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不同可拉种质花粉离体萌发研究 　　摘 要 以2份可拉种质为材料，进行可拉花粉离体萌发研究。结果表明，可拉花粉萌发的最适培养基浓度为20 %蔗糖+200 mg/L H3BO3+300 mg/L Ca（NO3）2。不同种质花粉萌发规律不相同，24 h中Cl-1花粉萌发率随着温度的升高而持续升高，Cl-2花粉萌发率在12：00达到最高继而降至较低水平。本研究结果将为可拉杂交育种，提高稔实率提供理论支撑。 中国论文网 /1/viewhtm　　关键词 可拉 ；花粉 ；离体萌发 　　中图分类号 S571.4 　　Abstract Studied with 2 copies of Korah germplasm materials of pollen germination on the body. The results showed that the tensile pollen germination of the optimum medium concentration of 20 % sucrose +200 mg/L H3BO3+300 mg/L Ca （NO3）2. The pollen germination rate of different germplasm was not the same. The germination rate of Cl-1 in 24 h increased with the increase of temperature， and the germination rate of Cl-2 pollen reached the highest and then decreased to a lower level in 12：00. The results for Korah cross breeding， improve fertility rate and provide theoretical support. 　　Key words Korah ； pollen ； germination in vitro 　　可拉（Cola acuminata schott ex endl）属梧桐科常绿乔木，原产于热带西非常绿低地和山区森林，广泛分布于南北纬15°内的热带地区，主要分布于北纬6°-7°以内的狭窄区域[1]。目前，可拉已种植于非洲、南美、大洋洲、东南亚的20多个国家和地区[2]，海南省及云南西双版纳是中国适宜种植可拉的地区。可拉种子含2 %的咖啡因和脂肪、蛋白质等，具有与茶、咖啡同样的刺激兴奋作用，可用于制酒、饮料、巧克力和药物等[3-4]。据联合国粮农组织（FAO）统计，2012年世界可拉总产量为29.8万t，是西非热带地区重要的经济作物，具有广阔的发展前景。 　　中国于20世纪60年代开始引种可拉，经过多年观察，在海南兴隆地区能够开花结果[5]。通过试种发现，中国引种的2份可拉种质每年均能正常开花，然而稔实率偏低[6]；将2份可拉种质混合种植，稔实率有所提高，并且种质Cl-1的稔实率明显高于种质Cl-2。花粉萌发和生长是受精以及结实的基础，不同种质、不同环境均会影响花粉萌发以及花粉管生长。本研究以中国热带农业科学院香料饮料研究所收集保存的2份可拉种质为材料，筛选可拉花粉离体萌发最佳的培养体系，分析海南种植可拉稔实率低的原因，也为可拉受精的生理特性研究、种质创新奠定技术基础。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　供试材料为中国热带农业科学院香料饮料研究所保存的2份可拉（Cola acuminata）种质Cl-1和Cl-2（图1）。 　　1.2 方法 　　1.2.1 花粉采集 　　于晴天在9：00、12：00、15：00 3个时间点剪取开放的可拉花序，在实验室用镊子夹取雄蕊，用细毛笔将花粉扫落于干净的培养皿中，装于离心管中，避光，备用。 　　1.2.2 花粉培养方法 　　花粉采用液体培养法。将湿润的滤纸平铺于直径为20 cm的培养皿中，凹面载玻片置于滤纸之上，并滴上配置好的各种液体培养基50 μL，再将收集的花粉撒播到培养基表面，为了保湿用封口膜将培养皿密封。置于恒温培养箱中，28 ℃黑暗条件下培养3 h。 　　1.2.3 试验处理 　　为筛选适宜的立体萌发培养基，利用不同浓度的蔗糖（Sucrose）、硼酸（H3BO3）、硝酸钙（Ca（NO3）2）共组合出18种培养基（表1），每个处理3次重复。经过培养，花粉萌?l率最高的培养基即为最适培养基，用于观察比较不同种质花粉萌发。 　　利用筛选出的15号培养基，分别将在9：00、12：00、15：00 3个时间点收集的Cl-1和Cl-2可拉花粉置于28 ℃黑暗条件下恒温培养3 h，每份种质3次重复。 　　1.2.