酶动力学09.pptVIP

3?? 反竞争性抑制 酶只有在与底物结合后，才能与抑制剂结合。 E+S→ES+I →ESI≠ P 常见于多底物的酶促反应中 反竞争性抑制作用 ESI ES P+ E E+S + I 反竞争性抑制剂 k1 k-1 k2 Km 降低 vmax 降低 斜率不变 +抑制剂 KI’ 1/[S] 1/v 1/vmax -1/Km 斜率=Km/vmax (1+ KI/[I])/Vmax 斜率= Km/vmax v [S] vmax Km Km/(1+ KI/[I]) Vmax/(1+KI/[I]) - (1+ KI/[I])/Km 竞争性抑制作用 非竞争性抑制作用 竞争性非竞争性抑制作用机理示意图 底物与酶专一性结合 有无抑制剂存在时酶促反应的动力学方程 抑制作用的实践意义 （1）药物作用机理和抑制剂型药物的设计与开发 （2）了解生物体的代谢途径，进行人为调控或代谢 控制发酵 （3）通过抑制剂试验研究酶活性中心的构象及其化 学功能基团，不仅可以设计药物，而且也是酶 工程和化学修饰酶、酶工业的基础 酶抑制剂作用实例 药物名称（中文） 药物名称（英文） 靶酶 医用或药用 阿司匹林 Aspirin 前列腺素合成 中的环加氧酶 消炎 青霉素 Penicillin 肽聚糖转肽酶 抗菌素 甲氨蝶呤 Methotrexate 二氢叶酸还原酶 抗肿瘤 叠氮胸苷 azidothymine （AZT） HIV逆转录酶 艾滋病治疗 利托那韦 Ritonavir HIV蛋白酶 艾滋病治疗 万艾可（伟哥） Viagra cGMP磷酸二酯酶 勃起功能障碍（ED） 二 不可逆的抑制作用 抑制剂与酶不可逆结合，使酶的活性下降，无法用稀释、 透析和超滤等物理方法除去抑制剂而使酶复活。 1 基团特异性抑制剂 这一类抑制剂在结构上与底物无相似之处，但能共价修饰 酶活性中心上的必需侧链基团而导致酶活性不可逆的失活 。由于许多氨基酸残基含有亲核侧链基团，所以充当基团 特异性抑制剂的一般是亲电试剂。 有机磷化合物、碘代乙酸和环氧化物等，前者包括二异丙基氟磷酸（DIPF） 和甲基氟磷酸异丙酯（沙林）。DIPF能够修饰多种酶活性中心的Ser残基上的 羟基，导致这些酶活性的丧失。 乙酰胆碱酯酶的基团特异性抑制剂 2. 底物类似物抑制剂 这一类抑制剂在结构上相似于底物，因此在活性中心与酶结合，然后不可逆地修饰酶活性中心上的必需基团，导致酶活性的丧失。 例如，甲苯磺酰苯丙氨酰氯甲酮（TPCK）为糜蛋白酶的底物类似物，在与糜蛋白酶活性中心结合以后，共价修饰其中的His残基，导致其活性的抑制。再如，甲苯磺酰赖氨酰氯甲酮（TLCK）为胰蛋白酶的底物类似物，在与胰蛋白酶活性中心结合以后，共价修饰活性中心Cys残基上的巯基，导致其活性的丧失 TPCK对糜蛋白酶活性中心His的修饰 3 自杀型抑制剂 自杀型抑制剂是受酶本身来激活的不可逆抑制剂，在与酶结合以后，受到酶的催化发生几步反应，但并不形成产物，而是变成高度反应性的化合物后，转而修饰酶的必需基团导致酶活性的丧失。 N,N-二甲基炔丙胺对单胺氧化酶的自杀型抑制 第四节 别构酶的动力学 酶分子的非催化部位与某些化合物可逆地非共价结合后导致酶分子发生构象改变，进而改变酶的活性状态，称为酶的别构调节(allosteric regulation)，具有这种调节作用的酶称别构酶(allosteric enzyme)。别构酶促反应底物浓度和反应速度的关系不符合米氏方程。 一 别构酶的性质 一种典型的别构酶具有以下性质： 1. 速度/底物浓度曲线为S型 S形曲线显示了底物与酶结合的正协同性。在底物浓度很低的时候，只有少数酶活性中心与底物结合，这时底物与酶的亲和性很低，即使提高底物浓度，也只能导致反应速度很小的增加。然而，随着更多的底物与酶结合，正协同效应开始起作用，致使酶与底物的亲和性大增，反应速度随之猛升。当底物浓度提高到一定水平的时候，别构酶就像双曲线酶一样被底物饱和，速度接近Vmax。 2. 具有别构效应物 别构酶除了含有活性中心以外，还有别构中心。别构中心是底物以外的分子结合的位点，这些分子被统称为别构效应物。其中起激活酶活性的物质被称为别构激活剂相反起抑制作用的被称为别构抑制剂。 3. 对竞争性抑制的作用表现双相反应 4. 温和变性可导致别构效应的丧失 5. 通常是寡聚酶 6. 与非别构酶相比，别构酶占少数 典型的别构酶催化的反应速度与底物浓度的S 型曲线 在底物浓度本来就不高