白藜芦醇对实验性免骨关节炎软骨il1β inos蛋白表达的影响-effect of resveratrol on expression of il 1β inos protein in experimental osteoarthritis-free cartilage.docxVIP

原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作孝签名：一=雄学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：导师签名：壶!丝日期：丝年—￡月上日，‘，，‘，，1，·‘、T摘要目的：评价白藜芦醇对实验性兔骨关节炎软骨细胞产生IL．1p、iNOS蛋白的影响，阐明白藜芦醇治疗骨关节炎的可能机制。方法：36只新西兰大白兔，6．8个月龄，雌雄各半，体重1．5．2．5kg，随机留下6只(雌雄各3只)，以作为健康对照组(A组)，余下30只均以Hulth法复制膝模型。无菌条件下取右膝关节内侧纵切口长约2cm，显露膝关节，然后切断前交叉韧带、内侧副韧带，完整切除内侧半月板，术中注意保护软骨面不受损伤，术后关节不固定，允许自由活动。术后8周随机抽样选取6只行X线和病理学检查证实造模成功。余下24只大白兔，随机分为4组：模型对照组(B组)、白藜芦醇高(C组)、中(D组)、低(E组)剂量组。术后第8周开始每日清晨，A、B组以5ml含0．1％二甲基亚砜的蒸馏水灌胃；白藜芦醇各组每天以相应剂量白藜芦醇溶液(浓度为60mg／m1)C组每日剂量为120mg／kg／D组每日剂量为60mg／kg／d，E组每日剂量为30mg／kg／d灌胃，连续六周。第14周处死大白兔，取右膝关节股骨内踩内侧软骨组织，置于液氮低温保存，，以备检测蛋白和病理形态学观察检查。应用Western．blot法检测IL．1D、iNOS蛋白浓度。HE染色光镜下观察组织形态学，按Mankin7S评分方法对关节软骨病理改变进行组织形态学评分。所有实验数据采用SPSS17．0统计软件进行统计分析。l结果：①与A组(正常组)相比，B组(模型对照组)关节软骨组织HE染色光镜下呈明显退行性变，Mankin7S评分(7．72VS0．00)显著增高；C组、D组、E组(白藜芦醇高、中、低剂量干预组)与I硕J：学位论文B组Mankin7S评分(2．42、2．63、3．13vs7．72)，评分降低，有统计学意义(PO．05)．②在A组、B组、C组、D组、E组的软骨组织中都有IL．1p、iNOS蛋白表达；模型对照组与健康组比，B组IL．113、iNOS蛋白浓度分别增高60．4％与84．7％，有统计学意义(Po．01)。③白藜芦醇高、中、低剂量干预组与模型对照组比较，软骨组织中IL．1p蛋白浓度下降23．5％、24．7％、20．3％，iNOS浓度下降19．8％、20．O％、10．6％，有统计学意义(PO．01)；高、中、低剂量组与A组相比较，IL．1p蛋白浓度升高22．7％、20．8％、28．O％，iNOS浓度升高48．1％、47．8％、65．2％，有统计学意义(PO．01)。④白藜芦醇高、中剂量相比较没有明显差异(pO．05)，高中剂量与低剂量组相比较有明显差异(pO．05)。结论：①所检测标本，经病理学检查证实，本研究利用得经Hulth法复制OA模型是成功有效的。②软骨组织蛋白检测显示，白藜芦醇可以有效降低软骨组织中的炎症因子IL．1p和iNOS的产生，其作用强度与剂量有关，这为白藜芦醇将来的抗炎作用机制提供科学依据。关键词骨关节炎；白藜芦醇；白细胞介素-1p；诱导型一氧化氮酶硕I：学位论文英文摘要ABSTRACTObjective：ToobservetheeffectofResveratolontheexpressionofInterleukin-113(IL-lp)andInduciblenitricoxidesynthase(iNOS)inArticularChondrocyteinExperimentalOAofRabbit．ToelucidatethemechanismandprobabilityofResveratolinthetreatmentofosteoarthritis．Mehtods：Sixones(threemalesandthreefemales)wererandomlyselectedfrom36NewZealandwhiterabbits(6-8monthsold，1．5—2．5kg，18malesand18females