株多重耐药铜绿假单胞菌耐药性及β内酰胺酶基因分析.docVIP

34株多重耐药铜绿假单胞菌的耐药性及β内酰胺酶基因分析 【摘要】 　　目的： 对34株多重耐药铜绿假单胞菌的药敏结果和β内酰胺酶基因进行分析，以指导临床合理用药。方法： 用KB法对铜绿假单胞菌进行常规药敏试验，选取34株多重耐药铜绿假单胞菌，并用PCR扩增方法检测其β内酰胺酶基因：TEM，SHV，PER，VEB。结果： 34株多重耐药铜绿假单胞菌对12种常用抗生素的耐药率为20.5%～100%，PCR检测出TEM为44.1%，SHV为11.8%，VEB为5.9%，PER为0%。结论： 我院多重耐药铜绿假单胞菌携带的β内酰胺酶基因以TEM为主。 【关键词】 铜绿假单胞菌； β内酰胺酶； 多重耐药 　　［Abstract］Objective: To investigate drug resistance pattern and βlactamase genic of multidrugresistant Pseudomonas aeruginosa, so as to provide reference for reasonable selection of antimicrobials. Methods： Antimicrobial susceptibility was evaluated by disk diffusion test(KB method). The βlactamase genes: TEM, SHV, VEB, PER carried on multidrug resistant Pseudomonas aeruginosa were detected by polymerase chain reaction method(PCR). Results： The resistant rates of 34 strains multidrug Pseudomonas aeruginosa to 12 kinds of antimicrobials were from 20.5% to 100%. The positive rate of βlactamase genes TEM, SHV, VEB, PER expression was 44.1%(15/34), 11.8%(4/34), 5.9%(2/34), and 0%. Conclusion： TEM type βlactamase was the main type of Pseudomonas aeruginosa gene in our hospital. 　　［Key words］Pseudomonas aeruginosa; βlactamase; multidrugresistant 铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa，PA)广泛分布于自然界，是临床常见的条件致病菌之一，常引起肺部、泌尿系及烧伤创面感染。近年来PA在医院感染分离菌的分离率居首位，其耐药率不断升高，对多种抗生素表现出固有或获得性耐药，对3类或3类以上抗菌药表现耐药的多重耐药(multidrug resistant，MDR)的PA不断增加［1-5］。为了使临床能有效控制感染，对多重耐药菌耐药特征的研究成了人们关注的热点。现对我院2005年1月～2007年12月间部分多重耐药PA的耐药性及β内酰胺酶基因进行分析，报告如下。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 实验菌株的收集与筛选 　　收集2005年1月～2007年12月我院临床微生物科分离所得的PA，利用KB法筛选出多重耐药的菌株。根据NCCLS2005年标准进行敏感、中敏、耐药的判断，3类或3类以上抗菌药物耐药的菌株判为多重耐药PA。铜绿假单胞菌ATCC27853作为质控菌。共收集了34株，其中痰标本19株、尿标本2株、其他标本13株。全部细菌用法国生物梅里埃公司API鉴定系统鉴定到种。 　　1.1.2 仪器和材料 　　温箱、低温冰箱、PCR扩增仪和电泳仪等。MullerHinton(MH)琼脂为OXO IDE公司产品。 　　1.1.3 抗菌药物纸片 　　氨曲南(ATM)、头孢吡肟(FEP)、头孢他啶(CAZ)、头孢哌酮/舒巴坦(SCF)、头孢哌酮、亚胺培南(IPM)、庆大霉素(GEN)、阿米卡星(AMK)、环丙沙星(CIP)、左氧氟沙星(LVX)、妥布霉素、磺胺甲恶唑/甲氧苄氨嘧啶(SXT)，均购自中国药品生物制品检定所。 　　1.2 方法 　　1.2.1 药敏 　　根据NCCLS2005年标准，用KB法对铜绿假单胞菌进行常规药敏试验。 　　1.2.2 PCR检测细菌β 　　内酰胺酶基因 检测模板提取：挑纯培养细菌菌落少许置入50 μl灭菌水中，置1