无菌区与设备清洗消毒灭菌的设计及验证好文档.pptVIP

* 洁净/无菌环境的消毒灭菌 消毒剂验证 通过特定的微生物与某消毒剂在规定的使用浓度下，接触规定的时间后，对微生物进行培养、计数，考察消毒剂的消毒/杀菌效果。 * 洁净/无菌环境的消毒灭菌 消毒剂的使用 无菌区域使用的消毒剂须通过0.22微米的无菌过滤； 为克服耐药性，应轮流使用不同种类的消毒剂； 使用消毒剂消毒后，只能用消毒或灭菌的清洁工具； 使用消毒剂的人员要接受相关的培训； 消毒剂应有专门的进入各生产区域的途径； 异常情况的处理方案； 带菌实验器具和耗材要灭菌处理。 * 洁净/无菌环境的消毒灭菌 影响消毒剂使用的因素 菌种； 培养基组分； 接触时间； 中和剂的种类； 表面张力； 样品量； 测试/验证方法； 接种； 培养时间/温度； pH值； 渗透压； 回收率； 培养基性质。 * 洁净/无菌环境的消毒灭菌与微生物监控 洁净室常用消毒剂 醇类：醇类消毒剂使微生物的蛋白质变性，在没有水的情形下，蛋白质不易被变性，在乙醇中加入一些水会使杀菌效力更佳。 酚类化合物：广谱抑菌，对革兰氏阳笥细菌和革兰氏阴性细菌以及真菌均有杀伤作用。酚类消毒剂适宜用水溶液或含乙醇的水溶液配制。有效浓度为400ppm到1300ppm之间。 季铵盐类化合物：季铵盐类化合物在酸性或碱性环境均能杀死细菌或真菌，在碱性环境中的杀菌效力稍强一些。如新洁尔灭溶液（0.05%-0.1%的苯扎溴铵溶液）。 液体灭菌剂和杀孢子剂：次氯酸钠、二氧化氯、过氧化氢、戊二醛、甲醛和过氧乙酸等； 消毒剂定期交替使用不同消毒剂是为了防止环境中微生物对同一种消毒剂产生抗性影响实际的消毒效果。 * 洁净/无菌环境的消毒灭菌 无菌生产场地常用化学熏蒸对区域进行灭菌，亦称大消毒； 灭菌介质 甲醛气体/戊二醛； 石碳酸与乳酸混合气体（1：1） 气化双氧水； 臭氧、紫外线； 灭菌方法对室内换气速度的影响 气体熏蒸的废气排除速度与熏蒸方法有关； 气体熏蒸的废气排除与中和处理与否有关； 与HVAC系统中的排风与新风系统设计有关，通常希望新风在排废气时的进风量与回风量相等。 与自动控制水平有关。 通过化学气体残留测试确认系统是否满足工艺要求的灭菌周期。甲醛消毒与排气至人员可以进入周期为24小时。 * 洁净/无菌环境的消毒灭菌 气体灭菌的细菌挑战试验 方法： 每个试验位置的配养皿内有含107个枯草杆菌的试纸2张； 设定灭菌程序熏蒸后取一张试纸作菌检（普通肉汤配养基37℃ ，72小时），如果无菌则试验完成，但属实验不成功。须减少药量重新熏蒸直至为阳性，即有菌有各另一张试纸作含菌数试验； 合格标准： 灭菌后枯草杆菌残留104为合格（即下降3个对数单位）； 熏蒸无菌后室内残留量的测试。 应有残余浓度小于1-2ppm。 * 洁净/无菌环境的消毒灭菌 甲醛或杀孢子空间灭菌效果验证实例 通过用生物指示剂进行细菌挑战性试验，消毒剂灭菌前后表面微生物检测，来检查其的灭菌效果； 接受标准： 生产指示剂挑战性试验接受标准：含菌量为105 -106和103的菌条消毒后，无菌条件下放入配套增菌液中于37℃培养72小时，阳性对照为加入未消毒菌条的增菌液，阴性对照为未加指未剂的增菌液； 空间熏蒸消毒的方法： 在无菌区有一套独立的熏蒸消毒系统，使消毒剂在各房间内形式雾状水气渗透到洁净区的每一角落，通过验证确定消毒的剂量、空间的温湿度、熏蒸时间和雾化程序。 * 洁净/无菌环境的消毒灭菌 消毒剂用量： 37-40%甲醛：12-15ml/m3 ，中和用25-28%氨水（ 12-15ml/m3 ）； 杀孢子剂为22%的过氧化氢及4.5%的过氧乙酸，60ml/m3 ，5%的稀释液（也可根据洁净厂房设施及地面抗氧化的能力适当提高浓度）； 空间熏蒸消毒的条件： 调整万级无菌区域空调为消毒状态；甲醛：设定无菌区域温度为35-40℃ ，湿度为65-75%；熏蒸4小时；杀孢子剂：设定无菌区域温度为20-25℃ ，湿度为40-50%，熏蒸2小时。 * 洁净/无菌环境的消毒灭菌 测试方法 生物指示剂挑战性试验：确定生物指示剂的摆放位置，放在生产重点区域，及污染高风险区域，避免回风口。消毒前将生物指示剂放入洁净区的各个测试点，使菌条暴露在空气下，消毒结束后待洁净区无刺激性气味后进入洁净区收回菌条，无菌条件下依次将菌条放入配套增菌液中，在37培养24小时、48小时、72小时，记录结果。同时做阳性对照和阴性对照； 表面微生物测试：检测人员分别在消毒前后进入洁净区，对地面、墙面、窗台设备等进行表面微生物检测，比较结果，验证甲醛或杀孢子剂的灭菌效果。 * 洁净/无菌环境的微生物监控 * 洁净/无菌环境的微生物监控 无菌设施环境监控程序 悬浮粒子监测 浮游菌监测 表面活菌监测 人员携带的活菌监测 温度和湿度监控 压差