超嗜热古菌thermococcus sp.4557中dna聚合酶调控机制及应用研究-regulatory mechanism and application of dna polymerase in thermophilic archaea thermocus sp.4557.docxVIP

目 目 录目录 ．．I中文摘要 ．IAbstract ．．IIL前言 ．11．1古菌及超嗜热古菌Thermococcus sp．4557的概况 11．1．1古菌 ．．11．1．2超嗜热微生物 31．2古菌DNA复制 41．2．1 DNA复制起点 ．41．2．2与DNA复制相关蛋白 51．2．3冈崎片段的形成 91．3热稳定DNA聚合酶研究及应用 91．3．1热稳定DNA聚合酶的研究进展 91．3．2依赖于热稳定DNA聚合酶PCR技术的应用 lO1．4依赖DNA聚合酶的PCR技术在禽白血病病毒研究中的应用 111．5本研究的立题依据和基本思路 121．5．1立题依据 121．5．2基本思路 132材料和方法 ．．142．1材料 ．．142．1．1实验样品 142．1．2菌株和载体 ．142．1．3工具酶及相关试剂 14万方数据2．1．4试剂盒 2．1．4试剂盒 ．142．1．5引物 152．1．6数据库与主要软件 162．2方法 ．．162．2．1超嗜热古菌Thermococcus sp．4557的培养 。162．2．2超嗜热古菌基因组DNA的提取 ．172．2．3目的基因的扩增与His重组表达载体的构建 182．2．3．1目的基因的扩增与回收： ．182．2．3．2线性载体的制备 202．2．3．3 His—PolD(S)、His—GAN表达载体的构建 。202．2．3．4 His