生物化学 第09章三羧酸循环.pptVIP

第 九 章三羧酸循环 Tricarboxylic Acid Cycle 营养物在生物体内氧化的一般过程 一、TCA循环是以形成柠檬酸为起始物的循环反应系统 TCA循环( Tricarboxylic Acid Cycle)： 由一系列酶促反应构成的循环反应系统，首先由乙酰CoA与草酰乙酸缩合生成含3个羧基的柠檬酸，经过4次脱氢、2次脱羧，生成4分子还原当量和2分子CO2，重新生成草酰乙酸，构成一个循环反应过程，称为三羧酸循环。或柠檬酸循环、Krebs循环。 二、Hans Krebs创立了“TCA循环”学说 Krebs正式提出了三羧酸循环的学说，故此循环又称为Krebs循环。 Krebs利用鸽子胸肌组织悬液，测定不同有机酸作用下，丙酮酸氧化过程中的耗氧率。 第一项重大发现： 4碳二羧酸： 6碳三羧酸：柠檬酸、顺乌头酸和异柠檬酸 5碳二羧酸：α-酮戊二酸 可刺激丙酮酸的氧化过程。 第二项重大发现: 丙二酸对丙酮酸有氧氧化的抑制作用， 丙二酸抑制丙酮酸有氧氧化时，会有柠檬酸、α-酮戊二酸和琥珀酸的积累。 丙二酸是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂，这表明柠檬酸和α-酮戊二酸通常为琥珀酸的前体。 根据上述实验观察和一些其它的证据， 1937年，Hans Krebs首次提出符合化学逻辑的序列排列的，丙酮酸氧化途径的假说： 柠檬酸→顺乌头酸→异柠檬酸→α-酮戊二酸 丙酮酸 ↑ ↓ 草酰乙酸 ← 苹果酸 ← 延胡羧酸 ← 琥珀酸 后来Zynen证实丙酮酸→乙酰CoA. TCA循环最初是建立在实验基础上的推理假说。 酶的研究：证实并阐明了该循环的细节。 同位素标记代谢物研究：证实TCA循环， 如：丙酮酸或乙酸酯分子中特定碳原子的13C或14C标记等同位素示踪实验 公认为营养物分解代谢的必经途径。 1953年Krebs获得诺贝尔奖 第 二 节三羧酸循环的反应过程及其调控 Reactions and Regulation of Tricarboxylic Acid Cycle 一、三羧酸循环由8步代谢反应组成 三羧酸循环由8步代谢反应组成 1. 乙酰CoA与草酰乙酸缩合成柠檬酸的合成 乙酰辅酶A（acetyl CoA）与草酰乙酸（oxaloacetate）缩合成柠檬酸（citrate）； 反应由柠檬酸合酶（citrate synthase）催化。 2. 柠檬酸经顺乌头酸转变为异柠檬酸 此反应是由顺乌头酸酶催化的异构化反应； 由两步反应构成，(1)：脱水反应；(2)：水合反应。 3. 异柠檬酸氧化脱羧转变为α-酮戊二酸羧 异柠檬酸在异柠檬酸脱氢酶（Isocitrate dehydrogenase）作用下，氧化脱羧而转变成 ?-酮戊二酸（ ?- Ketoglutarate）。 4. α-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰 CoA 在?-酮戊二酸脱氢酶复合体催化下?-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰CoA(succinyl-CoA)； 该脱氢酶复合体的组成及催化机理与丙酮酸脱氢酶复合体类似。 5. 琥珀酰CoA合成酶催化底物水平磷酸化反应 琥珀酰CoA合成酶催化，琥珀酰CoA的高能硫酯键水解与GDP磷酸化偶联，生成琥珀酸、GTP和辅酶A。 这是三羧酸循环中唯一直接生成高能磷酸键的反应。 6. 琥珀酸脱氢生成延胡索酸 琥珀酸脱氢酶催化，辅酶是FAD，是三羧酸循环中唯一与内膜结合的酶。 7. 延胡索酸加水生成苹果酸 苹果酸酶催化此步反应。 8. 苹果酸脱氢生成草酰乙酸 苹果酸脱氢酶催化此步反应， 辅酶是NAD+。 二、1 次TCA循环生成2分子CO2 消耗：1分子乙酰辅酶A 生成：2次脱羧：2分子CO2 4次脱氢：3分子NADH+H+ → 3 x 2.5 =7.5 ATP 1分子FADH2 → 1 x 1.5 =1.5 ATP 1次底物水平磷酸化：1分子GTP → 1 ATP 合计： 10 ATP 三、TCA循环的中间产物本身并无量的变化 底物: 乙酰CoA; 产物: CO2, H+, ATP 中间产物: 催化剂作用，本身无量的变化； 不能