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不同产地粉葛四种异黄酮含量比较 　　【摘要】目的：考察不同产地粉葛中葛根素、3-甲氧基葛根素、大豆苷、大豆苷元的含量，为制定粉葛药材质量标准提供参考依据。方法：采用RP-HPLC法，色谱柱Hypersil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相：乙腈-0.2%磷酸，梯度洗脱；流速1.0 ml/min，柱温30℃，检测波长250 nm。结果：葛根素、3-甲氧基葛根素、大豆苷、大豆苷元的线性范围分别为12.4～620ng、1.52～76ng、2.4～120ng、3.28～164 ng，四种成分的平均加样回收率分别为101.1%、99.86%、101.78%、103.39%，RSD分别为1.43%、1.29%、0.95%、1.21%。结论：该方法简便快速，重复性良好，结果准确可靠，可用于不同产地粉葛药材中四种异黄酮类成分的含量测定。 中国论文网 /1/viewhtm　　【关键词】HPLC；葛根素；3-甲氧基葛根素；大豆苷；大豆苷元 　　【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2016）03-0010-02 　　粉葛为豆科植物甘葛藤Pueraria thomsonii Benth的干燥根，载于《中国药典》[1]，具有解肌退热、生津止渴的功效、临床主要用于外感发热头痛、项背强痛、口渴等症状。粉葛的主要化学活性成分有葛根素、3-甲氧基葛根素、大豆苷、大豆苷元等异黄酮类化合物[2]，具有降血压、降血糖、保护肝脏、治疗颈椎病等作用[3-4]；同时粉葛富含淀粉，因此具有较高的医用和食用价值。近年来，文献报道对粉葛异黄酮多指标成分的含量测定[5-8]，但是随着粉葛栽培面积的不断扩大，出现了许多栽培品种，因此不同产地药材之间的有效成分含量存在着一定的差异，进而影响了药材的质量。研究采用高效液相色谱法同时对广东、广西、安徽粉葛中四种异黄酮成分的含量，为粉葛药材质量控制提供方法和依据。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 Waters2695高效液相色谱系统（2998型二极管阵列检测器）；KQ3200DE型数控超声波清洗器（昆山市超市仪器有限公司）；Thermo超纯水设备；电子分析天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）；FW135中草药粉碎机（天津市泰勒特仪器有限公司）。 　　[JP+2]1.2 药品与试剂 3-甲氧基葛根素对照品（批号：141217，成都普菲德生物技术有限公司）；葛根素对照品（批号：10752-201313）、大豆苷对照品（批号：111738-201302）、大豆苷元（批号：111502-200402）均购自中国食品药品检定研究院；粉葛（批号：150420，安徽本草国药饮片有限公司；批号：150302，安徽省金芙蓉中药饮片有限公司；批号：1504005，江西樟树天齐堂中药饮片有限公司）；甲醇、乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 对照品溶液的制备 精密称取各对照品适量，分别用甲醇制成每毫升中含有葛根素0.062 mg、3-甲氧基葛根素0.0076 mg、大豆苷0.012 mg、大豆苷元0.0164 mg即可。 　　2.2 供试品溶液的制备 取不同产地的粉葛粉末（过三号筛）约1.0 g，精密称定，分别置于具塞锥形瓶中，精密加入30%乙醇100 ml，称定重量，超声提取30 min，放冷，再称定重量，用30%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，过0.45 μm微孔滤膜，即得。 　　2.3 色谱条件 色谱柱Hypersil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；检测波长：250 nm；柱温：30 ℃；流速：1.0 ml/min；进样量：10 μl；梯度洗脱条件见表1。色谱见图1。 　　2.4 方法学考察 　　2.4.1 线性范围考察 分别精密吸取上述对照品溶液0.2、0.5、1、2、5、10 ml，置于10 ml容量瓶内，以甲醇定容至刻度，摇匀，0.45μm微孔滤膜滤过。分别按“2.3”项下条件测定，以峰面积（A）为纵坐标，进样量为横坐标（X，ng）绘制标准曲线，得到葛根素、3-甲氧基葛根素、大豆苷、大豆苷元的回归方程，见表2。 　　2.4.2 精密度试验 取混合对照品溶液，按“2.3”项色谱条件重复测定6次，测得葛根素、3-甲氧基葛根素、大豆苷、大豆苷元的峰面积RSD分别为0.52%、1.36%、1.00%、0.35%，结果表明仪器精密度良好。 　　2.4.3 重复性试验 取同一来源的粉葛6份，分别按“2.2”项下制备供试品溶液，按“2.3”项下色谱条件进行测定，记录峰面积，计算葛根素、3-甲氧基葛根素、大豆苷、大豆苷元的平均含量分别为0.29%、0.04%、0.04%、0.03%，RSD分别为1.61