骨形态发生蛋白复合物结合cadcam技术原位修复喉甲状软骨缺损的实验研究-experimental study of bone morphogenetic protein complex combined with cad cam in situ repairing laryngeal thyroid cartilage defect.docxVIP

PAGE PAGE 10骨形态发生蛋白复合物结合 CAD/CAM 技术原 位修复喉甲状软骨缺损的实验研究中 文 摘 要目的：结合计算机辅助设计/计算机辅助制造（CAD/CAM）技术与快 速成型（RP）技术，以重组人骨形态发生蛋白-2（rhBMP-2）、Ⅰ型胶 原、羟基磷灰石（HA）为材料，制作个性化人工材料支架修复兔甲状 软骨缺损，寻求一种原位修复甲状软骨缺损的新途径，为临床个性化 甲状软骨缺损的修复和重建提供新的技术和方法。方法：泡沫凝胶注模法制备不同 HA 体积分数（60%、50%、40%）的 标准样件（直径 10cm、高 10cm 圆柱体）并行生物力学检测；运用 256层极速 CT 对新西兰大白兔的喉部进行扫描，重建出其甲状软骨的三维结构，以正中矢状面为界，利用计算机软件模拟手术切除一侧甲状软 骨，以未切除侧甲状软骨为镜面，获得切除侧结构的镜像图像，三维重建缺损的软骨支架部分，采用 CAD 软件完成快速模具的分模设计， 并将凸凹模具以.STL 格式导出；应用 RP 技术达到支架模具的精确可控制造；并以重组人骨形态发生蛋白-2（rhBMP-2）、Ⅰ型胶原和羟基磷 灰石（HA）为重建兔甲状软骨缺损的支架材料，运用泡沫凝胶注模法 制备不同 HA 体积分数（60%、50%、40%）的个性化人工材料支架，检 测其孔隙率。结合不同 HA 体积分数标准样件生物力学及人工材料支架孔隙率检测结果，选定适合的支架作为植入体。选取 32 只新西兰大白兔（雌雄各半，雌兔月龄 6-10 个月，雄兔月龄 8-10 个月，体重 2.5-3kg），随机选取 30 只分为 2 组，每组 15 只，以正中矢状面为界，切 除一侧甲状软骨，A 组为缺损区植入 rhBMP-2/CHA 复合支架，B 组为缺损区植入 CHA 支架；支架均为术前制备的个性化人工材料支架。分别于术后 1、3、7 周各组随机抽取 5 只兔取材行大体标本观察、组织学 检查，其中术后 7 周在两组中随机抽取 4 只兔行电子喉镜检查。另 2只兔分为 C 组，植入非个性化 rhBMP-2/CHA 支架，支架为大致按照实验动物单侧甲状软骨制作的支架，术后 7 周行电子喉镜检查、取材行 大体标本观察及组织学检查。结果:1、不同 HA 体积分数标准样件生物力学检测结果HA 体积分数 60%组、HA 体积分数 50%组抗压强度明显高于 HA 体积分 数 40%组；HA 体积分数 60%组抗压强度明显高于 HA 体积分数 50%组， P0.05 为差异有统计学意义。2、不同 HA 体积分数支架的孔隙率检测结果HA 体积分数 40%组、HA 体积分数 50%组支架孔隙率明显高于 HA 体积 分数 60%组；HA 体积分数 40%组支架孔隙率明显高于 HA 体积分数 50% 组，P0.05 为差异有统计学意义。3、术后一般情况 术后动物一般情况良好，当日动物清醒，发声正常，开始饮水，次日开始进食；术后切口 I/甲愈合，不用拆线，线结 10 天左右自行脱落，切口无明显出血、红肿、渗出及感染、化脓等并发症，未见免疫 排斥反应。4、电子喉镜检查结果术后 7 周在 A、B 两组中随机选取 4 只兔行电子喉镜检查见：两组实 验动物喉腔黏膜无炎症、无肉芽生长，声带闭合良好，喉腔通畅、无 塌陷现象的发生。C 组实验动物喉腔黏膜无炎症、无肉芽生长，声带闭 合欠佳，喉腔欠通畅。5、大体观察术后 1 周，A、B 两组材料均被纤维结缔组织包裹，材料部分降解。 术后 3 周，A 组支架材料降解完全，可见少量半透明状的骨性结节；B 组支架材料降解完全，较多纤维结缔组织生成，未见骨样组织覆盖。 术后 7 周，A 组支架材料降解完全，缺损区有块状骨性组织生成，切面呈黄白色，质地较硬，且新生骨质与对侧未切除甲状软骨边缘紧密结合；B 组支架仍只见纤维结缔组织包膜；C 组支架材料亦降解完全， 缺损区有块状骨性组织生成，切面呈黄白色，质地较硬，但新生骨质 与对侧未切除甲状软骨边缘结合欠紧密。6、组织学检查结果A 组术后 1 周：炎症反应明显，以中性粒细胞浸润及单核样组织细胞 为主，多见肉芽组织，可见新生的毛细血管，材料部分降解，手术边 缘区域软骨细胞反应性增生。A 组术后 3 周：炎症反应不明显，材料降解完全，伴有大量多核样组 织细胞增生及吞噬，局部可见单核样组织细胞增生；手术区域软骨母 细胞增生伴成软骨区域形成；手术区微血管增生伴肌性血管形成。A 组术后 7 周：炎症反应不明显，材料降解完全，伴有大量多核样组 织细胞增生及吞噬，局部可见单核样组织细胞增生；手术区域软骨母 细胞增生伴成软骨区域形成，可见软骨细胞增生及软骨骨质形成。B 组术后 1 周：炎症反应明显，以中性粒细胞浸润及单核样组织细胞 为主，多见肉芽组织，可见新生的毛细血管，材料部