固体分散体技术对纳米雄黄稳定性及体外溶出影响研究.docVIP

固体分散体技术对纳米雄黄稳定性及体外溶出影响研究 　　摘要 目的：制备纳米雄黄固体分散体以提高纳米雄黄的稳定性及体外溶出度。方法： 分别以聚乙二醇6000（PEG6000）、泊洛沙姆188（F68）为载体，采用熔融法制备纳米雄黄固体分散体并用X-射线衍射法、显微观察鉴别药物在载体中的存在状态。采用二乙基二硫代氨基甲酸银分光光度法对As203进行含量测定并进行稳定性考察试验，采用氢化物原子吸收分光光度法进行含量测定，对固体分散体中砷的体外溶出进行考察。结果：X-射线衍射和显微观察结果显示，纳米雄黄以无定型状态存在于固体分散体中，2种载体的固体分散体均能增加纳米雄黄中砷的溶出量和溶出速度并减少纳米雄黄的团聚和As203的含量。结论：以F68为载体制备的固体分散体能显著提高纳米雄黄的稳定性和体外溶出度。 　　关键词 纳米雄黄；固体分散体；稳定性；溶出度 　　收稿日期 2013-06-07 　　基金项目 教育部新世纪优秀人才支持计划项目（NECT08-0898）；上海市教委重点学科项目（J50302）；上海市优秀学科带头人项目（10XD1403900） 　　通信作者 *冯年平，博士生导师，Tel：（021E-mail：npfeng@ 　　作者简介 郭腾，博士研究生，从事中药新型给药系统研究，Tel：（021E-mail：guoteng1@ 中药雄黄的主要成分为As2S2和As4S4，并夹杂少量As2O3和其他重金属盐，传统医学认为雄黄具有解毒、燥湿、祛痰、截疟等作用。现代医学研究表明，雄黄还具有抗肿瘤作用，大量文献报道了中药雄黄对恶性血液病、多发性骨髓瘤、宫颈癌及子宫颈癌前病变等的治疗研究[1-2]，其抗肿瘤机制包括诱导凋亡、抑制增殖、促进分化等[3-5]。但雄黄的主要活性成分As2S2水溶性差，体内难以吸收，导致其生物利用度低、临床使用量大，从而影响了治疗效果。 　　纳米技术已经被运用于提高雄黄的疗效，近年的研究表明，经纳米化后，雄黄体现出更佳的抗肿瘤作用[6]。同时，雄黄到达纳米级后也带来了其他需要解决的问题，粒径减小，导致其比表面积增加，更加容易发生氧化反应形成As2O3从而带来毒性[7]；另外，纳米雄黄粉极易发生团聚，限制了其临床使用效果。本课题通过固体分散体技术来提高纳米雄黄的抗氧化性，增加纳米雄黄的稳定性，降低其毒性的同时不影响其活性。 　　1 材料 　　行星式球磨机（PM 100型，德国Rersch）；原子吸收分光光度计（990AFG，北京普析通用有限公司）；紫外-可见分光光度计（UV765，上海精科）；Sartorius天平（CP225D，德国）；5804R台式离心机（EPPENDORF，德国）；Nano ZS90 Zetasizer粒径/Zeta电位测定仪（Malvern，英国）；RC-806溶出度仪（天津天大天发科技有限公司）；X-射线衍射仪（Rigaku，日本）；eclipse 80i数码显微镜（日本Nikon）；DS-Ri1数码成像系统（日本Nikon）。 　　雄黄（湖南石门）；砷标准溶液（用As2O3配制，国家标准物质中心）；聚乙二醇6000（PEG6000，国药集团化学试剂有限公司）；泊洛沙姆188（F68，德国巴斯夫有限公司）；其余试剂均为分析纯。 　　硫脲-抗坏血酸溶液：称取硫脲、抗坏血酸各5 g，用蒸馏水溶解并定容至100 mL，配成50 g·L-1的溶液，现用现配。 　　硼氢化钾溶液：称取硼氢化钾5 g溶于20 g·L-1氢氧化钾溶液500 mL中，配成10 g·L-1的溶液，现用现配。 　　稀盐酸：取盐酸234 mL，加水稀释至1 000 mL，即得。 　　碘化钾试液：取碘化钾16.5 g，加水使溶解成100 mL，即得。本液应临用前新鲜配制。 　　酸性氯化亚锡试液：取氯化亚锡20 g，加盐酸使溶解成50 mL，滤过，即得。本液配成后3个月即不适用。 　　二乙基二硫代氨基甲酸银试液：取二乙基二硫代氨基甲酸银0.25 g，加氯仿适量与三乙胺1.8 mL，加氯仿至100 mL，搅拌使溶解，放置过夜，用脱脂棉滤过，即得。本液应置棕色玻璃瓶内，密塞，置阴凉处保存。 　　标准砷溶液：准确称取As2O3 0.132 g，置1 000 mL量瓶中，加20%氢氧化钠溶液5 mL溶解后，用适量的稀盐酸中和，再加稀盐酸10 mL，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10 mL，用水稀释至刻度，摇匀，即得（每1 mL相当于1 μg的As）。 　　上述试剂均购于国药集团化学试剂有限公司。 　　2 方法 　　2.1 As2O3分析方法的建立 　　采用2010年版《中国药典》砷盐检查法测定中的二乙基二硫代氨基甲酸银法[8]