黄芩苷―壳寡糖复合物制备及其表征.docVIP

黄芩苷―壳寡糖复合物制备及其表征 　　[摘要] 该文将壳寡糖应用于黄芩苷复合物的制备，以提高药物的体外溶出度，考察复合物的基本性质。采用溶剂法制备黄芩苷壳寡糖复合物，运用差示扫描量热法（DSC）、扫描电镜法（SEM）、X-射线粉末衍射法（XRD） 和红外振动光谱（IR）等分析方法对其结构和理化性质进行了分析，并考察其溶出行为。实验结果显示黄芩苷-壳寡糖摩尔比1∶1制备的复合物能显著提高黄芩苷的溶出度。DSC和XRD分析结果显示黄芩苷以非晶形态存在，IR结果表明壳寡糖与黄芩苷之间存在相互作用。黄芩苷-壳寡糖复合物能够显著提高药物的体外溶出度。 　　[关键词] 黄芩苷；壳寡糖；复合物 　　黄芩苷是中药黄芩中提取的一种黄酮类化合物[1]，具有清热解毒、抗炎[2]、利胆、降压、利尿、抗变态反应、抗焦虑[3]等多方面的药理作用，临床上在抗氧化、抗肿瘤、抗HIV以及治疗心血管疾病等方面具有显著疗效[4]。然而黄芩苷水溶性、脂溶性均较差，造成口服制剂体内吸收差、生物利用度低，从而限制了其临床应用[5]。为改善黄芩苷的溶出度，固体分散体技术有较多的研究报道，但是载体用量一般较大[6-8]。 　　壳寡糖是壳聚糖降解而获得的2～10个氨基葡萄糖以β-1，4-糖苷键连接而成的低聚糖，也叫几丁寡糖，学名为β-1，4-寡糖-葡萄糖胺[9-10]。壳寡糖是壳聚糖系列的低相对分子质量产品，具有水溶性好、生物活性高、功能作用大、易被人体吸收等突出特点，在医药、食品、农业等领域应用广泛[11]。王星[12]通过硬脂酸与壳聚糖之间的盐键结合制备了硬脂酸壳聚糖复合物。本文尝试将含有氨基的壳寡糖与含有羧基的黄芩苷通过相互作用形成复合物，以期待改善黄芩苷的溶出度，并考察复合物的物相特征。 　　1 材料 　　黄芩苷对照品（中国食品药品检定研究院，批号110715-200514） ；黄芩苷（南京泽郎医药科技有限公司，批号Z，纯度98%）；壳寡糖（重均相对分子质量1 000左右，浙江金壳药业有限公司，批号D130304018）；数显气浴恒温振荡器（金坛市双捷实验仪器厂）；DSC204-差示扫描量热仪（德国Netzsch公司）；6390LV-扫描电镜（日本电子公司）；D8型X-射线衍射仪（德国Bruker公???）；470-傅立叶红外光谱仪（美国Nicolet公司）；Agilent 1100高效液相色谱仪；甲醇、甲酸为色谱纯，水为高纯水，其余试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 样品的制备 　　2.1.1 黄芩苷-壳寡糖复合物的制备 称取黄芩苷原料药适量，加适量95%乙醇溶解。按药物与载体摩尔量比3∶1，2∶1，1∶1分别称取壳寡糖，溶解于适量95%乙醇。药物与载体的乙醇溶液充分混匀，在45 ℃减压下旋转蒸发除去溶剂，真空干燥，研细过80目筛，即得黄芩苷-壳寡糖复合物，置干燥器内保存备用。 　　2.1.2 物理混合物的制备 按摩尔量比例1∶1称取黄芩苷原料药和壳寡糖，混合均匀，制得物理混合物，备用。 　　2.2 方法学考察 　　2.2.1 色谱条件 Luna C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm ）；柱温30 ℃；流动相甲醇-0.1%甲酸水（52∶48）；流速1 mL? min-1；检测波长280 nm；进样量10 μL。 　　2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品6.34 mg，精密称定，置于25 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得253.60 mg?L-1黄芩苷对照品储备液。 　　2.2.3 线性关系考察 分别精密吸取黄芩苷对照品储备液0.1，0.2，0.5，1.0，2.0，5.0 mL各置10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，分别量取10 μL注入HPLC仪，测定峰面积（A），将质量浓度（C）与A进行线性回归，得标准曲线方程A=25.527C+13.835，r=0.999 7；线性范围2.536～126.80 mg?L-1。 　　2.2.4 精密度试验 取同一浓度黄芩苷对照品溶液，连续进样5次，测得黄芩苷峰面积的RSD 1.3%，精密度良好。 　　2.2.5 稳定性试验 取黄芩苷对照品溶液，于配制后0，2，4，8，12 h进样，黄芩苷的峰面积没有明显变化，RSD 0.90%，表明黄芩苷溶液在室温下12 h内稳定。 　　2.2.6 加样回收率试验 取6份已知黄芩苷含量的复合物，精密称定，分别置50 mL 量瓶中，分别精密加入黄芩苷对照品溶液适量，甲醇稀释至刻度，按上述色谱条件测定含量，计算回收率，黄芩苷平均回收率分别为100.2%，RSD 1.8%。 　　2.3 溶解度 　　分别取过量的黄芩苷和黄芩苷-壳寡糖复合物各3份置于10 mL具塞刻度试管中，加蒸馏