白血病人 系统性红斑狼疮患者与正常人外周血白细胞gpi-pld基因多态性的进一步研究-further study on gpi - pld gene polymorphism in peripheral white blood cells of leukemia patients with systemic lupus erythematosus and normal people.docxVIP

摘要目前人们已相继发现约150余种不同来源、不同功能的蛋白质通过GPI锚定于细胞表面，其中包括补体调节蛋白、细胞粘附分子、淋巴细胞分化抗原、肿瘤标志物、细胞受体等。它们功能广泛，涉及细胞识别、生长、分化和程序性死亡等重要的生命过程。人类造血细胞质膜上表达的分化抗原(cDl约10％是锚定蛋白，它们对造血细胞的生成、分化、成熟等起着重要作用。人类细胞质膜上表达的CD如CD46、CD55、CD59等也属于GPI锚定蛋白，它们对机体的免疫功能起着重要作用。而人体中只有GPI．PLD能特异性水解GPI锚定蛋白中的肌醇磷酸酯键。现已确证人类仅一个GPI—PLD基因，它定位于染色体6P22．1—6P22．3。人血浆中存在大量的GPI．PLD，约5～10儿g．L-】，不同疾病患者其m浆酶活性改变不同。目的：研究GPI—PLD基因多态性与异常表型之间的关系，进一步阐明对疾病发生机制的作用。探讨GPI—PLD基因多态性与糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D活性的相关性。方法：采用PCR．SSCP方法检测湖南地区汉族96名正常人、96名白血病(Leukemia)患者、48名系统性红斑狼疮(systemiclupuserythematosus，SLE)患者GPI．PLD基因外显子14区多态性分布情况；同时定量检测三组人群白细胞GPI．PLD活性及该基因多态性分布与酶活性之间的关系。结果：白血病患者、SLE患者与正常人外周血白细胞GPI—PLD基因外显子14区均存在4处核苷酸改变：外显子第1257位bpC—T密码子ATC(Ile),ATT(IIe)、1298位bpT—C密码子CTG(Leu)--+CCG(Pro)、1218位bpc_÷A密码子AGC(Ser)--+AGA(Arg)、1257位bpC—A密码子ATC(Ile)一A1『A(Ile)；而在1142位bpC—G密码子从C(Asn)一AAG(Lys)、1222位bpC—T密码子CCC(Pro)-+TCC(Ser)、1207位bpC—T密码子CCA(Pro)，TCA(Ser)、1278位bpG—T密码子CTG(Leu)_÷TCC(Leu)、1152bp位碱基缺失Tcc—TC、1224bp位碱基缺失CCG，CG、1287bp位碱基缺失TTG—TG的突变仅在SLE人群中硕上学位论文发现一例。经SSCP检出的阳性率分别为：白血病患者28．12％，SLE患者22．91％，正常人20．83％。检测48名SLE患者外周血白细胞GPI．PLD活性(转化底物百分率)，发现SLE患者酶活性较正常人(96名)显著性增高；检测96名白血病患者(包括A组：48例急性非淋巴细胞性白血病；B组：3l例急性淋巴细胞性白血病；C组：12例慢性粒细胞性白血病；D组：5例慢性淋巴细胞性白血病)外周血白细胞GPI．PLD活性，发现A、D组患者酶活性较正常人显著性增高、B、C组较正常人显著性降低，A、B、c、D各组之间酶活性改变均具有显著性。结论：湖南地区汉族白血病患者、SLE患者与正常人外周血白细胞GPI．PLD基因具有多态性，外显子14区的移码突变仅在SLE患者中发现，SLE疾病的发生可能与该基因的表达有一定的联系。该酶在白血病人、SLE患者白细胞中的活性有改变，不同类型白血病人酶活性改变不同，SLE患者酶活性较正常人明显增高，这表明酶活性的改变与多态性位点的组合形式可能有一定的关联。关键词：GPI锚定蛋白，糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D，单核苷酸多态性硕+学位论文AbstractABSTRACTUptoday,morethanl50kindsofeellsurfaceproteinshavebeenfoundtobeanchoredtotheplasmidmembrancebyglycosyl—phosphatidylinositol(GPI)．Theseproteinsincludecomplementregulatoryproteins，lymphocytedifferentiationantigens，tumormarkers，etcTheytakepartinsomeimportantactivities，suchascellrecognition，cellproducing，celldifferentiation，programmedcelldeathandSOon．Furthmore，abouttenpercentCDonplasmalemmaofhematopoieticcellshavebeenfoundtobeanchoredbvGPI．theseCDmaybeaffectthegrowth，differtiationandmaturationofhematopoieticcells．ItiSknownthatsever