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 酶 化 学 (Chemistry of Enzyme);本章重点及难点 重点：了解酶作为生物催化剂的特点、国际命名；了解酶催化作用机理 ；掌握酶促反应动力学中米氏方程及Km的意义、应用，掌握影响酶促反应动力学的因素及与影响酶催化高效性的因素之间的区别。掌握别构酶的特点及核酶、同工酶、诱导酶等的概念。 难点：酶催化作用机理 、各因素对酶促反应速度的影响及酶促反应动力学的应用。;第一节 通 论;一、酶学研究历史;; 酶专一性类型;四、酶作用专一性的假说;;五、酶的命名和分类; 第二节 酶的分子结构与功能;酶;*各部分成分在催化反应中的作用;辅助因子分类 （按其与酶蛋白结合的紧密程度）;或称活性部位，酶分子中直接和底物结合并起催化反应的空间局限（部位）。; 催化部位 酶分子中促使底物发生化学变化的部位称为催化部位，催化部位决定酶所催化反应的性质。 ;活性中心的特点;Asp; 2. 必需基团;;三、与酶的高效率有关的主要因素（策略）;酶分子中可作为亲核基团和酸碱催化的功能基团;胰凝乳蛋白酶反应的详细机制（1）;胰凝乳蛋白酶反应的详细机制（2）;第三节 酶促反应的动力学 ;本节需要解决的问题;一、底物浓度对反应速度的影响（一）、曲线的基本含义;;;当底物浓度高达一定程度;（二）米氏方程式;;;;米氏方程的推导;当反应速度为最大反应速度一半时;Km的意义; Vmax的意义 定义：Vmax是酶完全被底物饱和时的反应速度， 与酶浓度成正比。;Lineweaver–Burk的作图法 — 双倒数作图法。;二、酶浓度对酶促反应速度的影响;三、温度对酶促反应速度的影响;四、pH对酶促反应速度的影响;五、激活剂对酶作用的影响;六、抑制剂对酶反应的影响 酶的抑制作用 有些物质能与酶分子上某些必须基团结合（作用),使酶的活性中心的化学性质发生改变，导致酶活力下降或丧失。 失活作用 凡可使酶变性而引起酶活力丧失的作用。 抑制剂 能够引起酶的抑制作用的化合物。 抑制剂的特点 a.在化学结构上与被抑制的底物分子或底物的过渡状态相似。 b.能够与酶的活性中心以???共价或共价的方式形成比较稳定的复合体或结合物。 ;两者的区别： ;抑制作用的类型; (1)不可逆抑制作用 抑制剂与酶反应中心的活性基团以共价形式结合，引起酶的永久性失活。;非专一性不可逆抑制剂;专一性不可逆抑制剂 ;（2）可逆性抑制作用;竞争性可逆抑制;;竞争性抑制曲线; 磺胺类药物的抑菌机制 与对氨基苯甲酸竞争二氢叶酸合成酶;非竞争性可逆抑制;;非竞争性抑制曲线;①定义：抑制剂不与酶结合，只与ES复合物结合，引 、 起酶活性下降。 ②动力学：km减少，酶对底物亲和力增加，最大反应 速度减少，也无法通过改变底物浓度而改 变反应抑制剂的影响。 举例：多底物反应中 ;;反竞争性抑制曲线;（一）、酶分离纯化的一般原则－与蛋白质相似 1、材料的预处理； 2、破碎细胞； 3、蛋白质的粗提（与杂质分开）； 4、将蛋白质沉淀出来（等电点、盐析法、有机溶剂法）； 5、粗制品纯化（凝胶过滤法、纤维素柱色谱法、亲和层系法）。 ;1. 酶活力（enzyme activity, 也称酶活性） ;习惯上沿用的单位如 :;2. 酶活力单位的表示方法;3．测定酶活力时应注意几点 ;4. 酶活力的测定方法 ;习惯上沿用的单位如 :;（2）荧光法（fluorometry） ;（3）酶偶联分析法(enzyme coupling assay) ;例：测己糖激酶的活性 ;5. 酶的比活力（specific activity，也称比活性） ;终点法（终止法）：测定完成一定量反应所需要的时间，一般 测产物的生成量比较好。 动力学方法（连续法）：测定一定时间内所起的化学变化量， 灵敏度较高。 ; 1. 纯化倍数 2. 比活力 3. 回收率; ;一 、酶原与酶原的激活; 酶原激活的机理;赖; 酶原激活的生理意义;二、变构酶;酶的别构（变构）效应示意图;;; 同促效应：配体相同。当一个效应物与酶结合后，  影响另一相同的效应物与酶的结合。 异促效应：配体