白藜芦醇改善大鼠非酒精性脂肪肝的机制分析-mechanism analysis of resveratrol improving nonalcoholic fatty liver in rats.docxVIP

目录中文摘要………………………………………………………………………………1英文摘要………………………………………………………………………………4前言…………………………………………………………………………………7第一部分白藜芦醇对大鼠非酒精性脂肪肝的改善作用…………………………91.材料与方法…………………………………………………………………92.实验结果……………………………………………………………………123.讨论…………………………………………………………………………15第二部分白藜芦醇改善大鼠非酒精性脂肪肝的机制研究………………………171.材料与方法…………………………………………………………………172.实验结果……………………………………………………………………253.讨论…………………………………………………………………………27参考文献……………………………………………………………………………30综述…………………………………………………………………………………34植物多酚与代谢综合征………………………………………………………34参考文献……………………………………………………………………………41硕士研究生期间工作小结…………………………………………………………47致谢…………………………………………………………………………………48全文缩写词…………………………………………………………………………49白藜芦醇改善大鼠非酒精性脂肪肝的机制研究学位申请人：辛鹏导师：郝丽萍副教授摘要非酒精性脂肪肝(Nonalcoholicfattyliverdisease,NAFLD)是指由非酒精因素引起的肝内严重的脂肪变性。超重与肥胖、高脂血症等是非酒精性脂肪肝的主要病因。早期诊断、调节饮食、增加运动锻炼、加强治疗为预防和控制非酒精性脂肪肝的重要措施。非酒精性脂肪肝包含一系列与肝内脂肪蓄积相关的病征，其发病机制错综复杂，研究认为非酒精性脂肪肝与脂质代谢异常、胰岛素抵抗、肥胖和代谢综合征等密切相关，其中脂质代谢异常被广泛认为是其发病的最主要和最基本机制之一。低密度脂蛋白受体(lowdensitylipoproteinreceptor,LDLr)和清道夫受体B族I型(scavengerreceptorclassBtypeI,SR-BI)及甲状腺激素受体β1(thyroidhormonereceptorβ1,TRβ1)在肝脏调控脂质代谢过程中发挥重要作用。白藜芦醇是一种生物学效应非常广泛的植物多酚，其功效包括减少脂质合成、抗炎、延长寿命等，有着治疗多种慢性病的巨大潜力。本实验采用高脂高糖喂养大鼠形成非酒精性脂肪肝，研究白藜芦醇对NAFLD的改善作用及作用机制（对TRβ1，LDLr和SR-BI表达的影响），为防治NAFLD提供新的思路。第一部分：白藜芦醇对大鼠非酒精性脂肪肝的改善作用目的：高脂高糖饲料喂养Wistar雄性大鼠，建立非酒精性脂肪肝的动物模型，观察白藜芦醇（resveratrol,Res）对非酒精性脂肪肝的改善作用。方法：Wistar雄性大鼠40只，随机平均分成4组：正常组（Control），高脂高糖组（HFS），两个白藜芦醇剂量组（HFS+Res1，HFS+Res2），剂量分别为50、100mg/kg·bw。采用高脂高糖喂养方式建立大鼠非酒精性脂肪肝模型，实验期间准确记录体重、进食量等指标。基础饲料由华中科技大学同济医学院实验动物学部提供，基础饲料供能比为：蛋白质26.48%，脂肪10.19%，碳水化合物63.33%。高脂饲料供能比为：蛋白质18.33%，脂肪54.22%，碳水化合物27.45%（其中蔗糖7.8%）。13周末每组断头处死7只大鼠并检测血清及肝匀浆总胆固醇（TC）、总甘油三酯（TG）含量；每组其余3只大鼠取出肝脏进行HE染色和油红O染色。结果：高脂高糖组大鼠体重、能量利用率、血清及肝脏TC和TG明显高于正常组，而白藜芦醇干预有显著的改善效果；HE染色和油红O染色能明显观察到高脂高糖组大鼠肝细胞明显的脂肪变性，而白藜芦醇各剂量组均得到了明显的改善。结论：高脂高糖喂养能引起大鼠肝脏严重的脂肪变性，引发非酒精性脂肪肝，而白藜芦醇干预能起到明显的改善作用。第二部分：白藜芦醇改善大鼠非酒精性脂肪肝的机制研究目的：探究白藜芦醇改善大鼠非酒精性脂肪肝过程中血清甲状腺激素（TH）的变化，以及白藜芦醇对甲状腺激素受体β1(TRβ1)，低密度脂蛋白受体(LDLr)和清道夫受体B族I型(SR-BI)表达的影响。方法：使用夹心法酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒测定大鼠血清FT3和FT4含量。用TRIzol提取肝脏的总RNA，应用Real-TimeRT-PCR检测大鼠肝脏组织TRβ1，LDLr和SR-BImRNA的表达水平；用