白藜芦醇诱导淋巴细胞白血病molt-4细胞凋亡及作用机制研究-resveratrol induces apoptosis of molt - 4 cells in lymphoblastic leukemia and its mechanism.docxVIP

目录中文摘要．．1英文摘要．．：3英文缩写6研究论文白藜芦醇诱导淋巴细胞白血病MOLT．4细胞凋亡及其作用 机制的研究引言。：7 l i!三i．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．···．．．．···．······．，7第一部分白藜芦醇抑制白血病MOLT-4细胞增殖的初步研究前言刚舌58材料与方法9结果多日：术·上j．13附图．14附表．17讨论．18小结．19参考文献．20第二部分白藜芦醇诱导白血病MOLT-4细胞凋亡时W州E1基因表达研究前言刖吾．．2=z．．22材料与方法．．23结果．．27附图．．28附表．．29讨论．．30小结32参考文献．·33结论．．34综述白藜芦醇抗白血病作用的分子机制研究进展35致谢41个人简历．．42中文摘要白藜芦醇诱导淋巴细胞白血病MOLT一4细胞凋亡及其 作用机制的研究摘要目的：研究白藜芦醇体外对淋巴细胞白血病MOLT．4细胞的抑制作用 及其凋亡诱导作用，并探讨其作用机制，以期为白藜芦醇在抗白血病方面 的临床应用提供实验依据。方法：．1 以人淋巴细胞白血病MOLT．4细胞为研究对象，设对照组和加药组(白 藜芦醇终浓度分别为12．5、25、50、loo、200pmol／L)，作用于MOLT_4 细胞24、48、72h后，用MTT法检测细胞增殖抑制率。2设对照组和加药组(白藜芦醇终浓度为loo¨mol／L)，分别作用于 MOLT-4细胞48h后，瑞一吉染色及透射电镜观察凋亡细胞的形态变化。 3设对照组和加药组(白藜芦醇终浓度分别为50、100pmol／L)作用于 MOLT-4细胞48h后，流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡率。 4对照组和加药组(白藜芦醇终浓度分别为50、100Ilm01／L)，分别作用于MOLl’4细胞48h后，半定量RT-PCR技术检测W州ElmRNA的表达水平，分析白藜芦醇诱导MOLT-4细胞凋亡的可能机制。结果：1 与对照组相比，不同浓度白藜芦醇作用于MOLT-4细胞24、48、72h 后，对该细胞均有抑制作用(pO．05)，各浓度组24、48、72h抑制率如下： 12．5pmol／L依次为3．84％、17．52％、29．32％；25pmol／L8．77％、23．86％、36．11％；50pmol／L11．38％、32．79％、53．92％；100“mol／L依次为19．24％、43．33％、62．50％；200¨mol／L依次为26．5 1％、57．64％、74．98％；其中最 大抑制率74．98％为200“mol／L终浓度作用72h后。在一定时间内，白藜 芦醇对MOLTl4细胞的生长抑制作用随药物浓度的增加而增强；在同一药 物浓度下，白藜芦醇对MOLlV细胞的生长抑制作用随药物作用时间的延 长而增强；白藜芦醇对MOLT．4细胞的抑制作用呈时间一剂量依赖性。 2与对照组相比，白藜芦醇作用于淋巴细胞白血病MOLT．4细胞48h后， 可出现细胞内部超微结构的改变及较典型的细胞凋亡形态学变化，如细胞中文摘要体积变小，核染色质浓集，部分核膜呈锐角突起，线粒体和粗面内质网等 细胞器减少，部分嵴和微绒毛消失，胞质内出现空泡变性等。3与对照组 相比，不同浓度白藜芦醇作用于白血病MOLT．4细胞48h后，GO／G1期细 胞和G2／M期细胞比率下降，S期细胞比率明显上升，由(42．5±O．2)％ 到(78．2±0．4)％，细胞发生了S期阻滞；对照组细胞凋亡率为(1．52± O．09)％，而白藜芦醇处理组细胞凋亡率分别上升为：50斗m01／L(7．1l± O．30)％，lOO肛mol／L(17．8±O．40)％。 4不同浓度白藜芦醇(50、loo“m01／L)分别作用于MOLT-4细胞48h后，ImPCR检测结果，对照组MOU’-4细胞WWEl／GAPDH灰度值O．586±O．06，白藜芦醇处理组MOLT-4细胞WwEl／GAPDH灰度值分别为：50um01／Lo．356±O．03；100“mol／LO．382±O．05；与对照组比较，经白藜芦 醇作用后，随着药物浓度的增加MOLT．4细胞的WⅣElmRNA的表达水 平明显降低。结论：白藜芦醇对白血病MOLT．4细胞有明显的增殖抑制作用，并 且在一定范围内呈时间一剂量依赖性；白藜芦醇能影响MOLT-4细胞的细 胞周期分布，将细胞周期阻滞于S期；白藜芦醇可以通过抑制WALVEl基 因的表达，来诱导肿瘤细胞的凋亡。关键词：白藜芦醇；MOLl’4细胞；增殖抑制作用；细胞凋亡；WAVEl基因英文摘要Stlldy on the apoptosis eflfect and its mechanisms of leukemiaMOl：卫4 cenSin