基于临床药效剂量下吴茱萸镇痛及伴随毒副作用研究.docVIP

基于临床药效剂量下吴茱萸镇痛及伴随毒副作用研究 　　[摘要] 目的： 对吴茱萸水提组分发挥镇痛药效剂量下出现的伴随毒副作用及其机制进行观察与研究，为阐明其“功效-毒性”相关性提供实验依据。方法：小鼠按体重随机分为5组，即正常对照组、扶他林组、吴茱萸水提组分高、中、低剂量组，连续给药7 d，末次药后90 min采用小鼠腹腔注射醋酸致痛法及小鼠热板法疼痛模型，观察其在发挥药效作用时的伴随毒副作用；除观察小鼠毒性症状外，检测血清和肝脏组织谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）活性，以及血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）含量，计算肝、肾脏器指数；另取一部分血清检测前列腺素E2（PGE2）水平、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、谷胱甘肽（GSH）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的含量和活性。结果：连续多次给小鼠灌胃药效剂量下的吴茱萸水提组分，可显著减少小鼠扭体反应次数和明显提高小鼠热板痛阈值，且呈现良好的“量-效”关系；给药期间，小鼠出现腹泻、怠动、烦躁、体重增长缓慢等毒性症状；给药7 d后，血清和肝组织内ALT，AST活性均升高，肝体比值明显增大，血清BUN，Cr含量无明显变化，肾体比值只有高剂量组出现增大；血中PGE2，SOD，GSH，GSH-PX含量和活性明显下降，MDA，NO，NOS含量和活性明显升高。上述变化随剂量的增加而逐渐加重，与对照组比较有明显差异，呈现一定的量-毒关系。结论：连续给小鼠灌服一定剂量的吴茱萸水提组分，其在发挥镇痛药效的同时会对肝脏产生一定的毒副作用，并呈现一定的剂量依赖关系；其镇痛机制与降低血中PGE2含量有关，其毒性机制与氧化损伤有一定相关性。 　　[关键词] 吴茱萸；水提组分；镇痛；伴随毒副作用 　　吴茱萸为芸香科植物吴茱萸Euodia rutaecarpa （Juss） Benth.、石虎E. rutaecarpa （Juss） Benth var. officinalis （Dode） Huang或疏毛吴茱萸E. rutaecarpa （Juss） Benth.var. bodinier （Dode） Huang.的干燥近成熟果实。辛、苦、热，有小毒，归肝、脾、胃、肾经，能散寒止痛，降逆止呕，助阳止泻[1]。吴茱萸始载于《神农本草经》，列为中品，为温中止痛的必备药，在许多方剂中皆有配???应用，但随着近年来吴茱萸临床不良反应报道的日益增多，且以肝损害为主，吴茱萸的毒性引起了人们的高度重视。中药药性理论是以功效为核心，以物质为基础，性、味、归经、有毒无毒等要素相互关联的复杂理论，构成中药药性理论的3个核心要件是药性、物质、功（毒）效。中药的毒性是在中医理论指导下，临床辨证用药和功效表征过程中被逐渐发现和认识的，其功效和毒性的表达密切相关。关于吴茱萸研究截止到目前为止也多是单一的药效或毒性报道，没有吴茱萸关于发挥药效与毒性的剂量范围研究与报道。由于效毒二重性是药物作用的基本特性[2]，因此笔者认为有必要进行中药“功效-毒性”相关性的研究，即在进行其功效研究的同时考察其毒副作用的表达，不能孤立地“就功效论功效，就毒性论毒性”。基于上述理论的指导，本研究主要对镇痛有效剂量范围内产生的伴随毒副作用进行了观察与研究，为进一步锁定产生毒副作用的物质基础、明确剂量范围、有助于临床ADR诊疗标准构建，提供药理、毒理学基础研究数据。 　　1 材料 　　1.1 药品 　　吴茱萸药材购自安徽亳州市鲁康药材站（批，经山东省中医药研究院林惠彬研究员鉴定为芸香科植物吴茱萸E. rutaecarpa的干燥近成熟果实，按2005年版《中国药典》吴茱萸项下检查，符合各项规定。吴茱萸水提组分（批，由本试验室提取制备，现用现配。吴茱萸水提组分样品制备：取吴茱萸药材1 500 g，分别加10，8，8倍量水加热回流提取3次，每次1 h，16层纱布滤过、合并滤液，浓缩至所需浓度。 　　1.2 动物 　　昆明种小鼠，雌雄各半，体重18～22 g，适龄、健康，共180只，购自山东大学实验动物中心，动物合格证号SCXK（鲁）2009-0001。 　　1.3 仪器与试剂 　　PL303精密电子天平（瑞士梅特勒托利多仪器有限公司）；可调式移液器（上海赛默飞世尔仪器有限公司）；560全自动生化分析仪（德国贝尔公司）；DDL-5型低速冷冻离心机（上海安亭科学仪器厂）；DZKM-S-6电热恒温水浴锅（北京市永光明医疗仪器厂）；UV-2102型紫外分光光度仪（中美合资尤尼柯有限公司）。氢氧化钾（分析纯，天津市广成化学试剂有限公司）；甲醇（分析纯，天津市富宇精细化工有限公司）；ALT，AST，BUN，CR，MDA，SOD，NO，NOS