比）、丙酮环氧树脂溶液（丙酮∶环氧树脂=1∶1和1∶4）（体积比）、纯环氧树脂逐级过渡，每级1 h；最后用Epon 812包埋，37 ℃ 12 h、 45 ℃ 12 h、60 ℃12 h分段升温聚合。用切片机进行半薄切片，切片厚度 2 μm。在干净的载玻片（载玻片可先涂抹一层蛋白甘油）上滴一滴水，将半薄切片置于水滴上，加温使切片展平，用氢氧化钠乙醇饱和溶液脱半薄切片的树脂，浸泡3 min，使组织周围的树脂脱落，组织切片颜色变浅，切片仍平展附着于载玻片上。干燥后经甲苯胺蓝染色。 　　1.2.3 光学显微镜观察 在Olympus显微镜下观察拍照，测量叶片厚度，观察栅栏组织层数并测量栅栏组织厚度、海绵组织厚度、上表皮及下表皮厚度；计算细胞结构紧密度（CTR）和细胞结构疏松度（CSR）。 　　细胞结构紧密度（CTR）=（栅栏组织厚度/叶片厚度）×100%； 　　细胞结构疏松度（CSR）=（海绵组织厚度/叶片厚度）×100%。 　　2 结果与分析 　　2.1 莲属植物叶片的解剖结构 　　从表1和图1可以看出，所观察的10个莲叶片样品均为异面叶，表皮由单层细胞构成，上表皮均有乳状突起，分布有密集的气孔。叶肉组织中的栅栏组织由两层细胞构成，排列较紧