常氧和低氧条件下,人喉鳞癌细胞分泌的血管内皮生长因子对人脐静脉内皮细胞增殖及分化的影响-effects of vascular endothelial growth factor secreted by human laryngeal squamous carcinoma cells on proliferation and differentiation of human umbilical vein endothelial cells .docxVIP

㈣洲㈣㈣Ⅲ㈨㈣ ㈣洲㈣㈣Ⅲ㈨㈣ m灿IY1 900529目 录中文摘要 ．．1英文摘要 3研究论文 常氧和低氧条件下，人喉鳞癌细胞分泌的血管内皮生长因子 对人脐静脉内皮细胞增殖及分化的影响前言日lJ舌 ．．．．i ．55材料与方法 ．6结果 1 l附图 1 3附表 1 7讨论 1 9结论 23参考文献 ．23综述HIF．1、VEGF、KDR及Flt．1对肿瘤血管形成的调控 ．25 致谢 ．．32个人简历 ．33中文摘要常氧和低氧条件下，人喉鳞癌细胞分泌的血管内皮生长因子中文摘要常氧和低氧条件下，人喉鳞癌细胞分泌的血管内皮生长因子 对人脐静脉内皮细胞增殖及分化的影响摘 要目的：头颈肿瘤同其它大多数实体肿瘤一样，瘤体内的部分细胞处于 缺氧环境之中。实体肿瘤持续性生长和转移需要有新生血管的形成，以新 生血管为靶点对实体肿瘤进行生物学治疗已成为近些年来新的研究热点。 本实验利用人喉鳞癌(H印．2)细胞和人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelia Cell，HUVEC)，研究在简单模拟实体瘤内部常氧和低氧 条件(Hypoxia Inducible Factor 1 alpha，HIF．1伐)下，与喉鳞癌血管生成 相关的三个指标VEGF(vascular endothelial growth f．actor)，F1t-1(vascular endothelial growth f-actor receptor 1) ，KDR(Vascular endothelial gro、Ⅳth factor receptor 2)的表达，探讨各个蛋白在喉鳞癌转移过程中的确切作用， 为头颈肿瘤的治疗奠定实验基础。方法：1 Hep．2细胞培养于含10％新生小牛血清、青霉素(100U／mL)、链霉 素(100“∥mL)的RPMI．1640培养基中，常规传代培养，置于37℃， 5％C02，20％02(常氧)或37℃，5％C02，2％02，93％N2(低氧) 的培养箱中。2待Hep．2细胞进入对数生长期后，将细胞分为2组：A组(常氧24h 组)、B组(低氧24h组)。收集各组细胞培养上清，用于刺激人脐 静脉内皮细胞生长。免疫细胞化学染色检测人脐静脉内皮细胞Flt．1、 l①R蛋白表达。MTT法检测人脐静脉内皮细胞的增殖情况。3待H印．2细胞进入对数生长期后，将细胞分为2组：A组(常氧3h 组、常氧6h组、常氧12h组、常氧24h组、常氧48h组)、B组(低 氧3h组、低氧6h组、低氧12h组、低氧24h组、低氧48h组)。收 集各组细胞及其培养上清，ELISA法检测各组细胞及其培养上清 VEGF蛋白的表达。结果：中文摘要1中文摘要1 免疫细胞化学结果：Flt．1、I①R蛋白主要位于人脐静脉内皮细胞 胞浆和胞核，呈棕黄色，且低氧48h上清刺激组高于常氧48h上清 刺激组，差异有统计学意义(尸O．05)。2 MTT结果：Hep．2细胞常氧上清和低氧上清均能刺激人脐静脉内 皮细胞生长。低氧上清组四个时间组(48h、72h、96h、120h)刺 激效果均高于常氧组相应各时间(48h、72h、96h、．120h)，差异 有统计学意义(尸O．05)。3 ELISA结果：VEGF在Hep．2细胞和细胞上清中，常氧组(12h、24h、48h)的表达量均明显低于低氧组(12h、24h、48h)，差异均有统计学意义(尸O．05)。结论：1 低氧H印．2细胞培养上清能明显促进人脐静脉内皮细胞Flt．1、I①R蛋白的表达。 2低氧Hep．2细胞培养上清能明显促进人脐静脉内皮细胞的生长。3低氧能明显促进H印．2细胞VEGF蛋白的表达。关键词：喉鳞癌；H印．2细胞；人脐静脉内皮细胞；VEGF；F1t一1；l①R英文摘要Effbct英文摘要Effbct of VEGF secreted by Hep一2 cellson the proliferation and di∞ferentiation of HUVECUnner norm0Xla 0r nyp0Xla C0ndInonABSTRACTObjectiVes：Similar to most tumors， some cells in laryngocarcinoma under hypoxia condition．The durative growth and metastasis of the tumord印end on neoVascular fo肌ation mostly．Terefore，the therapy ta唱et ofneoVessels has recently become the new hotspot of tumor biological research． Thi